迟缓爱德华氏菌中糖酵解持家酶的胞外分泌

发布时间：2024-05-14 18:57

　　糖酵解酶是生物体的持家酶,通常在胞内发挥生理生化作用。有研究表明,一些细菌的糖酵解酶会分泌到胞外发挥非糖酵解功能,在病原菌的侵染和毒力方面具有重要作用。迟缓爱德华氏菌是广宿主的胞内寄生菌,能感染多种淡水和海水鱼类并导致其死亡,本工作对该病原菌的多种糖酵解酶蛋白的非糖酵解功能进行了相关研究。首先利用免疫印迹和酶联免疫吸附法,考察了5种糖酵解酶在50种不同来源爱德华氏菌的胞外分泌,发现这些糖酵解酶蛋白均能分泌到病原菌胞外,尽管各毒株的糖酵解酶胞外分泌量与其毒力并无直接关联,但同一种属的菌株其胞外分泌量一般较相似,且同一菌株分泌的糖酵解酶蛋白量一般也具有相关性。其次检测了迟缓爱德华氏菌T3SS、T4SS、T6SS和Tat分泌系统功能缺失的突变株胞外5种糖酵解酶蛋白的分泌情况,发现这些分泌系统的缺失并没有导致糖酵解酶蛋白胞外分泌的显著减少,相反部分突变株胞外蛋白的分泌量还有所增加,暗示着这些分泌系统在EIB202的糖酵解酶蛋白的分泌中不起主要作用;而毒株EIB202周质空间中普遍存在5种糖酵解酶蛋白,表明这些蛋白可能通过两步分泌途径先运输到周质空间进而转运到胞外的。随后的细胞侵染和抗体中和实验...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图５．１?ｐＥＴ－２８ａ（＋）质粒图谱??Ｆｉｇ．?５．１?Ｐｌａｓｍｉｄ?ｐｒｏｆｉｌｅ?ｏｆ?ｐＥＴ－２８ａ（＋）．??５．２．?

５．２实验材料??５．２．１菌株和质粒??本章所用菌株和质粒如表５．１。ｐＥＴ－２８ａ（＋）质粒图谱如图５．１。??表５．１菌株及其基因型??Ｔａｂｌｅ?５．１?Ｓｔｒａｉｎｓ?ａｎｄ?ｔｈｅｉｒ?ｇｅｎｏｔｙｐｅ．??菌株和质粒?ｍ?来源??菌株??Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ?ｃｏ....

图5.4SDs一以GE分析蛋白诱导纯化倩况

ＡＧＥ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ?ａｎｄ?ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ．?（Ａ）?ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ?ａｎＳＴ，?Ｍ：?ＰａｇｅＲｕｌｅｒ?Ｐｒｅｓｔａｉｎｅｄ?Ｐｒｏｔｅｉｎ?Ｌａｄｄｅｒ；?（Ｂ）?ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ?ａｎｄ?ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉ....

图5.7FLAG重组表达菌株的免疫印迹实验

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本文编号：3973359