硫酸化修饰对凉粉草多糖免疫活性的影响及机制研究
发布时间：2021-04-01 01:41
凉粉草多糖（MP）作为凉粉草的主要活性物质之一,是一种具有抗糖尿病,抗氧化和抗癌作用等多种生物活性的药食两用资源。由于多糖结构差异可能限制其生物活性,因此通过化学修饰引入特定的化学基团,在一定程度上可以特异性的影响多糖的生物活性。本文从凉粉草中提取并精制凉粉草多糖,用氯磺酸吡啶（CAP）法对MP进行硫酸化修饰获得一种硫酸化衍生物,命名为SMP。通过测定多糖的糖含量、糖醛酸含量、蛋白质含量、单糖组成、分子量、取代度、表面形态等对其主要理化性质进行分析。通过建立体外清除自由基模型和H2O2诱导RAW264.7细胞氧化损伤模型,评价MP和SMP体外抗氧化活性。同时,探究了 MP和SMP对体外脾淋巴细胞和RAW264.7细胞的免疫调节作用。此外,建立了环磷酰胺（Cy）诱导的小鼠免疫抑制模型,探究MP和SMP对免疫抑制小鼠的免疫功能的增强作用。主要结果如下:1.硫酸化修饰改变了 MP的糖含量,单糖组成,分子量和表观结构。红外光谱结果显示硫酸基团被成功的结合到MP的结构中,且SMP的取代度为0.52。MP是一种含有39.01±0.25%的中性糖,29.30±1.68%的糖醛酸和27.52±0.61...
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．１技术路线示意图??Ｆｉｇ．?１．１?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ?ｒｏｕｔｅｓ??
?第２章凉粉草多糖的硫酸化修饰及理化特性分析???是多糖的特征吸收峰。１６１０?ｃｍ－１处的吸收峰是由于Ｃ＝＝０的不对称伸缩振动产生??的［６７］。除了上述特征吸收峰外，硫酸化凉粉草多糖的红外光谱中出现了硫酸酯基??团特征吸收峰，例如１２６０?ｃｍ－１和８１４?ｃｎｒ１处的吸收峰分别被认为是由Ｓ－０不对??称伸缩振动和Ｃ－０－Ｓ对称伸缩振动产生的［６８］。??１８０－１??１５０－?ｓｍｐ?＾?Ｊ??１?９〇－－?Ｖ１?Ｊ１１??￡?－Ｃ??３０－?｜??３５００?３０００?２５００?２０００?１５００?１０００?５００??Ｗａｖｅｎｕｍｂｅｒｓ?（ｃｍ＂＇）??图２．６?ＭＰ和ＳＭＰ的红外光谱图??Ｆｉｇ．?２．６?Ｔｈｅ?ＦＴ－ＩＲ?ｓｐｅｃｔｒｏｇｒａｍ?ｏｆ?ＭＰ?ａｎｄ?ＳＭＰ??２．５．６表观结构??ＳＥＭ可以提供样品的表面形貌和外观信息，因此通过ＳＥＭ扫描硫酸化修饰??前后凉粉草多糖的特征。图２．７显示了放大５００倍和５０００倍的凉粉草多糖和硫??酸化凉粉草多糖的ＳＥＭ图像。发现凉粉草多糖呈片状并具有光滑的表面??（５０００＞＜），而硫酸化凉粉草多糖的表面具有许多孔状结构。对于５００倍的放大??倍数，发现凉粉草多糖的总体形态在硫酸化后变得更加分散，并且发现了一些卷??曲形式。多糖表面形态的差异表明硫酸化改性改变了凉粉草多糖的表面形态，这??可能增加凉粉草多糖的水溶性以影响其生物活性。??１５??
?第３章硫酸化修饰对凉粉草多糖体外抗氧化活性的影响???１２５－１?［ｇ＾ＭＰ??访?國，??ＣＤ?１＾３?Ｃｏｎｔｒｏｌ??１００－?：：?圖?Ｈ：０：??Ｊ?；：??１?２５￣?１?Ｉ?ｌ．ｌ?１１１１．１１．８??０?Ｈ２〇２?２０?４０?６０?８０?１００??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?（｜ｉｇ／ｍＬ）??图３．４?ＭＰ和ＳＭＰ对于Ｈ２０２诱导的ＲＡＷ２６４．７细胞中ＭＤＡ含量的影响??Ｆｉｇ．３．４?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ＭＰ?ａｎｄ?ＳＭＰ?ｏｎ?ｔｈｅ?ｃｏｎｔｅｎｔ?ｏｆ?ＭＤＡ?ｉｎ?ＲＡＷ２６４．７?ｃｅｌｌｓ?ｉｎｄｕｃｅｄ?ｂｙ?Ｈ：〇２??３．５．５?ＤＰＰＨ自由基清除活性??体外自由基清除活性是天然活性多糖的重要抗氧化能力。ＤＰＰＨ方法是经典??的通过吸光度值的降低程度来评估多糖抗氧化活性的实验方法ｔ８５＃ｌ。如图３．５所??示，凉粉草多糖和硫酸化凉粉草多糖剂量依赖性的清除ＤＰＰＨ自由基。凉粉草多??糖和硫酸化凉粉草多糖浓度为１０００?ｐｇ／ｍＬ清除活性达到最大值，分别为??７５．１１±０．３１?％和８６．９５±０．６１?％。这些结果表明凉粉草多糖和硫酸化凉粉草多糖均??可以有效清除ＤＰＰＨ自由基，硫酸基团的引入增强了凉粉草多糖对ＤＰＰＨ自由??基的清除能力。??１００－１??Ａ－??Ａ???Ａ???—Ａ?Ａ??呈?ｆ?ｒ—一—＊??＾?８０－?ｌ?／??＾?＾????：Ｅ??ｇ?６０－?／／??１?４０－?／?一－??－２〇ｊ／???０?２００?４００?６００?８００?１０００??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?（（ｉｇ／ｍ
【参考文献】：
期刊论文
[1]Renal Protective Activity of Hsian-tsao Extracts in Diabetic Rats[J]. MIN YANG, ZHENG-PING XU, CAI-JU XU, JIA MENG, GANG-QIANG DING, XIAO-MING ZHANG, AND YAN WENG2 Zhejiang University, School of Medicine, Hangzhou 310058, Zhejiang, China; Zhejiang Provincial Center for Disease Control and Prevention, Hangzhou 310009, Zhejiang, China. Biomedical and Environmental Sciences. 2008(03)
[2]淫羊藿多糖的硫酸化修饰及其对IBDV感染细胞的影响[J]. 卢宇,胡元亮,黄小燕,王德云,王君敏,徐玉凤,赵晓娜. 畜牧兽医学报. 2008(02)
[3]香菇多糖的分子结构及其硫酸化改性的研究[J]. 颜邦干,李卫旗,吴学谦. 中国食品学报. 2006(05)
[4]多糖的化学修饰研究进展[J]. 刘占峰,孙汉文. 河北大学学报(自然科学版). 2005(01)
[5]川牛膝多糖硫酸酯的体外抗单纯疱疹病毒2型活性[J]. 刘颖华,何开泽,杨敏,蒲蔷,张军峰. 应用与环境生物学报. 2004(01)
硕士论文
[1]硫酸化修饰对青钱柳多糖抗氧化和抗炎活性的影响[D]. 王之珺.南昌大学 2017
本文编号：3112451
【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．１技术路线示意图??Ｆｉｇ．?１．１?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ?ｒｏｕｔｅｓ??
?第２章凉粉草多糖的硫酸化修饰及理化特性分析???是多糖的特征吸收峰。１６１０?ｃｍ－１处的吸收峰是由于Ｃ＝＝０的不对称伸缩振动产生??的［６７］。除了上述特征吸收峰外，硫酸化凉粉草多糖的红外光谱中出现了硫酸酯基??团特征吸收峰，例如１２６０?ｃｍ－１和８１４?ｃｎｒ１处的吸收峰分别被认为是由Ｓ－０不对??称伸缩振动和Ｃ－０－Ｓ对称伸缩振动产生的［６８］。??１８０－１??１５０－?ｓｍｐ?＾?Ｊ??１?９〇－－?Ｖ１?Ｊ１１??￡?－Ｃ??３０－?｜??３５００?３０００?２５００?２０００?１５００?１０００?５００??Ｗａｖｅｎｕｍｂｅｒｓ?（ｃｍ＂＇）??图２．６?ＭＰ和ＳＭＰ的红外光谱图??Ｆｉｇ．?２．６?Ｔｈｅ?ＦＴ－ＩＲ?ｓｐｅｃｔｒｏｇｒａｍ?ｏｆ?ＭＰ?ａｎｄ?ＳＭＰ??２．５．６表观结构??ＳＥＭ可以提供样品的表面形貌和外观信息，因此通过ＳＥＭ扫描硫酸化修饰??前后凉粉草多糖的特征。图２．７显示了放大５００倍和５０００倍的凉粉草多糖和硫??酸化凉粉草多糖的ＳＥＭ图像。发现凉粉草多糖呈片状并具有光滑的表面??（５０００＞＜），而硫酸化凉粉草多糖的表面具有许多孔状结构。对于５００倍的放大??倍数，发现凉粉草多糖的总体形态在硫酸化后变得更加分散，并且发现了一些卷??曲形式。多糖表面形态的差异表明硫酸化改性改变了凉粉草多糖的表面形态，这??可能增加凉粉草多糖的水溶性以影响其生物活性。??１５??
?第３章硫酸化修饰对凉粉草多糖体外抗氧化活性的影响???１２５－１?［ｇ＾ＭＰ??访?國，??ＣＤ?１＾３?Ｃｏｎｔｒｏｌ??１００－?：：?圖?Ｈ：０：??Ｊ?；：??１?２５￣?１?Ｉ?ｌ．ｌ?１１１１．１１．８??０?Ｈ２〇２?２０?４０?６０?８０?１００??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?（｜ｉｇ／ｍＬ）??图３．４?ＭＰ和ＳＭＰ对于Ｈ２０２诱导的ＲＡＷ２６４．７细胞中ＭＤＡ含量的影响??Ｆｉｇ．３．４?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ＭＰ?ａｎｄ?ＳＭＰ?ｏｎ?ｔｈｅ?ｃｏｎｔｅｎｔ?ｏｆ?ＭＤＡ?ｉｎ?ＲＡＷ２６４．７?ｃｅｌｌｓ?ｉｎｄｕｃｅｄ?ｂｙ?Ｈ：〇２??３．５．５?ＤＰＰＨ自由基清除活性??体外自由基清除活性是天然活性多糖的重要抗氧化能力。ＤＰＰＨ方法是经典??的通过吸光度值的降低程度来评估多糖抗氧化活性的实验方法ｔ８５＃ｌ。如图３．５所??示，凉粉草多糖和硫酸化凉粉草多糖剂量依赖性的清除ＤＰＰＨ自由基。凉粉草多??糖和硫酸化凉粉草多糖浓度为１０００?ｐｇ／ｍＬ清除活性达到最大值，分别为??７５．１１±０．３１?％和８６．９５±０．６１?％。这些结果表明凉粉草多糖和硫酸化凉粉草多糖均??可以有效清除ＤＰＰＨ自由基，硫酸基团的引入增强了凉粉草多糖对ＤＰＰＨ自由??基的清除能力。??１００－１??Ａ－??Ａ???Ａ???—Ａ?Ａ??呈?ｆ?ｒ—一—＊??＾?８０－?ｌ?／??＾?＾????：Ｅ??ｇ?６０－?／／??１?４０－?／?一－??－２〇ｊ／???０?２００?４００?６００?８００?１０００??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?（（ｉｇ／ｍ
【参考文献】：
期刊论文
[1]Renal Protective Activity of Hsian-tsao Extracts in Diabetic Rats[J]. MIN YANG, ZHENG-PING XU, CAI-JU XU, JIA MENG, GANG-QIANG DING, XIAO-MING ZHANG, AND YAN WENG2 Zhejiang University, School of Medicine, Hangzhou 310058, Zhejiang, China; Zhejiang Provincial Center for Disease Control and Prevention, Hangzhou 310009, Zhejiang, China. Biomedical and Environmental Sciences. 2008(03)
[2]淫羊藿多糖的硫酸化修饰及其对IBDV感染细胞的影响[J]. 卢宇,胡元亮,黄小燕,王德云,王君敏,徐玉凤,赵晓娜. 畜牧兽医学报. 2008(02)
[3]香菇多糖的分子结构及其硫酸化改性的研究[J]. 颜邦干,李卫旗,吴学谦. 中国食品学报. 2006(05)
[4]多糖的化学修饰研究进展[J]. 刘占峰,孙汉文. 河北大学学报(自然科学版). 2005(01)
[5]川牛膝多糖硫酸酯的体外抗单纯疱疹病毒2型活性[J]. 刘颖华,何开泽,杨敏,蒲蔷,张军峰. 应用与环境生物学报. 2004(01)
硕士论文
[1]硫酸化修饰对青钱柳多糖抗氧化和抗炎活性的影响[D]. 王之珺.南昌大学 2017
本文编号：3112451
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