餐饮食品中耐药性沙门氏菌污染调查及其噬菌体生态控制研究
发布时间：2021-01-15 06:47
沙门氏菌是一类重要的人畜共患致病菌,可以直接或间接污染食品,引起食物中毒,对食品安全造成了极大的危害。近年来大量使用抗生素,导致环境中沙门氏菌产生了耐药和交叉耐药菌株,对该菌感染后的临床治疗提出了极大挑战。本论文研究了餐饮食品中沙门氏菌的污染状况,耐药性以及应用噬菌体对沙门氏菌进行生态控制策略的可行性,为餐饮食品中沙门氏菌的风险评估及科学防控提供实验依据。1.以沙门氏菌invA基因作为检测靶基因,建立了聚合酶链式反应（PCR）检测方法,对采集自扬州市场的餐饮食品及原料样品中沙门氏菌的污染状况进行了调查。PCR检测结果显示,设计的引物及反应体系能够特异性扩增出284 bp大小DNA片段,沙门氏菌模板DNA最低检测限达到4 ng/L。应用PCR法与常规法分别对23份食材样品中沙门氏菌污染情况进行检测,结果常规法检测出其中的14个样品为沙门氏菌阳性,用PCR技术检测出其中的12个样品为沙门氏菌阳性,结果表明扬州市场所售食材中沙门氏菌污染率较高,存在直接或间接感染人群,导致食物中毒的风险,要引起消费者重视。2.对45株沙门氏菌可疑菌株进一步经过细菌生化试验鉴定和血清分型,共获得21株沙门氏菌,...
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－２靶基因的ＰＣＲ扩增结果??
２．２．２样品增菌液模板ＤＮＡ的提取结果??将样品增菌液中细菌提取基因组ＤＮＡ，ＤＮＡ的ＯＤ２６０／ＯＤ２８０在１．８￣２．０范围内，符??合模板ＤＮＡ的纯度要求，将基因组ＤＮＡ提取物进行琼脂糖凝胶电泳，结果如图２－１所示，??结果显示基因组ＤＮＡ条带均一，ＤＮＡ模板提取完整。??４??图２－１模板ＤＮＡ的电泳检测结果??Ｍ：ＤＮＡｍａｒｋｅｒ；?１：标准肠炎沙门氏菌Ｐ２２基因组ＤＮＡ；?２－２４：样品增菌液中细菌基因组ＤＮＡ??提取物??Ｆｉｇ．?２－１?Ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｉｃ?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｅｍｐｌａｔｅ?ＤＮＡ??Ｍ：?ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｒ；?１：?Ｇｅｎｏｍｅ?ＤＮＡ?ｏｆ?ｓｔａｎｄａｒｄ?Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ?ｅｎｔｅｒｉｔｉｄｉｓ＼２－２Ａ：?Ｇｅｎｏｍｅ?ＤＮＡ?ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ?ｏｆ??２３?ｓａｍｐｌｅｓ??２．２．３靶基因的ＰＣＲ扩增结果??以标准肠炎沙门氏菌菌株的基因组ＤＮＡ按所建立的程序进行ＰＣＲ扩增，结果如图２－２??所示。只有沙门氏菌ＤＮＡ扩增产物电泳在预期大小位置（２８４?ｂｐ）出现特异性条带，而对??照酵母ＤＮＡ和大肠杆菌ＤＮＡ都未出现扩增产物，表明了所选引物对沙门氏菌的特异性，??ＰＣＲ技术检测时，基本不会出现其他微生物核ＤＮＡ的干扰而影响检测结果。??图２－２靶基因的ＰＣＲ扩增结果??Ｍ：?ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｒ；?１：酵母ＤＮＡ为模板；２：大肠杆菌ＤＮＡ为模板；３：肠炎沙门氏菌的基因??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]江苏地区沙门氏菌流行现状调查及耐药性分析[J]. 颜卫,赵莎莎,丁丽军,卢劲晔,羊建平,沈晓鹏,余张霞. 江苏农业科学. 2019(02)
[2]食品中沙门氏菌检测方法比较[J]. 程浩. 安徽农业科学. 2018(30)
[3]河南省冰鲜鸡肉与烧鸡中沙门氏菌污染情况调查[J]. 徐丽娜,闫龙刚,朱瑶迪,袁乾乾,李苗云. 安徽农学通报. 2018(20)
[4]沙门氏菌对养猪业的危害及防治措施[J]. 马梓承,古金元,彭涛,王玉超,孟凡亮,刘照虎,王宏宇,胡东方,王方坤,刘思当. 养猪. 2018(03)
[5]1996—2015年间沙门氏菌食物中毒事件特征分析[J]. 李光辉,高雪丽,郭卫芸,王永辉,孙思胜. 食品工业. 2018(05)
[6]食源性大肠杆菌噬菌体的分离及其特性分析[J]. 唐伟,高璐,施锴云,张辉,杨振泉. 食品安全质量检测学报. 2018(04)
[7]淮安市20102016年肉及肉制品中沙门氏菌污染状况及耐药性分析[J]. 侯海燕,刘靓,李兵兵,邢亚东,李军鹰,汪艳玲. 食品安全质量检测学报. 2018(03)
[8]乳制品中常见食源性致病菌检测技术的研究进展[J]. 鄢雷娜,罗跃华,刘绪平,许恒毅. 食品安全质量检测学报. 2017(01)
[9]藏鸡和彭县黄鸡鸡胚、弱雏中沙门氏菌的分离鉴定与耐药性分析[J]. 张莒,蒲琪,赵瑾,李霞辉,徐超,王志刚,舒刚. 四川农业大学学报. 2016(03)
[10]鹅源沙门氏菌对养鹅业的危害和防控措施[J]. 廖天学,谢小凡,敖行美,陈勇,范才良. 畜禽业. 2015(08)
博士论文
[1]饲料中沙门菌快速检测方法的建立及其分离株的耐药性与致病性分析[D]. 张秀芹.吉林大学 2014
硕士论文
[1]产气肠杆菌噬菌体生物学特性与基因组分析[D]. 马艳艳.河南科技学院 2017
[2]基于叶绿体基因组测序对中国野生葡萄进化及系统发育的研究[D]. 谢海坤.中国农业科学院 2017
[3]副溶血弧菌噬菌体的分离鉴定、裂解性能及其在副溶血弧菌快速检测中的初步应用[D]. 彭勇.中国海洋大学 2013
[4]沙门氏菌invH基因亚单位疫苗和C3d分子佐剂核酸疫苗的制备与免疫效果研究[D]. 王小龙.山东农业大学 2011
[5]鸡胚孵化过程中营养成分变化规律的研究与胶囊研制[D]. 任军甫.河南科技大学 2011
本文编号：2978443
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－２靶基因的ＰＣＲ扩增结果??
２．２．２样品增菌液模板ＤＮＡ的提取结果??将样品增菌液中细菌提取基因组ＤＮＡ，ＤＮＡ的ＯＤ２６０／ＯＤ２８０在１．８￣２．０范围内，符??合模板ＤＮＡ的纯度要求，将基因组ＤＮＡ提取物进行琼脂糖凝胶电泳，结果如图２－１所示，??结果显示基因组ＤＮＡ条带均一，ＤＮＡ模板提取完整。??４??图２－１模板ＤＮＡ的电泳检测结果??Ｍ：ＤＮＡｍａｒｋｅｒ；?１：标准肠炎沙门氏菌Ｐ２２基因组ＤＮＡ；?２－２４：样品增菌液中细菌基因组ＤＮＡ??提取物??Ｆｉｇ．?２－１?Ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｉｃ?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｅｍｐｌａｔｅ?ＤＮＡ??Ｍ：?ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｒ；?１：?Ｇｅｎｏｍｅ?ＤＮＡ?ｏｆ?ｓｔａｎｄａｒｄ?Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ?ｅｎｔｅｒｉｔｉｄｉｓ＼２－２Ａ：?Ｇｅｎｏｍｅ?ＤＮＡ?ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ?ｏｆ??２３?ｓａｍｐｌｅｓ??２．２．３靶基因的ＰＣＲ扩增结果??以标准肠炎沙门氏菌菌株的基因组ＤＮＡ按所建立的程序进行ＰＣＲ扩增，结果如图２－２??所示。只有沙门氏菌ＤＮＡ扩增产物电泳在预期大小位置（２８４?ｂｐ）出现特异性条带，而对??照酵母ＤＮＡ和大肠杆菌ＤＮＡ都未出现扩增产物，表明了所选引物对沙门氏菌的特异性，??ＰＣＲ技术检测时，基本不会出现其他微生物核ＤＮＡ的干扰而影响检测结果。??图２－２靶基因的ＰＣＲ扩增结果??Ｍ：?ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｒ；?１：酵母ＤＮＡ为模板；２：大肠杆菌ＤＮＡ为模板；３：肠炎沙门氏菌的基因??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]江苏地区沙门氏菌流行现状调查及耐药性分析[J]. 颜卫,赵莎莎,丁丽军,卢劲晔,羊建平,沈晓鹏,余张霞. 江苏农业科学. 2019(02)
[2]食品中沙门氏菌检测方法比较[J]. 程浩. 安徽农业科学. 2018(30)
[3]河南省冰鲜鸡肉与烧鸡中沙门氏菌污染情况调查[J]. 徐丽娜,闫龙刚,朱瑶迪,袁乾乾,李苗云. 安徽农学通报. 2018(20)
[4]沙门氏菌对养猪业的危害及防治措施[J]. 马梓承,古金元,彭涛,王玉超,孟凡亮,刘照虎,王宏宇,胡东方,王方坤,刘思当. 养猪. 2018(03)
[5]1996—2015年间沙门氏菌食物中毒事件特征分析[J]. 李光辉,高雪丽,郭卫芸,王永辉,孙思胜. 食品工业. 2018(05)
[6]食源性大肠杆菌噬菌体的分离及其特性分析[J]. 唐伟,高璐,施锴云,张辉,杨振泉. 食品安全质量检测学报. 2018(04)
[7]淮安市20102016年肉及肉制品中沙门氏菌污染状况及耐药性分析[J]. 侯海燕,刘靓,李兵兵,邢亚东,李军鹰,汪艳玲. 食品安全质量检测学报. 2018(03)
[8]乳制品中常见食源性致病菌检测技术的研究进展[J]. 鄢雷娜,罗跃华,刘绪平,许恒毅. 食品安全质量检测学报. 2017(01)
[9]藏鸡和彭县黄鸡鸡胚、弱雏中沙门氏菌的分离鉴定与耐药性分析[J]. 张莒,蒲琪,赵瑾,李霞辉,徐超,王志刚,舒刚. 四川农业大学学报. 2016(03)
[10]鹅源沙门氏菌对养鹅业的危害和防控措施[J]. 廖天学,谢小凡,敖行美,陈勇,范才良. 畜禽业. 2015(08)
博士论文
[1]饲料中沙门菌快速检测方法的建立及其分离株的耐药性与致病性分析[D]. 张秀芹.吉林大学 2014
硕士论文
[1]产气肠杆菌噬菌体生物学特性与基因组分析[D]. 马艳艳.河南科技学院 2017
[2]基于叶绿体基因组测序对中国野生葡萄进化及系统发育的研究[D]. 谢海坤.中国农业科学院 2017
[3]副溶血弧菌噬菌体的分离鉴定、裂解性能及其在副溶血弧菌快速检测中的初步应用[D]. 彭勇.中国海洋大学 2013
[4]沙门氏菌invH基因亚单位疫苗和C3d分子佐剂核酸疫苗的制备与免疫效果研究[D]. 王小龙.山东农业大学 2011
[5]鸡胚孵化过程中营养成分变化规律的研究与胶囊研制[D]. 任军甫.河南科技大学 2011
本文编号：2978443
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