舌状蜈蚣藻抗氧化肽的制备、纯化及结构鉴定

发布时间：2021-05-23 22:54

　　近年来,随着养殖技术不断进步和养殖规模逐渐扩大,蜈蚣藻的加工利用也逐渐引起人们的关注。目前关于蜈蚣藻源活性物质的研究集中于萜类、多糖类物质的提取和活性研究,而对于蜈蚣藻蛋白质和多肽的研究少之甚少。因此,为促进蜈蚣藻的开发利用,本文以舌状蜈蚣藻（Grateloupia livida）为原料,研究了蛋白质的提取工艺,并测定了其性质;研究了蛋白质酶解产物的抗氧化活性,并探究了脱色对酶解产物抗氧化活性的影响;对舌状蜈蚣藻抗氧化肽进行了纯化和鉴定,并通过数据库和在线工具对其进行生物信息学分析。主要研究内容及结果如下:第一部分:舌状蜈蚣藻蛋白质的提取及其性质研究以舌状蜈蚣藻为原料,以蛋白质提取率为指标,探究不同破壁技术对舌状蜈蚣藻蛋白质的提取效果,发现溶胀法、反复冻融法、珠磨法的最高蛋白质提取率分别为（29.66±0.86）%、（24.52±0.04）%、（26.52±0.79）%,均低于超声波辅助水提法。经过单因素试验和正交实验,确定超声波辅助水提法提取舌状蜈蚣藻蛋白质的最佳工艺条件为:液料比160 m L·g^-1,超声全程时间60 min,超声功率1440 W,p H6.... 

【文章来源】：上海海洋大学上海市

【文章页数】：98 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 引言
    1.1 蜈蚣藻简介
    1.2 功能肽的制备
        1.2.1 酶法制备
        1.2.2 酶解后处理
    1.3 功能肽的分离纯化
        1.3.1 超滤分级分离
        1.3.2 色谱法纯化
    1.4 功能肽的结构鉴定
    1.5 生物信息学在功能肽研究中的应用
        1.5.1 模拟酶切蛋白质
        1.5.2 功能肽的性质预测
        1.5.3 结构特征和构效关系的预测与分析
    1.6 抗氧化肽
        1.6.1 抗氧化肽的构效关系
        1.6.2 抗氧化活性检测原理及评价方法
    1.7 立题依据及研究内容
        1.7.1 立题依据
        1.7.2 研究内容
第二章 舌状蜈蚣藻蛋白质的提取及其抗氧化活性
    2.1 引言
    2.2 材料与方法
        2.2.1 材料与试剂
        2.2.2 实验仪器
        2.2.3 实验方法
    2.3 结果与分析
        2.3.1 不同破壁技术提取舌状蜈蚣藻蛋白质效果的比较
        2.3.2 超声波辅助水提法单因素试验
        2.3.3 正交试验分析
        2.3.4 硫酸铵盐析对蛋白质回收率的影响
        2.3.5 蛋白质的SDS-PAGE分析
        2.3.6 抗氧化活性测定
    2.4 小结
第三章 舌状蜈蚣藻蛋白质酶解产物的制备及其抗氧化活性
    3.1 引言
    3.2 材料与方法
        3.2.1 实验材料
        3.2.2 实验试剂
        3.2.3 实验仪器
    3.3 实验方法
        3.3.1 舌状蜈蚣藻蛋白质的制备
        3.3.2 舌状蜈蚣藻蛋白质的酶解工艺流程
        3.3.3 酶解产物水解度的测定
        3.3.4 酶解产物抗氧化活性的测定
        3.3.5 酶解产物的脱色研究
        3.3.6 数据分析
    3.4 结果与分析
        3.4.1 水解度
        3.4.2 舌状蜈蚣藻蛋白质酶解产物的抗氧化活性评价
        3.4.3 脱色效果分析
    3.5 小结
第四章 舌状蜈蚣藻抗氧化肽的分离纯化及结构解析
    4.1 引言
    4.2 实验材料、试剂与仪器
        4.2.1 实验材料
        4.2.2 实验试剂
        4.2.3 实验仪器
    4.3 实验方法
        4.3.1 舌状蜈蚣藻蛋白质水解物的制备
        4.3.2 高效体积排阻色谱
        4.3.3 反相高效液相色谱
        4.3.4 舌状蜈蚣藻蛋白质水解物的结构鉴定
        4.3.5 性质预测
        4.3.6 数据处理
    4.4 结果与分析
        4.4.1 脱盐后酶解产物的分子量分布
        4.4.2 舌状蜈蚣藻蛋白质水解物的分离纯化
        4.4.3 结构鉴定
        4.4.4 理化性质预测
        4.4.5 生物活性预测
        4.4.6 ADMET性质预测
    4.5 小结
第五章 结论与展望
    5.1 结论
    5.2 展望
参考文献
致谢
攻读硕士期间研究成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]舌状蜈蚣藻蛋白质的提取及其抗氧化活性研究[J]. 蔡苗苗,陈胜军,杨贤庆,马海霞,邓建朝,李春生,胡晓,戚勃.  南方水产科学. 2020(02)
[2]凤尾鱼酶解产物脱腥脱色工艺优化[J]. 盛洁,胡凌豪,陈建康,宋益善.  食品工业科技. 2020(07)
[3]功能性肽的分离及富集研究进展[J]. 李欣蔚,廖佳,董秀瑜,周新,杨贺棋,武龙,汪秋宽,周慧.  食品科学. 2020(01)
[4]硒与心血管疾病相关性的研究进展[J]. 聂婷婷,李晖.  中国食物与营养. 2019(09)
[5]香螺肽脱色工艺及其抗氧化活性[J]. 张姗姗,李晓彬,张轩铭,韩利文,刘可春.  食品科学. 2020(06)
[6]菜籽抗氧化肽WDHHAPQLR的环境稳定性研究[J]. 姚轶俊,张晶,鞠兴荣,王立峰.  中国粮油学报. 2019(08)
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博士论文
[1]抗氧化三肽的定量构效关系及抗氧化作用分子机理研究[D]. 陈楠.重庆大学 2018
[2]亲和色谱材料的制备及在糖蛋白/糖肽分离分析中的应用研究[D]. 刘玉洁.大连理工大学 2016
[3]多管藻藻红蛋白与藻胆体的特性研究[D]. 赵明日.中国海洋大学 2015
[4]KDEL受体蛋白通过自噬作用参与神经退行性疾病的潜在功能研究[D]. 汪平平.中国科学技术大学 2011
[5]藻蓝蛋白组合生物合成及蓝藻连接多肽生物进化研究[D]. 关翔宇.中国海洋大学 2008

硕士论文
[1]常用测定抗氧化肽活性方法的比较[D]. 高涵.河北农业大学 2019
[2]两种红藻多肽的抗氧化及降血压活性研究[D]. 邓真真.中国科学院大学(中国科学院海洋研究所) 2019
[3]鱿鱼足抗氧化与ACE抑制肽的活性研究及在线筛选[D]. 于丁一.浙江海洋大学 2019
[4]四种黑茶蛋白的降血糖活性及其机理的研究[D]. 苏可盈.华南理工大学 2019
[5]海带鲜味肽的分离纯化、鉴定及性质研究[D]. 温志鹏.华南理工大学 2019
[6]银杏种仁ACE抑制肽的分离纯化、鉴定及抑制机理的研究[D]. 马菲菲.合肥工业大学 2019
[7]海生红藻多管藻藻胆体棒亚结构域中R-藻红蛋白的研究[D]. 刁海平.烟台大学 2019
[8]沙棘籽粕抗氧化肽制备及其活性研究[D]. 逄治飞.沈阳农业大学 2018
[9]羊乳源抗氧化肽的分离纯化与结构鉴定及应用[D]. 高婷婷.陕西科技大学 2018
[10]紫苏籽抗氧化肽的分离纯化及结构功能研究[D]. 胡磊.福州大学 2017



本文编号：3203110