富硒酵母的诱变筛选及其富硒条件的分析
发布时间：2021-03-19 18:36
富硒酵母是一种应用广泛的食品添加剂,是一种重要的人体有机硒补充剂,它来源于外源无机硒在生长过程中转化有机硒的酵母菌体,筛选出高水平将无机硒转化为有机硒的酵母菌株对富硒酵母的生产和应用具有重要意义。硒蛋白是富硒酵母中有机硒存在的一种主要形式,其含量不仅是衡量富硒酵母质量的重要指标,并且反映了酵母可以将无机硒转化为有机硒的能力。研究表明,硒代磷酸是硒蛋白合成的活性硒供体,由硒磷酸合酶（SPS）催化生成,该酶是硒蛋白合成的限速酶。鉴于SPS活性对H2O2的不耐受性,本论文将以H2O2为选择压力进行富硒酵母菌株的诱变筛选,并对诱变菌株的富硒培养条件进行分析。取得的主要研究结果如下:（1）以酿酒酵母为起始菌株,叠氮化钠为诱变剂,H2O2为选择压力,经诱变、初筛、复筛,获得两株富硒水平高的菌株HXS-01和HXS-02。菌株HXS-01和HXS-02,经过48 h摇瓶富硒培养后,它们的总硒和产率分别比出发菌株高3.4?3.7倍和2.9?3.2倍,有机硒含量及产率分别比...
【文章来源】：合肥工业大学安徽省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
硒元素的还原和甲基化反应Figure1.1Reductionandmethylationofselenium
合肥工业大学学术硕士研究生学位论文20图3.4平板培养基上的菌株筛选结果Fig3.4Resultofstraingrowthonplatemediumafterscreening图3.5筛选的菌株对不同H2O2浓度的耐受（A）及对H2O2致死浓度耐受的稳定性（B）Fig3.5ToleranceoftheobtainedstratinstodifferentH2O2concentrations(A)andtheirtolerancestabilitytolethalH2O2concentration3.2菌种的特性3.2.1菌株性质为了鉴定筛选出的菌株是否具有高富硒能力，将出发菌株和HXS-01、HXS-02菌株分别进行摇瓶富硒培养，48h后收集菌体，测定菌体的生物量、总硒及有机硒含量与产率。由表3.1可见，与出发菌株相比，菌株HXS-01和HXS-02在含亚BAB0123450.00.71.42.12.8HXS-01HXS-02OD(560nm)H2O2浓度(%)OD(560nm)传代次数S1S2S3S4S5S60.00.51.01.52.02.53.03.5HXS-01-H2O2HXS-01+H2O2HXS-02-H2O2HXS-02+H2O2
合肥工业大学学术硕士研究生学位论文24菌株在6～24h快速生长，24h时达到稳定；菌体总硒含量和产率随着生长的增加而快速增加，至24h达到最高，期间有机硒占总硒的百分比从12h的89%上升到97%，相应的菌体有机硒含量及产率也在24h达到最高；24h后，菌体干重、总硒及有机硒含量与干重均呈下降趋势。因此，HXS-02菌株最佳的富硒培养时间可以确定为24h.图3.9HXS-02菌株的动态Fig3.9DynamicofHXS-02strain3.3.2硒添加时间对诱变菌株生长和富硒的影响确定HXS-02菌株生物量和有机硒产率的最佳培养时间后，HXS-02菌株进行固体斜面活化24h后，挑取一环，至50mL/250mL麦芽汁液体培养基的摇瓶中，振荡培养24h，在28℃、180r/min条件下，作为活化的菌种。摇瓶培养时，以10%ABCDEF
【参考文献】：
期刊论文
[1]杂种优势的形成机制及其在动物遗传育种中的应用[J]. 张丹阳,张一鸣,李丽娟,宋德荣,贺花,刘燕蓉,杨鹏,师书玥,雷初朝,陈宏,黄永震. 基因组学与应用生物学. 2020(01)
[2]硒，人类不可或缺的元素[J]. 邵黎雄,陆建梅,姜雪峰. 自然杂志. 2019(06)
[3]发酵环境变化对酵母生长和成品啤酒的影响[J]. 崔云前,吴梓萌,苏文超,张海梦. 中国酿造. 2019(11)
[4]酿酒酵母发酵降解灵芝胞外多糖组分分析及活性研究[J]. 刘艳芳,高坤,冯杰,颜梦秋,张雪梦,唐庆九,周帅,杨焱,冯娜,王金艳,张劲松. 菌物学报. 2020(02)
[5]硒对自身免疫性甲状腺病患者TPOAb水平的影响[J]. 张秀彬,闫吉,李丹丹,吕男男,辛月颖,旷劲松. 中国现代药物应用. 2019(20)
[6]叶面喷硒对茶树叶片硒及矿质元素含量的影响[J]. 秦玉燕,王运儒,时鹏涛,甘志勇,杜国冬,蓝唯,李乾坤,吴凤. 南方农业学报. 2019(03)
[7]微生物富硒菌肥在叶用莴苣生产上的应用[J]. 王浩然,张旸一,刘超杰,韩莹琰,范双喜. 北京农学院学报. 2019(02)
[8]硒营养与老龄健康[J]. 张茹,许月凤,李永华,李海蓉. 中国老年学杂志. 2019(05)
[9]紫外诱变选育高产酒精及酸的酿酒酵母[J]. 王犁烨,陈新军,卢丕超,刘维兵,高飞,马珊,张颖,武运. 中国酿造. 2019(01)
[10]酵母富硒培养条件研究进展[J]. 周洋枝,苏蒙蒙,路栋,时杰,高玉荣. 农产品加工. 2019(01)
博士论文
[1]新型酿酒酵母表面展示系统的构建及鸡球虫EtMic2活载体疫苗的免疫保护性研究[D]. 孙慧.山东农业大学 2014
[2]含硒蛋白质（多肽）的制备及其抗氧化效应研究[D]. 王程.吉林大学 2014
[3]富硒益生菌在奶牛生产上的应用效果及其作用机理研究[D]. 吴显实.南京农业大学 2009
[4]益生菌制剂的研制及其对雏鸡免疫学影响和机理的研究[D]. 马春全.中国农业大学 2004
[5]富铁酵母工程菌的构建及细胞中铁的生物转化、分布和结合状态的研究[D]. 袁玉兰.四川大学 2004
硕士论文
[1]低pH环境下酿酒酵母的生理差异性研究[D]. 尚磊.西北农林科技大学 2018
[2]高富硒酵母的筛选与富硒过程强化研究[D]. 娄兴丹.石河子大学 2018
[3]富硒酵母高值化利用的研究[D]. 王瑞.北京化工大学 2018
[4]食用菌液体发酵合成有机硒的研究[D]. 杜凯.山东大学 2018
[5]血清硒水平和尿碘水平对甲状腺癌患病的影响研究[D]. 马欣.新疆医科大学 2018
[6]硒、锌对老年性痴呆模型的保护作用研究[D]. 徐翠.延边大学 2016
[7]优良酿酒酵母菌株的筛选与培育[D]. 张仟伟.河南工业大学 2016
[8]基于弱酸胁迫的富硒产朊假丝酵母制备及其在雏鸡饲养中的应用[D]. 王冬华.苏州大学 2016
[9]富硒酵母中硒蛋白制备及性质研究[D]. 王菲.大连工业大学 2014
[10]硒酵母高产菌株的筛选及发酵条件的研究[D]. 李媛媛.山西大学 2013
本文编号：3090030
【文章来源】：合肥工业大学安徽省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
硒元素的还原和甲基化反应Figure1.1Reductionandmethylationofselenium
合肥工业大学学术硕士研究生学位论文20图3.4平板培养基上的菌株筛选结果Fig3.4Resultofstraingrowthonplatemediumafterscreening图3.5筛选的菌株对不同H2O2浓度的耐受（A）及对H2O2致死浓度耐受的稳定性（B）Fig3.5ToleranceoftheobtainedstratinstodifferentH2O2concentrations(A)andtheirtolerancestabilitytolethalH2O2concentration3.2菌种的特性3.2.1菌株性质为了鉴定筛选出的菌株是否具有高富硒能力，将出发菌株和HXS-01、HXS-02菌株分别进行摇瓶富硒培养，48h后收集菌体，测定菌体的生物量、总硒及有机硒含量与产率。由表3.1可见，与出发菌株相比，菌株HXS-01和HXS-02在含亚BAB0123450.00.71.42.12.8HXS-01HXS-02OD(560nm)H2O2浓度(%)OD(560nm)传代次数S1S2S3S4S5S60.00.51.01.52.02.53.03.5HXS-01-H2O2HXS-01+H2O2HXS-02-H2O2HXS-02+H2O2
合肥工业大学学术硕士研究生学位论文24菌株在6～24h快速生长，24h时达到稳定；菌体总硒含量和产率随着生长的增加而快速增加，至24h达到最高，期间有机硒占总硒的百分比从12h的89%上升到97%，相应的菌体有机硒含量及产率也在24h达到最高；24h后，菌体干重、总硒及有机硒含量与干重均呈下降趋势。因此，HXS-02菌株最佳的富硒培养时间可以确定为24h.图3.9HXS-02菌株的动态Fig3.9DynamicofHXS-02strain3.3.2硒添加时间对诱变菌株生长和富硒的影响确定HXS-02菌株生物量和有机硒产率的最佳培养时间后，HXS-02菌株进行固体斜面活化24h后，挑取一环，至50mL/250mL麦芽汁液体培养基的摇瓶中，振荡培养24h，在28℃、180r/min条件下，作为活化的菌种。摇瓶培养时，以10%ABCDEF
【参考文献】：
期刊论文
[1]杂种优势的形成机制及其在动物遗传育种中的应用[J]. 张丹阳,张一鸣,李丽娟,宋德荣,贺花,刘燕蓉,杨鹏,师书玥,雷初朝,陈宏,黄永震. 基因组学与应用生物学. 2020(01)
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[4]酿酒酵母发酵降解灵芝胞外多糖组分分析及活性研究[J]. 刘艳芳,高坤,冯杰,颜梦秋,张雪梦,唐庆九,周帅,杨焱,冯娜,王金艳,张劲松. 菌物学报. 2020(02)
[5]硒对自身免疫性甲状腺病患者TPOAb水平的影响[J]. 张秀彬,闫吉,李丹丹,吕男男,辛月颖,旷劲松. 中国现代药物应用. 2019(20)
[6]叶面喷硒对茶树叶片硒及矿质元素含量的影响[J]. 秦玉燕,王运儒,时鹏涛,甘志勇,杜国冬,蓝唯,李乾坤,吴凤. 南方农业学报. 2019(03)
[7]微生物富硒菌肥在叶用莴苣生产上的应用[J]. 王浩然,张旸一,刘超杰,韩莹琰,范双喜. 北京农学院学报. 2019(02)
[8]硒营养与老龄健康[J]. 张茹,许月凤,李永华,李海蓉. 中国老年学杂志. 2019(05)
[9]紫外诱变选育高产酒精及酸的酿酒酵母[J]. 王犁烨,陈新军,卢丕超,刘维兵,高飞,马珊,张颖,武运. 中国酿造. 2019(01)
[10]酵母富硒培养条件研究进展[J]. 周洋枝,苏蒙蒙,路栋,时杰,高玉荣. 农产品加工. 2019(01)
博士论文
[1]新型酿酒酵母表面展示系统的构建及鸡球虫EtMic2活载体疫苗的免疫保护性研究[D]. 孙慧.山东农业大学 2014
[2]含硒蛋白质（多肽）的制备及其抗氧化效应研究[D]. 王程.吉林大学 2014
[3]富硒益生菌在奶牛生产上的应用效果及其作用机理研究[D]. 吴显实.南京农业大学 2009
[4]益生菌制剂的研制及其对雏鸡免疫学影响和机理的研究[D]. 马春全.中国农业大学 2004
[5]富铁酵母工程菌的构建及细胞中铁的生物转化、分布和结合状态的研究[D]. 袁玉兰.四川大学 2004
硕士论文
[1]低pH环境下酿酒酵母的生理差异性研究[D]. 尚磊.西北农林科技大学 2018
[2]高富硒酵母的筛选与富硒过程强化研究[D]. 娄兴丹.石河子大学 2018
[3]富硒酵母高值化利用的研究[D]. 王瑞.北京化工大学 2018
[4]食用菌液体发酵合成有机硒的研究[D]. 杜凯.山东大学 2018
[5]血清硒水平和尿碘水平对甲状腺癌患病的影响研究[D]. 马欣.新疆医科大学 2018
[6]硒、锌对老年性痴呆模型的保护作用研究[D]. 徐翠.延边大学 2016
[7]优良酿酒酵母菌株的筛选与培育[D]. 张仟伟.河南工业大学 2016
[8]基于弱酸胁迫的富硒产朊假丝酵母制备及其在雏鸡饲养中的应用[D]. 王冬华.苏州大学 2016
[9]富硒酵母中硒蛋白制备及性质研究[D]. 王菲.大连工业大学 2014
[10]硒酵母高产菌株的筛选及发酵条件的研究[D]. 李媛媛.山西大学 2013
本文编号：3090030
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