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黄酒酵母菌株对黄酒发酵微生物群落结构与风味物质的影响

发布时间:2023-01-15 10:02
  黄酒历史文化悠久,是世界三大发酵酒之一,其风味独特、酒精度低且营养价值高,广受消费者喜爱。黄酒发酵过程中的微生物群落由麦曲含有的微生物与酒药中的酵母菌组成,经多菌种协调发酵,使得黄酒微生物群落结构与风味物质组成复杂。黄酒酵母主导乙醇发酵且代谢产生多种风味物质,但黄酒酵母对发酵微生物群落影响尚不清楚,酵母菌种变化对基因功能、风味物质的影响有待研究。本课题利用宏基因组方法,研究黄酒酵母菌株对黄酒发酵微生物组成与黄酒风味物质的影响,主要研究内容如下:(1)优化了针对拥有复杂体系的麦曲与黄酒发酵液中微生物总DNA的提取方法,最终发现改进后的SDS-CTAB法提高了总DNA提取效率,减少了体系中非微生物成分干扰,对后续黄酒发酵微生物的高通量测序提供了良好基础。(2)基于真菌内转录间隔区(ITS1)与细菌的16S rRNA基因扩增子高通量测序分析(Amplicon sequencing),在三株黄酒酵母菌株(YJSH1,N85,XZ11)各自作用下,黄酒发酵过程中真菌变化趋势相同,糖化发酵阶段真菌主要来自麦曲中的Aspergillus,发酵中后期Saccharomyces成为优势真菌。细菌种类繁多... 

【文章页数】:84 页

【学位级别】:硕士

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英文摘要
第1章 绪论
    1.1 黄酒的简介
    1.2 黄酒微生物群落的研究进展
        1.2.1 麦曲中微生物群落研究进展
        1.2.2 黄酒发酵过程中微生物群落的研究进展
        1.2.3 黄酒微生物群落的研究方法
    1.3 黄酒风味物质的研究
    1.4 课题的研究意义与主要内容
        1.4.1 本课题的研究意义和创新点
        1.4.2 本课题的主要内容
第2章 黄酒麦曲总DNA的提取方法优化
    2.1 材料与仪器
        2.1.1 材料
        2.1.2 仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 样品预处理
        2.2.2 总DNA的提取方法与纯化
        2.2.3 总DNA提取质量的检测
    2.3 结果与分析
        2.3.1 总DNA提取方法的电泳结果比较
        2.3.2 总DNA提取方法的DNA浓度与纯度比较
        2.3.3 总DNA提取方法的PCR结果比较比较
        2.3.4 总DNA提取方法的测序结果比较
        2.3.5 细菌与真菌Alpha多样性
        2.3.6 不同方法提取麦曲DNA的菌群结构
    2.4 本章小结
第3章 黄酒发酵过程中微生物群落结构组成与代谢变化
    3.1 材料与仪器
    3.2 黄酒发酵与总DNA提取
        3.2.1 黄酒的酿造与取样
        3.2.2 黄酒发酵过程中微生物总DNA的提取
    3.3 黄酒细菌16S rRNA基因和真菌ITS1扩增分析
        3.3.1 PCR扩增
        3.3.2 Illumina Miseq测序与分析
    3.4 结果与分析
        3.4.1 黄酒发酵过程中总DNA的提取结果
        3.4.2 黄酒发酵过程中细菌的菌群结构与动态变化
            3.4.2.1 基于细菌门水平的菌群结构与动态变化
            3.4.2.2 基于细菌属水平的菌群结构与动态变化
        3.4.3 真菌的菌群结构与动态变化
        3.4.4 细菌与真菌菌群间差异比较
        3.4.5 KEGG代谢通路分析
    3.5 本章小结
第4章 黄酒酵母菌株对黄酒的风味物质的影响
    4.1 材料与仪器
        4.1.1 样品采集
        4.1.2 主要试剂
        4.1.3 主要仪器
    4.2 实验方法
        4.2.1 黄酒中基本理化指标的测定
        4.2.2 黄酒中挥发性物质的测定
        4.2.3 黄酒中有机酸的测定
    4.3 结果与分析
        4.3.1 黄酒中酒精度、总酸与总糖的测定结果
        4.3.2 黄酒中挥发性物质的测定结果
        4.3.3 黄酒中有机酸的测定结果
    4.4 本章小结
第5章 宏基因组测序探究不同黄酒中微生物组成与基因功能
    5.1 材料与方法
        5.1.1 材料与仪器
        5.1.2 宏基因组测序与数据分析方法
    5.2 结果与分析
        5.2.1 宏基因组测序数据概括
        5.2.2 不同种类黄酒中细菌与真菌结构组成分析
            5.2.2.1 微生物菌群组成结构
            5.2.2.2 微生物在种水平差异比较
        5.2.3 微生物基因功能分析
            5.2.3.1 EggNOG数据库功能注释
            5.2.3.2 CAZy数据库功能注释
            5.2.3.3 KEGG数据库后功能注释
    5.3 本章小结
第6章 结论与展望
    6.1 结论
    6.2 展望
参考文献
致谢



本文编号:3730925

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