基于适配体识别-酶催化显色的真菌毒素和重金属检测方法研究

发布时间：2024-07-09 01:11

　　真菌毒素和重金属是危害食品安全的重要风险因子,污染分布广、防控难,极易从农田到餐桌全程污染食品原料和食品,并对人体健康和公共卫生造成不利影响,因此切实提高检测技术水平、及时监控发现该类危害隐患对于保障食品安全至关重要。本研究选择了伏马毒素B1、玉米赤霉烯酮、重金属镉和铅四种典型食品安全危害物,以特异性强、亲和力高的核酸适配体为识别探针,基于生物酶催化显色反应原理、纳米酶促显色和信号增强效应,结合信号放大技术,构建了系列耗时短、结果直观、方法简易的真菌毒素和重金属高灵敏显色检测方法,旨在为基层食品危害物检测工作提供更简单更直观更便捷的技术方法选择,为丰富和提高食品安全检测技术提供技术支撑。首先,构建了基于适配体-辣根过氧化物酶催化显色的检测方法体系,用于检测伏马毒素B₁。将标记生物素的伏马毒素B₁适配体通过生物素-链霉亲和素反应固定在微孔板上,再通过生物素-链霉亲和素反应将辣根过氧化物酶(HRP)标记在适配体互补链上,互补链与目标毒素竞争结合适配体,适配体优先捕获目标毒素,随着目标毒素浓度增加,显色反应信号降低,溶液颜色由深黄趋向淡黄直至无色,...

【文章页数】：94 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图1-1伏马毒素B1化学结构图

江南大学博士学位论文21.1.1.1黄曲霉毒素黄曲霉毒素是双呋喃环类毒素，最适宜生长稳定为33℃，主要分为黄曲霉毒素B1,G1,B2和G2等四种类型，另外，黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的羟基化形式，见于牛奶和乳制品中。在紫外灯下，黄曲霉毒素B和G分别显示出蓝色和绿色的荧光特性，....

图1-2玉米赤霉烯酮化学结构图

第一章绪论3玉米赤霉烯酮是一种类雌激素样非甾体毒素，其化学结构见图1-2，常污染小麦，玉米，燕麦，黑麦和大麦等谷物，具有致畸性和生殖毒性，最适宜生长温度为25℃，国际癌症研究署将其归类为2A类致癌物，欧洲食品安全署将每日最大耐受摄入量定为0.25μg/kg体重[11]。在我国，玉....

图1-3适配体固定至石墨烯表面示意图

第一章绪论5析物免疫监测方法，样品消耗少，分析时间短，检测成本降低，针对T2毒素、伏马毒素B1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇的检测限分别达到17.8、331.5和242.0μg/kg，样品前处理和分析的总时间少于30分钟[26]。1.1.3.4适配体检测技术将适配体固定化是构建适配体生物检....

图1-4基于氧化石墨烯和分子信标的重金属铜检测法原理

第一章绪论9小块，并被氧化石墨烯释放以恢复荧光（图1-4）。该方法的检出限约为50nM[62]。Liu的小组研究了三种不同长度的胸腺染色DNA探针，并用氨基标记了荧光探针的3"端以共价键结合氧化石墨烯。当存在Hg2+时，富含T的DNA与Hg2+结合形成双链结构，并且通过分离氧化石....

本文编号：4004164