火锅底料中罂粟壳主成分免疫侧向层析检测方法研究

发布时间：2022-01-27 16:59

　　近年来,食品添加剂相关安全事件频繁出现在公众的视野之中,因此,引发了消费者对于食品安全的担忧;同时,消费者的饮食观念也从过去的温饱发展到如今的绿色健康。其中,中国政府和法律已明文禁止使用危害人体健康的添加物,但仍有一些食品生产经营者通过在火锅底料中添加罂粟壳来谋取个人利益。本研究以罂粟壳有效成分吗啡为实验检测对象,区别于传统的色谱法、光谱法以及电泳法,建立了快速检测火锅底料中罂粟壳主成分的免疫侧向层析试纸条方法,以保证人类健康和社会稳定。胶体金免疫侧向层析试纸条吗啡检测方法的建立,是基于抗原抗体特异性识别原理、免疫竞争机制和侧向层析方法对吗啡进行试纸检测,并进行特异性和灵敏度测试。当待测样品中存在目标物时,吗啡优先与金标偶联物结合,导致检测线显色被削弱或消失。火锅底料经过简单的预处理,在最优实验条件下,可在10 min内实现吗啡检测,裸眼检测灵敏度为5 ppb,标准曲线在0.1-5 ppb范围内线性良好。在普通胶体金免疫侧向层析试纸条的基础上,通过两条检测线浓度差异,实现对火锅底料中吗啡半定量检测。在最优实验条件下,10 min便可完成吗啡检测,裸眼检测灵敏度为5 ppb,在1-30 ... 

【文章来源】：合肥工业大学安徽省211工程院校教育部直属院校

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

免疫侧向层析法三聚氰胺检测原理示意图

十种不同发射颜色的CdSe@ZnSQDsFig1.2TendistinguishableemissioncolorsofZnS-cappedCdSeQDs

第二章胶体金免疫侧向层析吗啡检测方法建立7第二章胶体金免疫侧向层析吗啡检测方法建立2.1胶体金免疫侧向层析试纸条吗啡检测原理由于吗啡为小分子化学物质，因此胶体金免疫侧向层析吗啡检测方法的建立，是基于抗原抗体特异性识别原理和免疫竞争机制对吗啡进行试纸检测，并进行特异性和灵敏度测试。检测原理如下图2.1所示：图2.1胶体金免疫侧向层析试纸条吗啡检测原理示意图Fig2.1SchematicillustrationoftheGNP-labelingLFSforMOPdetermination胶体金免疫侧向层析吗啡检测试纸条从左到右依次为样品垫、金标垫、NC膜和吸水垫，将待测溶液滴加到样品垫上，在毛细管力作用下沿膜向吸水垫方向移动。将胶体金纳米粒子与吗啡单克隆抗体进行偶联后滴加在金标垫上，吗啡包被原和羊抗鼠二抗分别喷涂在NC膜上作为试纸条的检测线和控制线，而金标偶联物可在T线和C线所在位置聚集观察。吗啡分子作为目标分析物，作用等同于吗啡包被原，均可以与吗啡抗体进行结合，由于二者不能同时与吗啡抗体进行反应，而吗啡分子的结合能力要强于吗啡包被原，从而形成竞争作用，通过目测NC膜上T线和C线所在区域的显色情况对样品溶液中目标物含量进行检测。使用该方法开发的试纸条进行检测时，将样品溶液滴加在样品垫处，若待检样品中不含目标物吗啡分子，通过金标偶联物/吗啡包被原和金标偶联物/羊抗鼠二抗的特异性识别，将抗体标记的胶体金纳米粒子分别固定在T线和C线上，使T线和C线处出现显色明显的红色条带，表明结果为阴性。相反，当样品中含有目标物时，毛细管作用力首先驱动样品溶液进入金标垫，与金标偶联物结合反应形成GNP-antibody-mop，而吗啡抗体上只有一个特异性结合位点，通过竞争反应效


本文编号：3612776