腐霉多糖的分离与鉴定及其在草莓采后保鲜中的作用研究
发布时间：2021-11-13 16:46
多糖是一类高分子碳水化合物,具有广泛的生物活性,近年来逐渐成为食品和医疗行业的研究热点。一些研究发现微生物胞外多糖具有良好的抗氧化活性和成膜性,因而被广泛应用于果蔬保鲜领域。强雄腐霉（Pythium arrhenomanes）是一类腐生性真菌,属腐霉科、腐霉属。目前关于腐霉代谢产物的研究大多集中在二十碳五烯酸的提取,而关于腐霉胞外多糖的研究还未见报道。本研究以强雄腐霉HA-09为研究对象,对其胞外多糖进行分离纯化和一级结构解析,探索其在天然抗氧化剂、微生物源果蔬保鲜制剂等方面的应用价值,为强雄腐霉胞外多糖的进一步开发利用提供理论和技术支持。1.强雄腐霉胞外多糖的提取纯化工艺利用醇沉法从强雄腐霉发酵液中提取得到粗多糖（Crude PEPS）,产量为7.33 g/L。菌丝与多糖的干重比为3.18 g/7.33 g。强雄腐霉粗多糖中总糖含量为83.62%,蛋白质含量为6.89%。对强雄腐霉粗多糖进行分级纯化,共得到三种纯化组分:PEPS-1、PEPS-2和PEPS-3。2.强雄腐霉胞外多糖的结构鉴定一级结构解析结果表明,三种纯化组分均具有较高的纯度,不含蛋白质等杂质;纯化组分均由鼠李糖和葡萄...
【文章来源】：淮阴工学院江苏省
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
葡萄糖标准曲线
淮阴工学院硕士学位论文第13页回归方程为：Y=1.1154X-0.0059（R2=0.995），其中Y为吸光度值，X为葡萄糖浓度（mg/mL）；牛血清蛋白标准曲线见图2-2，回归方程为：Y=0.0138X-0.002（R2=0.996），其中Y为吸光度值，X为牛血清蛋白浓度（μg/mL），经计算强雄腐霉粗多糖中总糖含量为83.62%，蛋白质含量为6.89%，强雄腐霉粗多糖中蛋白质含量较低，可以进行进一步的分级纯化。图2-1葡萄糖标准曲线Figure2-1Standardcurveofglucose图2-2牛血清蛋白标准曲线Figure2-2Standardcurveofbovineserumalbumin2.2.2强雄腐霉胞外多糖的分级纯化DEAE-52纤维素是一种阴离子交换树脂，利用不同极性的洗脱液可将带电荷不同的多糖分级洗脱下来，从而得到带电特性不同的纯化组分[102]。DEAE-52分离多糖的原理如图
袁志香腐霉多糖的分离与鉴定及其在草莓采后保鲜中的作用研究第14页2-3所示，通常利用纯水作为洗脱液时可以将中性多糖洗脱下来，利用盐溶液如NaCl溶液作为洗脱液洗脱时可以将酸性多糖洗脱下来[103]。带电特性不同的纯化多糖在结构组成、生物活性等方面往往存在较大的差异，酸性多糖多含有糖醛酸、氨基酸或硫酸基等酸性基团[65]。图2-3DEAE-52纤维素树脂洗脱示意图Figure2-3SchematicdiagramofDEAE-52celluloseelution图2-4强雄腐霉胞外多糖（PEPS）洗脱曲线Figure2-4ElutioncurveofPythiumarrhenomanesexopolysaccharides(PEPS)强雄腐霉多糖的洗脱曲线如图2-4所示。强雄腐霉粗多糖经纯水和不同浓度的盐溶液（0.1M、0.3M、0.5M的NaCl溶液）洗脱共得到三个组分，分别为水洗组分PEPS-1、0.1MNaCl洗脱组分PEPS-2、0.5MNaCl洗脱组分PEPS-3，可以初步判定PEPS-1为中性多糖，PEPS-2和PEPS-3可能为酸性多糖，其中PEPS-2和PEPS-3易溶于0.5MNaOH溶液。
【参考文献】：
期刊论文
[1]微生物胞外多糖黄原胶的应用与研究进展[J]. 邱嘉辉,何亚文. 激光生物学报. 2019(05)
[2]铁皮石斛多糖提取及抗氧化活性研究[J]. 王丽霞,刘孟宗,王芳,张惠. 中国食品添加剂. 2019(02)
[3]地皮菜多糖的分离纯化及结构组成分析[J]. 张雅雯,李海平,孟丽青,王迎进. 食品研究与开发. 2017(18)
[4]Growth Inhibitory Effects of Garlic Polysaccharide on Human HepG2 Cells[J]. Liyan LI,Tao HUANG. Agricultural Science & Technology. 2017(06)
[5]HPGPC法测定库拉索芦荟多糖的分子量和含量[J]. 杨树娟,姜文圣,钱如贵,申开泽,王艳. 今日药学. 2016(11)
[6]杜香多糖的乙醇分级纯化及其性质研究[J]. 张乔会,黄晶晶,田盼盼,王建中,罗兴武. 食品研究与开发. 2016(19)
[7]绞股蓝内生真菌产胞外多糖发酵条件的优化[J]. 李传民,曹健,张慧茹,兰亚莉. 河南农业科学. 2016(01)
[8]真菌发酵胞外多糖的研究进展[J]. 杨同香,吴孔阳,陈俊亮,唐浩国,康怀彬. 食品科学. 2016(05)
[9]DEAE纤维素纯化玉米须总多糖的工艺优选[J]. 孙晓雪,康杰,王昶,王伟明. 中国实验方剂学杂志. 2014(15)
[10]2,4-二硝基苯肼法测定维C银翘片中维生素C的含量[J]. 孙艳丽. 广东化工. 2013(13)
博士论文
[1]几种植物多酚捕获体内自由基反应机理的理论研究[D]. 逯阳.哈尔滨理工大学 2017
[2]基于牡蛎糖原硫酸酯结构的多糖构效关系研究[D]. 杨静峰.江苏大学 2013
[3]黄伞子实体多糖的分离纯化、结构鉴定及生物活性的研究[D]. 聂永心.山东农业大学 2011
[4]鼠李糖脂强化石油污染土壤植物—微生物联合修复研究[D]. 李琦.西安建筑科技大学 2011
[5]青蛤多糖分离鉴定、硫酸酯化及其生物活性研究[D]. 蒋长兴.南京农业大学 2011
[6]氨基葡萄糖/壳寡糖稀土配合物的合成、表征及抗氧化性能研究[D]. 任群翔.东北大学 2009
硕士论文
[1]植物及水体重金属含量拉曼光谱检测方法研究[D]. 江丽霞.华东交通大学 2015
[2]蓝芪复方中多糖的纯化及分子量测定[D]. 罗小燕.广东药学院 2015
[3]三株大型真菌的发酵条件优化及其胞外多糖的结构与功能研究[D]. 刘帅.河南师范大学 2014
[4]马铃薯L-半乳糖-1，4-内酯脱氢酶基因在番茄中的功能分析[D]. 赵云霞.山东农业大学 2010
[5]莲花蜂花粉多糖的提取、分离及生物活性的研究[D]. 刘洁.福建农林大学 2009
[6]牡蛎多糖的分离纯化及生物学活性研究[D]. 李志.福建农林大学 2009
[7]中药北沙参多糖与单糖组成和含量测定方法研究[D]. 任浩娜.沈阳药科大学 2008
[8]火棘多糖的初步研究[D]. 杨锋.陕西师范大学 2004
本文编号：3493360
【文章来源】：淮阴工学院江苏省
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
葡萄糖标准曲线
淮阴工学院硕士学位论文第13页回归方程为：Y=1.1154X-0.0059（R2=0.995），其中Y为吸光度值，X为葡萄糖浓度（mg/mL）；牛血清蛋白标准曲线见图2-2，回归方程为：Y=0.0138X-0.002（R2=0.996），其中Y为吸光度值，X为牛血清蛋白浓度（μg/mL），经计算强雄腐霉粗多糖中总糖含量为83.62%，蛋白质含量为6.89%，强雄腐霉粗多糖中蛋白质含量较低，可以进行进一步的分级纯化。图2-1葡萄糖标准曲线Figure2-1Standardcurveofglucose图2-2牛血清蛋白标准曲线Figure2-2Standardcurveofbovineserumalbumin2.2.2强雄腐霉胞外多糖的分级纯化DEAE-52纤维素是一种阴离子交换树脂，利用不同极性的洗脱液可将带电荷不同的多糖分级洗脱下来，从而得到带电特性不同的纯化组分[102]。DEAE-52分离多糖的原理如图
袁志香腐霉多糖的分离与鉴定及其在草莓采后保鲜中的作用研究第14页2-3所示，通常利用纯水作为洗脱液时可以将中性多糖洗脱下来，利用盐溶液如NaCl溶液作为洗脱液洗脱时可以将酸性多糖洗脱下来[103]。带电特性不同的纯化多糖在结构组成、生物活性等方面往往存在较大的差异，酸性多糖多含有糖醛酸、氨基酸或硫酸基等酸性基团[65]。图2-3DEAE-52纤维素树脂洗脱示意图Figure2-3SchematicdiagramofDEAE-52celluloseelution图2-4强雄腐霉胞外多糖（PEPS）洗脱曲线Figure2-4ElutioncurveofPythiumarrhenomanesexopolysaccharides(PEPS)强雄腐霉多糖的洗脱曲线如图2-4所示。强雄腐霉粗多糖经纯水和不同浓度的盐溶液（0.1M、0.3M、0.5M的NaCl溶液）洗脱共得到三个组分，分别为水洗组分PEPS-1、0.1MNaCl洗脱组分PEPS-2、0.5MNaCl洗脱组分PEPS-3，可以初步判定PEPS-1为中性多糖，PEPS-2和PEPS-3可能为酸性多糖，其中PEPS-2和PEPS-3易溶于0.5MNaOH溶液。
【参考文献】：
期刊论文
[1]微生物胞外多糖黄原胶的应用与研究进展[J]. 邱嘉辉,何亚文. 激光生物学报. 2019(05)
[2]铁皮石斛多糖提取及抗氧化活性研究[J]. 王丽霞,刘孟宗,王芳,张惠. 中国食品添加剂. 2019(02)
[3]地皮菜多糖的分离纯化及结构组成分析[J]. 张雅雯,李海平,孟丽青,王迎进. 食品研究与开发. 2017(18)
[4]Growth Inhibitory Effects of Garlic Polysaccharide on Human HepG2 Cells[J]. Liyan LI,Tao HUANG. Agricultural Science & Technology. 2017(06)
[5]HPGPC法测定库拉索芦荟多糖的分子量和含量[J]. 杨树娟,姜文圣,钱如贵,申开泽,王艳. 今日药学. 2016(11)
[6]杜香多糖的乙醇分级纯化及其性质研究[J]. 张乔会,黄晶晶,田盼盼,王建中,罗兴武. 食品研究与开发. 2016(19)
[7]绞股蓝内生真菌产胞外多糖发酵条件的优化[J]. 李传民,曹健,张慧茹,兰亚莉. 河南农业科学. 2016(01)
[8]真菌发酵胞外多糖的研究进展[J]. 杨同香,吴孔阳,陈俊亮,唐浩国,康怀彬. 食品科学. 2016(05)
[9]DEAE纤维素纯化玉米须总多糖的工艺优选[J]. 孙晓雪,康杰,王昶,王伟明. 中国实验方剂学杂志. 2014(15)
[10]2,4-二硝基苯肼法测定维C银翘片中维生素C的含量[J]. 孙艳丽. 广东化工. 2013(13)
博士论文
[1]几种植物多酚捕获体内自由基反应机理的理论研究[D]. 逯阳.哈尔滨理工大学 2017
[2]基于牡蛎糖原硫酸酯结构的多糖构效关系研究[D]. 杨静峰.江苏大学 2013
[3]黄伞子实体多糖的分离纯化、结构鉴定及生物活性的研究[D]. 聂永心.山东农业大学 2011
[4]鼠李糖脂强化石油污染土壤植物—微生物联合修复研究[D]. 李琦.西安建筑科技大学 2011
[5]青蛤多糖分离鉴定、硫酸酯化及其生物活性研究[D]. 蒋长兴.南京农业大学 2011
[6]氨基葡萄糖/壳寡糖稀土配合物的合成、表征及抗氧化性能研究[D]. 任群翔.东北大学 2009
硕士论文
[1]植物及水体重金属含量拉曼光谱检测方法研究[D]. 江丽霞.华东交通大学 2015
[2]蓝芪复方中多糖的纯化及分子量测定[D]. 罗小燕.广东药学院 2015
[3]三株大型真菌的发酵条件优化及其胞外多糖的结构与功能研究[D]. 刘帅.河南师范大学 2014
[4]马铃薯L-半乳糖-1，4-内酯脱氢酶基因在番茄中的功能分析[D]. 赵云霞.山东农业大学 2010
[5]莲花蜂花粉多糖的提取、分离及生物活性的研究[D]. 刘洁.福建农林大学 2009
[6]牡蛎多糖的分离纯化及生物学活性研究[D]. 李志.福建农林大学 2009
[7]中药北沙参多糖与单糖组成和含量测定方法研究[D]. 任浩娜.沈阳药科大学 2008
[8]火棘多糖的初步研究[D]. 杨锋.陕西师范大学 2004
本文编号：3493360
本文链接：https://www.wllwen.com/projectlw/qgylw/3493360.html
