火龙果色素相关bHLH转录因子克隆及功能分析
【学位单位】:贵州大学
【学位级别】:硕士
【学位年份】:2019
【中图分类】:S667.9;Q943.2
【部分图文】:
1 bHLH 基序及其目标 DNA 复合体(Ma et al,1x formed between bHLH motif and its target DNA(因子的分类等(1997)人根据 bHLH 的 DNA 结合模式分为六个组分(A、B、C、D、E、F)。而 组,Buck 等(2003)从拟南芥的 147 个 b由于植物与动物中 bHLH 转录因子结构和生也是相对独立的,故植物和动物中关于 beim 等(2003)在拟南芥中发现了 133 个 b族;随后又出现了 14 个新的 bHLH 转录因步分成 21 个亚家族。而 Li 等(2006)则根
2.3 结果与分析2.3.1 火龙果总 RNA 质量及反转录检测采用 2.2.1.2 所述方法提取各个时期的火龙果果实的总 RNA,电泳检测 质量,结果(图 2-1,A)显示:RNA 条带无拖尾现象,18S 和 28S 条带清见,且 28S 条带亮度约为 18S 的两倍,这说明提取的 RNA 质量较好,未降无 DNA 和蛋白质的污染。用酶标仪检测 RNA 质量显示 OD260/OD280 均在左右,进一步说明提取的 RNA 可以满足后续实验要求。将总 RNA 反转成 c第一条链,并以反转录产物为模板进行扩增。获到与预期的大小一致 167 b右的产物(图 2-1,B),条带带型稳定,表明反转录成功,可以用于下一验。
贵州大学 2019 届硕士研究生学位论文2.3.2 不同发育时期 HubHLHs 的 qRT-PCR 检测本实验中 qRT-PCR 溶解曲线和扩增曲线如图 2-2 所示,结果显示目的基因引物和内参引物的溶解曲线均很平滑无波动呈单峰曲线,这说明引物的特异性很好。扩增曲线存在明显基线期、指数期和平台期,基线平直,各管的平行性好,表明各反应管的扩增效率十分接近。
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