过氧化物还原酶（Peroxiredoxin）4在日本囊对虾抗WSSV病毒感染中的功能与机制研究

发布时间：2024-03-03 14:47

　　研究背景先天免疫是单细胞生物到高等动物普遍具有的一种抵御外界病原微生物入侵的天然防御机制,是宿主进行自我保护的基础。无脊椎动物中只存在有先天免疫系统,之前在果蝇和线虫为代表的模式生物中对先天免疫系统的研究取得了较大进展。近年来,以对虾为代表的海洋无脊椎动物养殖业迅速发展,但由病原微生物引起的各种疾病给这些养殖业带来了巨大损失。所以,我们研究对虾的先天免疫机制,旨在为相关产业的病害防治提供理论上的依据和技术上的支持。研究的科学问题及意义已知,在需氧生物中,由过氧化氢酶,过氧化物还原酶和超氧化物歧化酶等组成的酶促反应抗氧化系统在生物体的先天免疫应答中发挥着重要作用。我们前期的研究结果表明,过氧化物还原酶4(Peroxiredoxin,Prx4),作为一类多功能的、广泛分布的硫醇依赖性的抗氧化蛋白,可以参与到对虾抗病毒免疫过程中。但是其分子机制尚不明确。本论文研究发现WSSV感染可以促进对虾Prx4蛋白分泌到血淋巴中,作为损伤相关分子模式(Damage-associated signaling molecules,DAMPs)促进血细胞中NF-kappa B转录因子的同源蛋白Dorsal入核...

【文章页数】：88 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.2酶促反应抗氧系统(FujiiandIkeda，ZooZb)

Ｆｉｇ?１．２?Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ?ｒｅａｃｔｉｏｎ?ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ?ｓｙｓｔｅｍ?（Ｆｕｊｉｉ?ａｎｄ?Ｉｋｅｄａ，?２００２ｂ）．??Ｐｎｃ的结构及分类在哺乳动物中了解的较为清楚。哺乳动物中的Ｐｎｃ由六个??亚家族组成，即Ｐｒｘｌ、Ｐｉ＿ｘ２、Ｐｒｘ３、Ｐｒｘ４、Ｐｒ....

图1.3哺乳动物中6种prx亚型的结构简图(Fujiiand撅da，ZooZb)

３、过氧化物还原酶与先天免疫??近年来，越来越多的证据证明几种Ｐｒｘ亚型成员参与一些生理病理过程如组??织修复、寄生虫感染和肿瘤发展，也在动物先天免疫反应中发挥功能。??在脊椎动物中，当小鼠的巨噬细胞、神经胶质细胞受到脂多糖ＬＰＳ的刺激??时，Ｐｒｘｌ、Ｐｒｘ５会上调表达，上调的....

图２．１?ＷＳＳＶ感染上调Ａ／ｙＰｒｘ４表达和分泌

进行了?ＭｙＰｒｘ４的体外重组表达、纯化和抗体制备。我们通过大肠杆菌（Ｋｃｏ／／）??Ｒｏｓｅｔｔａ（ＤＥ３）表达成熟歸Ｐｒｘ４，并通过亲和纯化获得神Ｐｒｘ４重组蛋白（ｒＡ办Ｐｒｘ４?）。??ｒＭｊＰｒｘ４的分子量是３３ｋＤａ，它主要表达在上清中（图２．１Ｂ）。我们使用纯化的??....

图２．２Ｃ是重组蛋白ｒＴ＾Ｐｒｘ４的酶活性检测结果

ｐ°＾ｎ?—■■ｎｓ?ｈ??＂Ｊ?０．０?ＩＩ?，?Ｉ?１?Ｉ?１?ｉ?，—??Ｔｉｍｅ?ｐｏｓｔ－ｃｈａｌｌｅｎｇｅ?ｗｉｔｈ?ＷＳＳＶ（ｈ）??图２．２胞外的均‘Ｐｒｘ４可以促进Ｄｏｒｓａｌ入核。（Ａ）血细胞中Ｄｏｒｓａ丨在ＷＳＳＶ病??２８??

本文编号：3917948