牦牛骨胶原蛋白肽的制备及其功能特性研究

发布时间：2020-05-23 00:26

【摘要】：牦牛骨中有丰富的胶原蛋白,为了合理的开发利用牦牛骨资源,本文以牦牛骨为原材料提取牦牛骨胶原蛋白,并以DPPH·和OH·自由基清除率为指标制备牦牛骨胶原抗氧化肽,以ACE酶活性抑制率为指标制备ACE抑制肽,并对所制备的牦牛骨胶原蛋白肽进行纯化。具体工作内容如下:1.在单因素实验的基础上,以牦牛骨胶原蛋白提取率为评价指标,根据Box-behnken实验设计原理,采用超高压耦合酸酶法提取牦牛骨胶原蛋白工艺,得出最佳工艺条件:采用石油醚脱脂2 h,使用0.5%EDTA溶液进行脱钙处理36 h,超高压处理压力为350 MPa、处理时间为10 min,酶用量0.4 g/mL、固液比为1:290 g/mL、提取时间为10.5 h,实际测得提取率为58.95%。2.分别以DPPH·清除率和OH·清除率作为评价指标,根据Box-behnken实验设计原理,得出DPPH·清除率的最佳工艺条件:底物浓度为25 g/L,反应时间1.8h,pH值8.0,酶用量33μL时,得到的DPPH·自由基清除率为32.51%。OH·清除率的最佳工艺条件:底物浓度为25 g/L,反应时间1.0h,pH值8.4,酶用量45μL时,得到的OH·自由基清除率为74.51%。并采用制备型高效液相色谱法对牦牛骨胶原蛋白抗氧化肽进行纯化,得到三个有效组分,最优组分对OH·清除率为40.76%。3.以ACE酶活性抑制率为评价指标,采根据Box-behnken实验设计原理优化牦牛骨胶原ACE抑制肽制备工艺,得出最佳工艺条件:底物浓度为10 g/L,为反应时间1.0 h、pH值8.3、反应温度42℃,得到ACE活性抑制率为83.52%。并采用制备型高效液相色谱对牦牛骨胶原ACE抑制肽进行纯化,得到三个组分,分别对三个组分进行体外消化模拟实验,对模拟消化后产物测定ACE酶活性抑制率,最优组分对ACE酶活性抑制率为75.15%。
【图文】：

世界的牦牛数量约有 1400 万头，其中百分之九地区，除中国外，蒙古、印度、不丹、阿富汗、3]。青海省拥有牦牛 490 万头，占全国总数的 3能力极强，耐苦、耐寒、耐饥、耐渴，能在零下5-55435.28 Pa，氧分压为 14505.43-11679.01 Pa，环境条件下生存[5]。在鲜草短缺的季节，牦牛依短草为食。牦牛被称为“高原之舟”，能为高原物资，是高原地区一种不可或缺的生物资源。地区的牦牛主要以青藏高原牦牛为主，其体态结牦牛头大，额宽，角粗，皮松厚，前肢短而端正长毛蓬松。成年牦牛平均体重为 370 kg，屠宰率牦牛年产乳量 270 kg 以上，乳脂率 6%以上，成为 137 kg[6-11]。

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牦牛骨胶原蛋白肽的制备及其功能特性研究身是螺旋结构，，肽链上的三个氨基酸残基通过三个螺旋的中心区域，形成的细窄，只有甘氨酸能进入这个位置[34]，所以胶原蛋白形成 Gal-Glu-X 的氨排列形式。三个肽链借助范德华力、氢键和共价交联键，相互旋转，缠绕以和右手螺旋的方式形成三股螺旋结构，使胶原具有较高的拉伸强度。组成胶白的分子呈平行束状排列，通过共价交联可形成稳定的胶原纤维[39]。胶原分过分子内或分子间交联作用形成不溶性纤维[35-38]。胶原分子之间通过组氨酸氨酸之间的共价交联，这种交联通常发生在胶原分子的 C 端或 N 端之间[40]。
【学位授予单位】：青海师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：TS201.21

【参考文献】