食品中大肠杆菌O157:H7和空肠弯曲菌快速检测新方法研究
发布时间：2021-11-12 12:05
食品安全问题是一个日益突出的社会问题,它关系到我国千千万万人民群众切身利益,关注食品安全势在必行。食源性致病菌是目前最常见的,有巨大危害性并且影响广泛的食品污染因素。因此,建立便捷、快速和灵敏的食源性致病菌检测方法对预防食品安全问题的发生和保护人类健康具有重要意义。大肠杆菌O157:H7和空肠弯曲菌作为常见的食源性致病菌,本文介绍了以下几种检测大肠杆菌O157:H7和空肠弯曲菌的方法:（1）基于分子扩增原理的死、活菌鉴定方法的建立将叠氮溴化丙锭（PMA）与食源性致病菌细胞孵育,正常情况下PMA不能透过完整的细胞膜,而对于死亡的细胞,其细胞膜上有退化或结构有损坏,所以PMA会选择性地进入死亡细胞的内部与其DNA结合。再将用PMA处理过的食源性致病菌样品暴露在特殊强光下一定时间,PMA会嵌入DNA分子的双链中致使DNA分子的永久修饰。并且这种DNA的共价修饰会抑制聚合酶的活性,进而阻断DNA分子的聚合酶链式反应（PCR）,因此来自非存活或者膜受损细胞的DNA则无法通过PCR进行扩增。经过实验条件的优化,使用终浓度为5μg/mL的PMA与食源性致病菌样品孵育5分钟后在500 W卤素灯下曝光5...
【文章来源】：合肥工业大学安徽省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：139 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
可行性验证（M:DNAmarker;1:空白;2:无PMA处理死细菌;3:PMA处理死细菌;4:无PMA处理活细菌;5:PMA处理活细菌）
图 2.2 PMA 使用浓度的优化（M: DNAmarker; 1: 空白; 2-5: 0.5 μg/mL; 6-9: 3 μg/mL; 10-13: 5μg/mL; 14-17: 8 μg/mL; 18-21: 12 μg/mL）Fig 2.2 Optimization of PMAconcentration (M: DNAmarker; 1: blank; 2-5: 0.5 μg/mL; 6-9: 3μg/mL; 10-13: 5 μg/mL; 14-17: 8 μg/mL; 18-21: 12 μg/mL)图 2.2 为 PMA 使用浓度优化的结果，如图所示，泳道 M 为 DNA marker，泳
图 2.3 PMA 与 E. coli O157:H7 孵育时间的优化（M: DNAmarker; 1: 空白; 2-5: 5 min; 6-9: 10min; 10-13: 20 min; 14-17: 30 min; 18-21: 45 min）Fig 2.3 Optimization of the incubation time PMAand E. coli O157:H7 (M: DNAmarker; 1: blank;2-5: 5 min; 6-9: 10 min; 10-13: 20 min; 14-17: 30 min; 18-21: 45 min)2.4.4 卤素灯曝光时间的优化
【参考文献】：
期刊论文
[1]基于量子点荧光层析试纸条法快速检测三聚氰胺[J]. 赵弟萍,程克文,程琳,潘道东,蒋原. 合肥工业大学学报(自然科学版). 2017(10)
[2]我国食品安全检测主要应用技术的研究及现状[J]. 向正华. 现代食品. 2017(14)
[3]浅谈我国食品安全现状与食品安全风险监测体系[J]. 宋臻鹏,付云. 中国卫生检验杂志. 2017(08)
[4]三方协作 共同保障食品安全[J]. 魏传峰. 中国食品. 2017(07)
[5]基于免疫磁分离的荧光微球免疫层析法检测猪霍乱沙门氏菌[J]. 黄震,夏诗琪,刘道峰,刘成伟,赖卫华. 分析化学. 2017(02)
[6]食品安全检测技术研究现状[J]. 贺慧琳,陆佳靓. 中小企业管理与科技(上旬刊). 2016(11)
[7]金黄色葡萄球菌胶体金免疫层析试纸条开发及性能评估[J]. 吴颖,刘美辰,范鸥,张丹,杨宏伟,郭健. 粮食科技与经济. 2016(05)
[8]2001-2013年中国重大食物中毒事件的分析评价[J]. 杜苏萍,王敬敬,张昭寰,孙晓红,潘迎捷,赵勇. 上海海洋大学学报. 2016(02)
[9]量子点荧光微球免疫层析试纸条定量检测玉米中赭曲霉毒素A[J]. 周耀锋,熊斯诚,江湖,段宏,熊勇华,Andrew Wang. 分析化学. 2015(12)
[10]量子点荧光微球免疫层析试纸条定量检测恶性疟原虫[J]. 段宏,陈雪岚,江湖,沈骏,董胜明,熊勇华,Andrew Wang. 分析化学. 2015(03)
博士论文
[1]基于纳米功能材料的乳品安全和品质快速检测方法与仪器研究[D]. 平建峰.浙江大学 2012
硕士论文
[1]高效液相色谱在中草药质量控制中的应用[D]. 王丽峰.西南大学 2009
本文编号：3490879
【文章来源】：合肥工业大学安徽省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：139 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
可行性验证（M:DNAmarker;1:空白;2:无PMA处理死细菌;3:PMA处理死细菌;4:无PMA处理活细菌;5:PMA处理活细菌）
图 2.2 PMA 使用浓度的优化（M: DNAmarker; 1: 空白; 2-5: 0.5 μg/mL; 6-9: 3 μg/mL; 10-13: 5μg/mL; 14-17: 8 μg/mL; 18-21: 12 μg/mL）Fig 2.2 Optimization of PMAconcentration (M: DNAmarker; 1: blank; 2-5: 0.5 μg/mL; 6-9: 3μg/mL; 10-13: 5 μg/mL; 14-17: 8 μg/mL; 18-21: 12 μg/mL)图 2.2 为 PMA 使用浓度优化的结果，如图所示，泳道 M 为 DNA marker，泳
图 2.3 PMA 与 E. coli O157:H7 孵育时间的优化（M: DNAmarker; 1: 空白; 2-5: 5 min; 6-9: 10min; 10-13: 20 min; 14-17: 30 min; 18-21: 45 min）Fig 2.3 Optimization of the incubation time PMAand E. coli O157:H7 (M: DNAmarker; 1: blank;2-5: 5 min; 6-9: 10 min; 10-13: 20 min; 14-17: 30 min; 18-21: 45 min)2.4.4 卤素灯曝光时间的优化
【参考文献】：
期刊论文
[1]基于量子点荧光层析试纸条法快速检测三聚氰胺[J]. 赵弟萍,程克文,程琳,潘道东,蒋原. 合肥工业大学学报(自然科学版). 2017(10)
[2]我国食品安全检测主要应用技术的研究及现状[J]. 向正华. 现代食品. 2017(14)
[3]浅谈我国食品安全现状与食品安全风险监测体系[J]. 宋臻鹏,付云. 中国卫生检验杂志. 2017(08)
[4]三方协作 共同保障食品安全[J]. 魏传峰. 中国食品. 2017(07)
[5]基于免疫磁分离的荧光微球免疫层析法检测猪霍乱沙门氏菌[J]. 黄震,夏诗琪,刘道峰,刘成伟,赖卫华. 分析化学. 2017(02)
[6]食品安全检测技术研究现状[J]. 贺慧琳,陆佳靓. 中小企业管理与科技(上旬刊). 2016(11)
[7]金黄色葡萄球菌胶体金免疫层析试纸条开发及性能评估[J]. 吴颖,刘美辰,范鸥,张丹,杨宏伟,郭健. 粮食科技与经济. 2016(05)
[8]2001-2013年中国重大食物中毒事件的分析评价[J]. 杜苏萍,王敬敬,张昭寰,孙晓红,潘迎捷,赵勇. 上海海洋大学学报. 2016(02)
[9]量子点荧光微球免疫层析试纸条定量检测玉米中赭曲霉毒素A[J]. 周耀锋,熊斯诚,江湖,段宏,熊勇华,Andrew Wang. 分析化学. 2015(12)
[10]量子点荧光微球免疫层析试纸条定量检测恶性疟原虫[J]. 段宏,陈雪岚,江湖,沈骏,董胜明,熊勇华,Andrew Wang. 分析化学. 2015(03)
博士论文
[1]基于纳米功能材料的乳品安全和品质快速检测方法与仪器研究[D]. 平建峰.浙江大学 2012
硕士论文
[1]高效液相色谱在中草药质量控制中的应用[D]. 王丽峰.西南大学 2009
本文编号：3490879
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