光镊研究rpoS RNA自抑制茎环
【图文】:
1.1.2微针-光镊法逡逑2008年Bustamante等人在研究核糖体时使用了微针-光镊实验方法_,方逡逑法如图1-2邋(a)所示。待研宄的分子处于被微针固定的微球与光镊捕获的微球逡逑之间,这种方案能在样品室较深的位置进行实验,避免了样品室底面引起的偏逡逑差。而且该方法对于微球的固定比粘连在样品室底面更加牢固,是目前单分子逡逑光镊领域中常用的做法。逡逑1.1.3双光镊与多光镊法逡逑双光镊法也是一种常用的单分子研宄策略。如图1-2邋(b)所示,待研究分逡逑子两端的微球使用两束独立的光镊进行捕获,分子上的外力通过控制其中一个逡逑光阱的位置来完成。双光镊系统中实验区域不仅距离样品室底面较远,同时样逡逑品室(或微针)机械漂移不会对实验带来影响,两个光镊的位置都只与物镜有逡逑关,因此无论是拉伸还是恒力模式^16],都能很好地驾驭。逡逑⑷■逦(b)逦smw逡逑PI逦yU一逡逑W:
(a)图为微纳加工的单分子光镊示意图。(b)图为高通量单分子光镊进行DNA逡逑拉伸的示意与实验图像。逡逑nSWAT进行DNA拉伸如图1-3邋(b)所示,先向样品室中输入中间偶联有逡逑DNA的微球样品溶液,很多微球被阵列光阱捕获。然后通入缓冲液,清洗掉中逡逑间没有连接DNA的单个微球与样品残余液体,最后通过移动光阱阵列的位置逡逑拉伸微球间的DNA分子。这种光镊设备一次可以同时进行几十到上百个分子逡逑的拉伸,补充了传统单分子光镊中一次只能对一个分子拉伸的不足;nSWAT的逡逑功率低,能量利用非常高效;特别是这种芯片式的光镊不存在机械漂移,非常逡逑稳定,该仪器也容易和荧光显微技术等相结合。逡逑1.1.5荧光光镊逡逑荧光成像是生命科学研宄中常用的手段,荧光与光镊的结合使得研宄中,,逡逑在获得分子力谱的同时也能得到荧光标记分子的位置信息[22_24]。Ishii等人结合逡逑?邋光镊、全内反射焚光显微镜(Total邋Interna丨邋Reflection邋Fluorescence邋Microscope,逡逑TIRF)与荧光显微镜研宄了肌球蛋白沿肌动蛋白运动的精细过程[25]。光镊与逡逑4逡逑
【学位授予单位】:中国科学技术大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:Q752
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本文编号:2615478
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