分支酶修饰蜡质大米淀粉结构与性质研究

发布时间：2022-04-18 21:05

　　淀粉改性能改善大多数天然淀粉不溶于冷水、糊化后易老化、低温发生凝沉等不足,在食品工业中有广泛的应用。其制备途径包括物理改性、化学改性和酶法改性。其中,酶法反应效率高、反应条件温和且产物环保,适于大规模工业生产应用。分支酶具有断裂α-1,4-糖苷键和形成α-1,6-糖苷键的水解转苷催化特性,是修饰改性淀粉的一种重要的酶类。本课题利用分支酶对蜡质大米淀粉进行修饰改性,并对得到的酶改性淀粉进行结构分析,在此基础上,以β-胡萝卜素为例考察该酶改性淀粉在营养素载运方面的应用,主要研究内容及结果如下:首先,本课题利用基因工程获得来源于Bacillus stearothermophilus的分支酶基因片段,将其连接到pET-22b（+）载体上,构建得到重组质粒。重组质粒在大肠杆菌E.coli BL21中经异丙基-β-D-硫代半乳糖糖苷（IPTG）诱导表达获得重组分支酶,经测定,该蛋白酶相对分子质量为70 kDa,最适温度为75℃且具有良好的热稳定性,最适pH为7.0,在pH 6.0~9.5均保持稳定。其次,利用分支酶对蜡质大米淀粉进行修饰改性。对改性淀粉的结构分析,表明经分支酶处理后,一方面蜡质大米... 

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
    1.1 改性淀粉研究
        1.1.1 改性淀粉研究概述
        1.1.2 酶改性淀粉常用酶分类及α-淀粉酶家族
    1.2 分支酶研究
        1.2.1 分支酶的来源
        1.2.2 分支酶的三维结构
        1.2.3 分支酶的催化机理
        1.2.4 分支酶在淀粉改性方面的应用
    1.3 多糖结构与构象分析
        1.3.1 高碘酸氧化和Smith降解法分析
        1.3.2 多糖相对分子质量及分布测定
        1.3.3 多糖链长分布的测定
        1.3.4 多糖糖苷键构型的测定
        1.3.5 多糖构象的测定
    1.4 课题研究背景及意义
    1.5 课题主要研究内容
2 材料与方法
    2.1 主要材料与试剂
    2.2 主要仪器与设备
    2.3 实验方法
        2.3.1 重组分支酶的制备
        2.3.2 重组分支酶的酶学性质分析
        2.3.3 酶改性淀粉的制备与结构分析
        2.3.4 酶改性淀粉的特性研究
        2.3.5 分支环状特征结构的制备及分离纯化
        2.3.6 分支环状特征结构解析与模拟
        2.3.7 分支环状特征结构的特性研究
        2.3.8 酶改性淀粉在营养素保护上的应用
3 结果与讨论
    3.1 重组分支酶酶学性质
        3.1.1 重组分支酶的表达与分离
        3.1.2 温度和pH对重组分支酶活的影响
    3.2 酶改性淀粉结构分析
        3.2.1 酶催化进程中底物结构分析
        3.2.2 酶改性淀粉结构分析
        3.2.3 酶改性淀粉的基本性质
    3.3 环状分支特征结构的制备与分析
        3.3.1 分支环状结构的制备
        3.3.2 分支环状结构的分离纯化
        3.3.3 分支环状结构的解析
        3.3.4 分支环状结构的分子模拟
        3.3.5 分支环状结构特性分析
    3.4 酶改性淀粉的应用
        3.4.1 包合物的基本性质
        3.4.2 包合物的特性表征
        3.4.3 包合物的稳定性分析
主要结论与展望
致谢
参考文献
附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]预糊化淀粉制备、性质及其在食品工业中应用[J]. 吕莹果,郭玉,高学梅.  粮食与油脂. 2012(07)
[2]高效排阻色谱-多角度激光散射分析淀粉分子特征[J]. 缪铭,张涛,江波.  食品科学. 2009(21)

博士论文
[1]猪苓菌核多糖的分离纯化、结构鉴定和溶液构象研究[D]. 何鹏飞.浙江工业大学 2016
[2]发酵灵芝多糖对肝癌细胞的抑制及其与血清蛋白的分子对接模拟[D]. 沈洁.江南大学 2014
[3]软化类芽孢杆菌α-环糊精葡萄糖基转移酶在大肠杆菌中的表达及其产物特异性分析[D]. 李兆丰.江南大学 2009

硕士论文
[1]淀粉的高支化修饰及其产物的消化性能研究[D]. 任俊彦.江南大学 2018



本文编号：3646365