草鱼白介素6及其受体的功能鉴定

发布时间：2024-03-24 16:50

　　在哺乳动物中,白介素6(IL-6)是一个具有广泛生物学效应的细胞因子,它在免疫系统,神经系统,肝脏的再生以及代谢调控中发挥着重要的作用。IL-6发挥生理作用必须先结合其专一性受体(IL-6R),再结合第二个受体gp130形成三聚体,进而起始胞内信号。虽然IL-6及其受体的功能在哺乳动物免疫系统中已广泛研究,但在硬骨鱼中,这方面的研究还比较缺乏。本论文以草鱼为模型,以重组表达草鱼IL-6蛋白为工具,研究IL-6R的性质以及它在炎症中扮演的角色。同时,由于IL-6R存在着跨膜和可溶胞外区两种形式,本论文还重组表达了IL-6R的可溶性胞外区(s IL-6R),并对其异于膜形式的性质进行了探索。本研究用毕赤酵母真核表达系统表达了草鱼IL-6蛋白,并对其活性进行验证;同时克隆得到了草鱼IL-6R全长cDNA序列,该序列全长2223 bp,其中ORF共1785 bp,编码594个氨基酸。多序列比对显示草鱼IL-6R的氨基酸序列与其他物种的一致性仅有38.03%-45%。组织分布结果表明IL-6R mRNA在头肾中的表达量最高;本研究用原核表达和变复性的方法获得了草鱼sIL-6R蛋白;制备和验证了草...

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1IL-6受体系统

第一章绪论合进而达到中和IL-6的目的。只有当IL-6的浓度远远大度，IL-6才能发挥其应有的功能。根据最新的报道，当，而sIL-6R的浓度远远大于IL-6时，能够阻断IL-6的sIL-6R结合然后形成复合物，最后被sgp130中和[44形式存在....

图1-1IL-6信号转导图

图1-1IL-6信号转导图IL-6及IL-6R的研究现状IL-6研究概述第一个具有先天性免疫和获得性免疫系统的物种，与和淋巴结；并且硬骨鱼具有独特的免疫器官，头肾。与哺乳动物相比独特而有趣。细胞因子是构成免疫系疫细胞的通讯中发挥着重要作用。而IL-6是一类非....

图2-1pPICZa质粒图谱

第二章草鱼IL-6蛋白的重组表达第二章草鱼IL-6蛋白的重组表达实验材料.1实验动物、菌株和质粒实验动物：购买于成都通威水产公司的草鱼，体重约为1kg。本论文所有验均按照四川省实验动物管理条例的要求和标准执行。实验菌株：JM109，毕赤酵母X33，均由实验室保....

图2-2毕赤酵母表达草鱼IL-6单克隆挑选

的草鱼IL-6蛋白和从草鱼HKL细胞提取的总蛋白样品，上样GE凝胶电泳。电泳结束后进行转膜，而后进行封闭，封闭结束后组IL-6蛋白预吸附后的抗体作为一抗进行孵育，另一张膜用未进行抗体作为一抗进行孵育，一抗孵育结束后进行二抗孵育，以及显影验结果获得草鱼IL-6蛋白....

本文编号：3937754