高核苷酸酵母水解物的系统生物学评价及应用

发布时间：2020-10-26 05:27

　　 高核苷酸酵母水解物(High nucleotide yeast hydrolyzate,HNYH)是一种新型营养健康、安全绿色的食品添加剂。研究发现,其富含大量的核酸、核苷酸(AMP、CMP、GMP、UMP、IMP)、寡肽、消化酶、游离氨基酸及丰富的B族维生素及酵母细胞壁多糖多种营养成分。具有多种生物学活性,在脂类、糖类、能量代谢、蛋白质生物合成中起着重要的作用,有抗氧化、增强机体免疫力、维持机体胃肠道平衡等功能。HNYH在医药、保健品、调味品等领域应用广泛,在食品领域有丰富的研究意义和市场价值。本论文研究了其系统生物学评价,包括物性评价,对食品领域的加工适用性及智能感官评价;构建了细胞评价模型,研究其清除自由基能力、抗氧化特性和抗炎能力。探索酵母核苷酸在功能食品领域的作用机制,并以此为基础开发一款提高免疫力的代餐粉,主要内容有:1.参照国标法测定了三种酵母水解物的营养成分,比较分析了酵母水解物中五种核苷酸含量及粉体特性;发现HNYH中核苷酸含量达到13.6%,是Ⅱ型酵母水解物的63倍,安琪FA31酵母肽的17倍,并且HNYH粉体流动性最好。运用电子鼻检测水解物的复杂嗅味和挥发性成分,获取样品的气味指纹图谱,对不同酵母水解物实现了有效区分和判别;运用电子舌对样品进行模式识别和定性定量分析,获取样品的酸、咸、鲜、苦、涩、甜味以及丰富度、尖锐度、苦回味等,得出对样品味觉特征的总体评价,为其产品的开发提供可靠数据支撑;使用电镜观察不同样品的微观结构,并对样品中不同成分进行定性和半定量分析,完成对原料整体全面智能感官评价。2.本试验采用化学法测定了HNYH清除DPPH自由基、羟自由基和总还原能力;建立了游离脂肪酸(Free fatty acid,FFA)诱导的HepG2细胞氧化应激模型,细胞体外培养试验。结果表明,HNYH可以缓解FFA诱导的HepG2细胞氧化应激反应,保护作用与HNYH浓度呈正相关,能显著提高总抗氧化能力和抗氧化酶类活力,显著降低MDA含量。HNYH添加量为1 mg/mL时,ROS水平接近对照组水平,说明其具有显著的抗氧化作用。RT-PCR实验结果显示实验组抗氧化酶基因NQO1、Nrf2和HO-1mRNA表达水平显著增加,keap1mRNA表达水平降低。HepG2细胞核内Nrf2的蛋白含量升高,胞浆中其蛋白含量降低,阐明了HNYH能够激活Nrf2通路减轻FFA诱导的HepG2氧化应激损伤作用。3.用脂多糖(1μg/mL)刺激生长良好的RAW264.7细胞24h建立体外细胞炎症模型。结果表明,HNYH能明显降低LPS诱导的RAW264.7细胞炎症因子NO,TNF-α,IL-1β和IL-6及其相关mRNA的表达,降低iNOS及细胞核内NF-κBp65蛋白水平表达,并呈现浓度依赖关系。证实了HNYH对LPS致RAW264.7细胞炎症的保护作用,作用机制与iNOS蛋白表达和NF-κB通路有关,通过抑制NF-κB活化和核转运,进而保护机体免受炎性损伤。4.配制酵母肽餐包,并用电子鼻、电子舌对餐包的气味和味觉进行理性分析,获取气味指纹图谱和味觉综合评价,采用小鼠巨噬细胞炎症模型对酵母肽餐包进行功能性评价,结果表明,酵母肽餐包能够抑制LPS作用于RAW264.7细胞产生炎症反应。
【学位单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：TS202.3
【部分图文】：

最终滤液保持在 18 mL 左右。向离心管中加入 2 mL 6mol/LHcl 溶液水浴 2 h，冷却后加入 2 mL 6 mol/LNaOH 溶液摇匀，25mL 容量瓶定容，吸品液补蒸馏水至 1 mL，加 1 mL 5%苯酚及 5 mL 浓硫酸摇匀，冷却 20 min，4 值。特性测定验利用 BT-1001 型智能粉体物性测试仪（图 2.1）、Microtrac-S3500 激光粒度.2），测定各原料的粉体物性，包括休止角、崩溃角、差角、平板角、振实密、压缩度、分散度、均齐度、流动性指数、喷流性指数及粉体粒度分布，并评价。

最终滤液保持在 18 mL 左右。向离心管中加入 2 mL 6mol/LHcl 溶液水浴 2 h，冷却后加入 2 mL 6 mol/LNaOH 溶液摇匀，25mL 容量瓶定容，吸品液补蒸馏水至 1 mL，加 1 mL 5%苯酚及 5 mL 浓硫酸摇匀，冷却 20 min，4 值。特性测定验利用 BT-1001 型智能粉体物性测试仪（图 2.1）、Microtrac-S3500 激光粒度.2），测定各原料的粉体物性，包括休止角、崩溃角、差角、平板角、振实密、压缩度、分散度、均齐度、流动性指数、喷流性指数及粉体粒度分布，并评价。

图 2.3 电子鼻设备Figure 2.3 Electronic nose device觉分析日本国 Insent 公司的 TS500z 电子舌系统，包含 6 个化学传感咸、鲜)和 1 个参比电极以及 Alphasoft V11 控制及化学计量学
【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 赵国华,陈宗道;蛋白质水解物苦味研究进展[J];粮食与油脂;2000年01期

2 赵国华,陈宗道,罗爱民;蛋白质水解物苦味研究进展[J];粮油食品科技;1999年03期

3 李玉铭;朱雅娴;康湛莹;;关于泥炭中易、难水解物分析方法的研究[J];江西腐植酸;1987年04期

4 李玉铭;康湛莹;周群;;关于泥炭中易水解物分析的研究[J];哈尔滨科学技术大学学报;1987年02期

5 凌景生;;蛋白质水解物可喂肉鸡[J];饲料研究;1987年05期

6 胡敏;高淑红;;脾水解物及脾康糖浆的制备与讨论[J];现代化农业;1989年11期

7 丁煜;木材水解物用作β-内酰胺抗生素发酵培养基成分[J];国外医药(抗生素分册);1989年04期

8 李建军;黄学民;;米胚芽的水解物[J];粮食与油脂;1989年01期

9 祝永强;魏克民;朱良均;;丝素水解物及不同组方抗醉酒的动物比较研究[J];蚕桑通报;2008年03期

10 奇云;;“山寨蛋白”——非法食品添加物“革皮水解物”[J];家庭医学(下半月);2012年05期

相关博士学位论文 前1条

1 杨剑;豆粕的萌前除草活性及其对土壤微生物的生态效应[D];厦门大学;2008年

相关硕士学位论文 前10条

1 潘聪;高核苷酸酵母水解物的系统生物学评价及应用[D];吉林农业大学;2019年

2 董爱华;啤酒废酵母水解物的生产工艺优化及其在仔猪生产中的应用[D];华南理工大学;2019年

3 徐瑶瑶;黑木耳多糖体外水解物制备工艺的优化及其抗氧化与降血糖活性研究[D];中国计量大学;2018年

4 李丹丹;枸杞多糖的提取及其水解物的研究[D];齐鲁工业大学;2014年

5 王宏伟;脑酶水解物制药工艺的改进[D];东北林业大学;2004年

6 王倩;远志皂苷水解物的药代动力学研究[D];北京协和医学院;2012年

7 高天;鹿骨胶原蛋白的制备及其水解物抗氧化活性的研究[D];东北林业大学;2007年

8 王一坤;胶原水解物改性聚丙烯酸类高吸水树脂的研究[D];郑州大学;2011年

9 王宇晓;抗氧化玉米醇溶蛋白及其活性水解物制备研究[D];山东农业大学;2014年

10 余钰骢;灵芝结构多糖水解物的提取分离纯化和功能活性研究[D];浙江大学;2014年

本文编号：2856563