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海洋红酵母培养条件优化及提高虾青素得率研究

发布时间:2023-05-18 03:18
  我国是一个水产养殖大国,随着水产养殖业逐步的扩大,天然饲料资源的局限性,我们不得不投放一些人工饲料,这样致使水域环境的污染加重,养殖动物的免疫力下降,为了改善这种情况,我们迫切需要一种新的天然饲料代替传统的人工饲料。海洋红酵母是一种单细胞真核生物,对生存环境的要求非常粗放,而且他的繁殖速度非常快并且体内的色素也可以快速的积累的优点。并且菌体富含虾青素,虾青素能提高水产动物的免疫力,改善肉质的口感。但是传统的培养方式与培养条件所产生的虾青素含量非常少,本文针对提高海洋红酵母菌浓度和虾青素产量进行了实验。本文通过对海洋红酵母的摇瓶培养,对其培养条件进行优化,优化后的发酵条件不仅降低了成本,也大大的提高了虾青素浓度。通过实验最终确定其在2brix的麦汁培养基中生长最好,该菌在pH为5.0,转速为180r/min,接种量为10%,温度为28℃的条件下菌数达到9.14×108CFU/mL,比传统的培养方式及条件的菌浓度(8.56×108CFU/mL)提高了6.45%。本文通过实验发现运用酸-热法对酵母细胞进行破壁最终得到的虾青素产量最大,进一步优化了酸-热法破壁的条件为盐酸浓度3mol/L、盐酸...

【文章页数】:53 页

【学位级别】:硕士

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摘要
Abstract
第一章 综述
    1.1 海洋红酵母简介
    1.2 自然海洋红酵母的生长环境
    1.3 海洋红酵母的生长条件
        1.3.1 碳源
        1.3.2 氮源
        1.3.3 无机盐
        1.3.4 盐浓度及光照对海洋红酵母生长的影响
        1.3.5 pH对海洋红酵母生长的影响
        1.3.6 接种量对海洋红酵母培养的影响
        1.3.7 温度对海洋红酵母生长的影响
    1.4 海洋红酵母的用途
        1.4.1 生产饲料添加剂
        1.4.2 食品添加剂
    1.5 海洋红酵母产物—虾青素
        1.5.1 虾青素的功能
            1.5.1.1 虾青素的抗氧化功能
            1.5.1.2 虾青素的抗癌功能
            1.5.1.3 虾青素的着色功能
            1.5.1.4 提高繁殖性能
        1.5.2 虾青素的应用
        1.5.3 虾青素的生产开发
            1.5.3.1 从水产加工废弃物中提取虾青素
            1.5.3.2 化学合成法生产虾青素
            1.5.3.3 利用藻类生产虾青素
            1.5.3.4 利用酵母菌产虾青素
    1.6 本课题研究意义
    1.7 实验内容
第二章 海洋红酵母的培养条件优化
    2.1 材料与仪器
        2.1.1 材料
        2.1.2 实验仪器
    2.2 培养基的制备
        2.2.1 种子培养基
        2.2.2 基本发酵培养基
        2.2.3 麦汁培养基
            2.2.3.1 发麦工艺
            2.2.3.2 麦芽焙焦工艺
            2.2.3.3 麦芽糖化工艺
            2.2.3.4 配制原麦汁
        2.2.4 玉米培养基
            2.2.4.1 玉米发芽工艺
            2.2.4.2 玉米焙焦工艺
            2.2.4.3 玉米糖化工艺
            2.2.4.4 玉米浆的制备
    2.3 实验方法
        2.3.1 斜面种子的制备
        2.3.2 液体种子制备及摇瓶培养
        2.3.4 DNS法测定还原糖
        2.3.5 α-氨基氮含量的测定
        2.3.6 α-氨基氮含量的计算
        2.3.7 培养基中菌数的测定
    2.4 实验结果与讨论
        2.4.1 葡萄糖标准曲线
        2.4.2 α-氨基氮的含量
        2.4.3 不同培养基对海洋红酵母菌数影响
        2.4.4 温度对海洋红酵母菌数影响
        2.4.5 pH对海洋红酵母菌数的影响
        2.4.6 接种量对海洋红酵母菌数的影响
        2.4.7 转速对海洋红酵母菌数的影响
    2.5 本章小结
第三章 虾青素的提取条件优化
    3.1 材料与方法
        3.1.1 菌种
        3.1.2 实验试剂
        3.1.3 实验主要仪器
        3.1.4 菌体培养和收集方法
    3.2 破壁方法
        3.2.1 酸—热法
        3.2.2 机械法
        3.2.3 细胞自溶法
        3.2.4 甲苯法
    3.3 浸提方法
    3.4 虾青素含量测定
    3.5 破壁方法的选择
    3.6 酸一热法破壁条件的优化
    3.7 实验结果
    3.8 本章小结
第四章 前体物质对虾青素产量及菌浓度的影响
    4.1 实验材料与仪器
        4.1.1 实验材料
        4.1.2 实验仪器
    4.2 不同前体物质对菌浓度和虾青素产量的影响
        4.2.1 实验方法
        4.2.2 实验结果
    4.3 番茄红素添加时间对菌浓度和虾青素产量的影响
        4.3.1 实验方法
        4.3.2 实验结果
    4.4 番茄红素添加质量对菌浓度和虾青素产量的影响
        4.4.1 实验方法
        4.4.2 实验结果
    4.5 响应面分析
        4.5.1 海洋红酵母菌发酵过程中虾青素含量的响应面回归模型方差分析
        4.5.2 海洋红酵母菌发酵过程中细胞数量的响应面回归模型方差分析
        4.5.3 发酵工艺条件的验证
第五章 菌种鉴定
    5.1 菌种鉴定方法
        5.1.1 变性
        5.1.2 PCR扩增
        5.1.3 测序
    5.2 26srDNA菌种鉴定结果
        5.2.1 琼脂糖凝胶电泳结果图
        5.2.2 测序结果
第六章 结论
参考文献
致谢



本文编号:3818565

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