红树莓及其提取物对HepG2细胞脂肪积累的影响

发布时间：2020-04-09 12:47

【摘要】：红树莓主要栽培在我国东北地区,富含多种生物活性成分,具有较高的药用价值、食用价值和食疗价值,对脂类代谢的调节也具有一定的积极作用。本文研究了红树莓原汁、红树莓果酒、红树莓果提取物、籽提取物的活性成分含量、多酚物质构成及其与鞣花酸、覆盆子酮对HepG2细胞脂肪积累的影响,得到的主要结论如下:1.测定红树莓原汁、红树莓果酒、红树莓果和籽提取物中总酚、黄酮、原花青素、花色苷的含量。试验结果表明:红树莓原汁中总酚14.90±0.78 mg GAE/g、黄酮7.45±0.52mg RE/g、原花青素 75.42±3.79mg CE/g、花色苷 3.53±0.26mg CGE/g;红树莓果酒中总酚 35.01±2.06 mg GAE/g、黄酮 21.21±1.03 mg RE/g、原花青素 149.20±4.90 mg CE/g、花色苷 4.69±0.32 mg CGE/g;红树莓果提取物中总酚 15.18±0.94 mg GAE/g、黄酮 1.25±0.07mg RE/g、原花青素 20.35±1.06mg CE/g、花色苷 1.15±0.70mg CGE/g;红树莓籽提取物中总酚15.35±1.55 mg GAE/g、黄酮11.22±0.66 mg RE/g、原花青素27.08±0.99mg CE/g、花色苷未检出。2.采用超高效液相色谱-串联质谱法(ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)对红树莓原汁、果酒、果提取物和籽提取物中的活性成分进行分析,试验结果表明:红树莓原汁、果酒、果提取物和籽提取物中共鉴定出芦丁、槲皮素、异鼠李素、没食子酸、咖啡酸、鞣花酸六种活性成分,其中红树莓果酒中总量化多酚含量最高;红树莓原汁中含有芦丁、儿茶素、隐绿原酸、异鼠李素等10种活性成分;红树莓果酒中含有没食子酸、槲皮素、鞣花酸、咖啡酸等9种活性成分;红树莓果提取物中含有儿茶素、表儿茶素、芦丁、鞣花酸等13种活性成分;红树莓籽提取物中含有表儿茶素、儿茶素、鞣花酸、槲皮素等12种活性成分。3.采用油红O染色方法,以脂质含量和甘油三酯(triglyceride,TG)含量为指标,对不同油酸造模剂诱导HepG2细胞后细胞内脂肪积累情况进行研究比较,筛选出合适的造模剂诱导细胞建立脂肪积累模型。试验结果表明:以二甲基亚砜(DMSO)为溶剂的油酸造模剂A选用500 μmol/L的浓度诱导效果最好,此时细胞内脂质含量和TG含量最高,分别是对照组的1.75倍和1.71倍;以牛血清白蛋白(BSA)为溶剂的油酸造模剂B选用1000 μmol/L的浓度诱导效果最好,此时细胞内脂质含量和TG含量最高,分别是对照组的2.10倍和1.93倍;酒精造模剂诱导细胞后未能观察到细胞内明显地脂肪积累;通过比较不同油酸造模剂对细胞脂肪积累影响,最终采用1000 μmol/L的油酸造模剂B诱导HepG2细胞建立脂肪积累模型。4.噻唑蓝(MTT)法试验结果表明:分别采用浓度为200 μg/mL的红树莓果提取物、4mg/mL的红树莓籽提取物、2%的红树莓原汁、1%的红树莓果洒、40μmol/L的鞣花酸、250 μmol/L的覆盆子酮作为红树莓及其活性成分干预HepG2细胞脂肪积累的上限质量浓度。5.红树莓提取物能显著降低1000 μmol/L油酸诱导的肝细胞脂肪积累,其中200μg/mL红树莓果提取物处理细胞时,与模型组相比,胞内脂质含量降低了 25.93%,TG含量降低了 37.23%,低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)含量降低了 32.03%,高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)含量升高了 32.36%;4 mg/mL红树莓籽提取物处理时,胞内脂质含量降低了47.12%,TG含量降低了 46.23%,LDL-C含量降低了 35.32%,HDL-C含量升高了35.51%;2%红树莓原汁处理时,胞内脂质含量降低了 27.61%,TG含量降低了27.20%,LDL-C含量降低了 23.30%,HDL-C含量升高了 23.60%;1%红树莓果酒处理时,胞内脂质含量降低了 15.13%,TG含量降低了 11.22%,LDL-C含量降低了11.33%,HDL-C含量升高了 12.36%;40 μmol/L鞣花酸处理时,胞内脂质含量降低了29.64%,TG含量降低了 29.40%,LDL-C含量降低了 20.09%,HDL-C含量升高了14.61%;250 μmol/L覆盆子酮处理时,胞内脂质含量降低了 23.18%,TG含量降低了28.24%,LDL-C含量降低了 13.64%,HDL-C含量升高了 19.27%。表明红树莓及其提取物能够降低HepG2细胞内脂肪的积累。
【图文】：

为进一步明确红树莓及其提取物中的酚类物质的具体组成，利用ＵＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法逡逑分析鉴定红树莓及其提取物中酚类物质。采用外标法进行酚类物质的定量分析。红树莓逡逑及其提取物的色谱图如图２－１。质谱检测参数如表２－２所示，，测定结果如表２－３所示。逡逑－ｎｚ邋ｗｒｍ逡逑｜？ｉｏ＊１逦〖红树

本文编号：2620775