厚壳贻贝特殊活性蛋白的结构与功能研究

发布时间：2023-04-22 03:38

　　贻贝隶属于软体动物门(Mollusca)，是一种常见的海洋双壳贝类，主要生长在海岛的东北面有海浪冲击的岩礁上，以浙江舟山海域分布最多。贻贝之所以能够牢固的粘附在潮湿和动荡的环境中的固体基质表面，是由于贻贝足丝蛋白极强的粘附性能,这对于理解足丝蛋白分子间的相互作用机制具有基础性和现实性的意义。贻贝粘附力强可以黏附在固体表面，如石头、木材、金属、混凝土、聚氯乙烯（PVC），聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）、聚四氟乙烯（PTFE）。足丝的黏附强度取决于粘附蛋白的种类，蛋白彼此之间的相互作用，黏附基质的性质，黏附发生时的环境条件（例如盐度、温度、pH、季节），机体所处的生物学状态（年龄与代谢状况）以及贻贝的种类等。贻贝足丝中的蛋白质种类应该在35种以上，尚有大量的贻贝足丝蛋白分子未被鉴定。以厚壳贻贝（Mytilus coruscus）为研究对象，采取了蛋白质增溶抽提技术，利用醋酸-尿素抽提液和醋酸-盐酸胍抽提液，尽可能溶解贻贝足丝蛋白；同时采取shotgun质谱技术分析上述抽提后的可溶性蛋白和不溶性足丝蛋白；获得的质谱数据搜索贻贝的EST库。通过上述方法我们总计获得了14种新型贻贝足丝蛋白及其匹配...

【文章页数】：129 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第一章 贻贝足丝蛋白和抗菌肽的研究进展
    1.1 贻贝足丝蛋白
        1.1.1 背景
        1.1.2 贻贝足丝蛋白粘附机制
        1.1.3 贻贝足丝蛋白的相互作用
            1.1.3.1 一般表面分析技术
            1.1.3.2 贻贝足丝蛋白-基质和蛋白-蛋白的相互作用
            1.1.3.3 贻贝足丝蛋白仿生材料
    1.2 贻贝抗菌肽
        1.2.1 背景
        1.2.2 四种贻贝抗菌肽
            1.2.2.1 防御素（defensins）
            1.2.2.2 贻贝肽（myticins）
            1.2.2.3 贻贝素（mytilins）
            1.2.2.4 贻贝霉素（mytimycins）
        1.2.3 抗菌肽纯化技术
第二章 利用质谱技术结合贻贝 EST 库搜索鉴定厚壳贻贝新型足丝蛋白
    2.1 实验材料与实验方法
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 实验方法
    2.2 结果与讨论
        2.2.1 质谱分析及 EST 数据库搜索结果
    2.3 结论
        2.3.1 胶原蛋白类似分子
        2.3.2 参与形成分子交联的新型足丝蛋白
        2.3.3 参与足丝保护的新型足丝蛋白
        2.3.4 其他未知功能的新型足丝蛋白
第三章 厚壳贻贝抗菌肽 Mytichitin-1 的全长 cDNA 克隆及序列分析
    3.1 材料与方法
        3.1.1 动物与试剂
        3.1.2 厚壳贻贝抗菌肽 Mytichitin-1 全长基因克隆
    3.2 实验结果
        3.2.1 贻贝性腺总 RNA 的提取
        3.2.2 贻贝 Mytichitin-1 基因的 5'RACE
        3.2.3 贻贝 Mytichitin-1 的序列分析
        3.2.4 Mytichitin-1 的亚细胞定位及信号肽预测
        3.2.5 Mytichitin-1 的序列比对及进化树分析
    3.3 讨论
参考文献
在读期间发表的学术论文及研究成果
致谢



本文编号：3796839