米蛋白肽-钙螯合物的制备及其性质研究

发布时间：2021-03-03 12:25

　　钙是人体必需的矿物质营养素,膳食中钙摄入或吸收不足会导致许多疾病。金属螯合肽对改善矿物元素缺乏存在潜在应用价值,近年来越来越多具有提高和促进矿物元素生物利用率的金属螯合肽被发现和鉴定。食物源螯合肽由于其具有营养、安全等特性,因此已经被被用于钙强化相关的功能食品和保健品的开发。本实验以碎米为原料制备米蛋白,采用碱性蛋白酶制备具有钙螯合能力的米蛋白肽,通过体积排阻色谱和反向高效液相色谱对螯合物进行分离纯化,并用质谱对其测序,最后通过细胞实验验证了螯合物的钙生物利用率。具体研究结果如下:（1）采用超声辅助提取米蛋白,以最适蛋白酶制备米蛋白肽,并通过超滤获得钙结合能力较高的肽段。结果表明:超声波辅助提取米蛋白的最佳工艺条件为:料液比1:12,超声时间40 min,提取温度60℃,pH 9.5。在此条件下,米蛋白的提取率为67.01%;分别选用碱性蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶酶解米蛋白,以金属螯合力和水解度为指标筛选最适蛋白酶,结果显示碱性蛋白酶的金属螯合力及水解度均最高,分别为67%、16.89%;米蛋白酶解最佳工艺为:温度63.7℃、底物质量分数4.4%、酶添加量6.8%、pH... 

【文章来源】：黑龙江八一农垦大学黑龙江省

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

技术路线图

酶由于作用点的不同，水解后的肽段也具有不同的生物活性的生物活性肽具有重要的作用，酶的作用点不同会含有大量的具有生物活性的氨基酸序列，本实验选用 4 水解度、金属螯合力为指标，筛选出最适蛋白酶。白酶对米蛋白酶解物的水解度的影响，四种酶对米蛋白的水解效果存在较大的差异，但水解度符合酶的典型反应过程曲线。在酶解的前 30 min，水解初期水解速度较快造成的，在反应 30~60 min，碱性蛋白，其他三种酶相对较弱；反应时间为 60~90 min时，除碱度皆趋于平缓，碱性蛋白酶直到水解时间为 180 min时才酶具有较高的酶活力，对米蛋白的水解作用强。这是因键有较强的专一性[85]。

米蛋白肽-钙螯合物的制备及其性质研究酶解时间的增长，暴露出来的肽段也越多，促进了螯合反降趋势，是因为一些多肽被继续降解为游离氨基酸而造成解物的金属螯合力均不相同，碱性蛋白酶的酶解液的螯合酶的切位点不同，造成水解后多肽的的氨基酸组成和排列响了肽的功能特性。

【参考文献】：
期刊论文
[1]不同分子质量的大豆肽螯合钙工艺优化[J]. 刘静波,刘畅,赵颂宁,张婷.  中国食品学报. 2018(06)
[2]绿豆中ACE抑制肽的分离纯化及抗氧化研究[J]. 邹基豪,刘振春,李侠.  食品工业. 2018(01)
[3]微波辅助酶法制备的玉米抗氧化肽的抗氧化活性分析[J]. 关海宁,刁小琴,赵凤影,于新月,张波,张菊灵,张子艳.  山西农业科学. 2017(08)
[4]黄鲫蛋白水解液美拉德反应物的抑菌性及抗氧化性研究[J]. 杨珮瑜,刘冬梅,阮关强,韦荣编,宋茹,罗红宇.  中国食品学报. 2016(04)
[5]水解酪蛋白肽粉复方对高血压大鼠的降血压作用及机制研究[J]. 全向阳,刘芸,甘海宁.  保健医学研究与实践. 2016(02)
[6]金属螯合肽分离纯化及其抗氧化活性的研究进展[J]. 李雪芬,杜斌,丁轲,韩涛.  中国食物与营养. 2016(03)
[7]玉米醇溶蛋白肽钙螯合物的制备及其抑菌性能研究[J]. 蒲传奋,唐文婷.  食品科技. 2015(12)
[8]畜禽骨蛋白水解及多肽螯合钙研究进展[J]. 周小翠,靳国锋,金永国,马美湖,蔡朝霞.  肉类研究. 2015(08)
[9]乳清蛋白肽-钙螯合物的制备及性质研究[J]. 赵立娜,汪少芸,郭淋凯,黄顺丽,黄一帆.  中国食品学报. 2015(07)
[10]响应面法优化物理辅助碱法提取米糠蛋白工艺[J]. 许凤,王长远.  食品科学. 2014(20)

博士论文
[1]麦胚蛋白聚集行为及其钙离子螯合肽的制备与评价[D]. 刘凤茹.江南大学 2014

硕士论文
[1]黑木耳肽钙螯合物对模拟微重力诱导骨流失防护作用研究[D]. 曲航.哈尔滨工业大学 2016
[2]米渣蛋白的分离提取、改性及功能特性研究[D]. 曾国强.武汉轻工大学 2016
[3]脱酰胺—酶解法制备米蛋白肽及其亚铁螯合物的研究[D]. 廉雯蕾.江南大学 2015
[4]普通野生稻种子贮藏蛋白质多态性研究[D]. 卢夏茹.海南大学 2015
[5]水解米渣蛋白及制备氨基酸螯合钙的工艺研究[D]. 郭艳.四川大学 2006



本文编号：3061260