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火龙果果皮多糖的结构、活性及其在制备亚麻籽油脂粉末中的应用研究

发布时间:2020-10-20 16:34
   本实验分离纯化了火龙果果皮中的多糖,并对其具体结构信息和生物活性进行初步探究;为解决亚麻籽油易氧化败坏并最大程度保护其生物活性的问题,选取了多糖中具有抗氧化、抗凝血和ACE酶抑制活性的酸性组分(PPP-3),将其结合甾醇和谷维素设计了一种新型能有效延缓亚麻籽油氧化败坏且具有靶向缓释作用的油脂粉末,并对其理化性质和体外模拟消化过程进行了研究。1.以火龙果果皮为原料,经过水提醇沉、脱色素、脱蛋白、层析柱纯化得到了三种火龙果果皮多糖(PPP-1、PPP-3、PPP-4)。利用紫外分光光度计(UV)、凝胶渗透色谱(GPC)、傅里叶红外光谱(FT-IR)、甲基化分析(GC-MS)以及核磁分析对多糖结构进行初步研究。结果表明三种多糖平均分子量分别为9.2kDa、552.0、936.9kDa,其单糖组成分别为 PPP-1:Man、Rha、GlcA、GaIA、Glc、Gal、Xyl,其摩尔比为 15.5:2.2:2.4:2.7:42.7:25.5:8.7,PPP-3:Man、Rha、GlcA、GalA、Gal、Xyl,其摩尔比为 20.4:21.9:3.3:48.8:2.2:3.1,PPP-4:Man、Rha、GlcA、GalA、Gal、Xyl,其摩尔比为13.1:13.8:2.4:66.3:1.6:2.5。结合各红外、甲基化和核磁分析结果得出了 PPP-1、PPP-3和PPP-4的可能结构。PPP-1可能是由→4)-Galp-(1→4)-Glcp-(1→4)-Manp-(1→4)-Glcp-(1→构成主链的;而→4)-α-D-GalpA-(1 → 2)-α-L-Rhap-(1 →3,6)-α-L-Manp-(1→可能是多糖组分PPP-3的主链结构;多糖组分PPP-4的主链可能是由→2,4)-Rhap-(1→4)-GalpA-(1 →3,6)-Manp-(1→4)-GalpA-(1 →构成。2.以总还原力、羟自由基以及DPPH的清除率为多糖抗氧化性评定的指标。结果表明三种多糖都具有一定抗氧化的生物活性,且PPP-1的总还原力和DPPH清除率的活性要高于其它俩者。以活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)以及凝血酶原时间(PT)为指标探究了三种多糖的体外抗凝血活性,结果表明PPP-1几乎不具有抗凝血活性,而酸性糖组分PPP-3和PPP-4均表现出良好的抗凝血活性,分别能够延长PT凝血时间72.88%和71.29%。用高效液相色谱法对三种多糖的ACE酶抑制活性进行了测定,结果表明只有PPP-3在全浓度范围内表现出ACE酶的抑制活性,当多糖浓度为1 mg/mL时最高抑制率可以达到48.2%。其它俩种多糖在浓度较低时则表现为ACE酶的促进作用,只有高浓度时才表现为抑制作用。3.根据甾留醇和谷维素在亚麻籽油中的结晶行为选择甾醇:谷维素为4:6的比例来改变亚麻籽油内部结构,以乳清蛋白和提取的酸性火龙果果皮多糖(PPP-3)作为外壳,吐温80做乳化剂,谷氨酰胺转氨酶做固化剂制得三种油脂粉末PE-0、PE-1和SE-1。对这三种油脂粉末进行含水量、包埋率、流动性、分层系数、复溶后平均粒径和Zeta电位、高温保藏酸价以及过氧化值(POV值)的测定,结果表明经甾醇和谷维素改变内部结构蛋白加火龙果果皮多糖(PPP-3)作为外壳的油脂粉末SE-1在各种理化性质测定中性能均高于其余俩种,并且能有效延缓亚麻籽油在贮藏期间的氧化败坏。对PE-0、PE-1和SE-1进行了体外模拟消化实验,经实验发现SE-1能够有效抵抗模拟胃酸消化,并且在模拟肠道消化过程中也表现出一定的抗性,SE-1具有靶向缓释的作用。
【学位单位】:浙江工商大学
【学位级别】:硕士
【学位年份】:2019
【中图分类】:TS209
【部分图文】:

洗脱曲线,火龙果,粗多糖,果皮


2.4结果与讨论??2.4.1紫外光谱分析??火龙果果皮粗多糖紫外光谱扫描检测结果如图2-2所示。在波长为260?nm??和280?rnn处没有明显的吸收峰,说明已除尽核酸和蛋白质等杂质[68]。??0-2?1??吸?i??光??庠?1??0.1?I?,??\??>?\??〇r〇?■?W!(—??—????????????????200,0?250,0?500.0?350.0?400.0?nm??波长??图2-2火龙果果皮粗多糖紫外光谱图??Figui*e?2-2?UV?spectra?of?pitaya?peel?crude?polysaccharides??2.4.2多糖的分离纯化??将火龙果果皮粗多糖先用DEAE-Celkilose?52柱分离,依次用纯水、0.1、0.2、??和0.3?mol/LNaC丨溶液洗脱,用苯酚-硫酸法跟踪检测,测得的洗脱曲线如图??17??

标准曲线,粗多糖,洗脱,火龙果


?1??浓度(mg/mL)??图24葡萄糖标准曲线??Figure?2-4?Standard?curve?of?determination?of?glucose??由图2-4可得线性回归方程y=0.641x+0.1219,R:=0.9951。根据相同的方法??对lmg/mL的粗多糖溶液进行吸光度测定,得到表2-3,根据表可知火龙果果皮??粗多糖中的总糖含量为82.85%±2.63%。??18??

标准曲线,标准曲线,葡萄糖,总糖含量


所以不再收集和进行进一步的研宄。??150.4??一??10?,PPP-1?PPP-3?厂?? ̄?nfiMjamAngfluai?〇.2—??i5?tl?,?「l?r'PPP'i??Q?iiLai??m^niill?irviiiffr/?Ttii.riiia-jiiiMiNiwiirifHi?fflnffir......niimr?1?ii?〇??管数??图2-3粗多糖在DEAE-Cellulose52柱的洗脱??Figure?2-3?Elution?crude?polysaccharides?on?DEAE-cellulose?52?column??2.4.3粗糖中总糖含量的测定??,M??本实验采用苯酚-硫酸法对总糖含量进行测定,测得标准曲线如下图所示:??08
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本文编号:2848904

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