拟南芥AtZntB4基因的功能初探

发布时间：2020-12-16 07:08

　　Mg2+是植物细胞中含量最丰富的二价阳离子,也是生物体生长发育过程中不可或缺的矿物质素。植物体内存在一类Mg2+转运体,能够应答镁胁迫,在植物细胞中调控Mg2+的吸收和转运以及维持细胞内Mg2+平衡方面发挥重要作用。1、通过TMHMM在线网页对AtZntB4（At2g04305）的蛋白质序列进行分析,发现其C端有两个跨膜区,预测该基因可能编码一个与跨膜相关的蛋白。通过检测不同浓度和不同时间镁胁迫处理的拟南芥幼苗的根部和冠部该基因的表达情况,可知AtZntB4的表达与Mg2+相关。2、通过将AtZntB4导入缺乏Zn2+转运体的酿酒酵母突变体ZHY3中进行Zn2+转运能力检测,实验结果表明AtZntB4和Zn2+转运无关。进一步利用鼠伤寒沙门氏杆菌突变株MM281来验证了其是否具有Mg2+转运能力,实验结果说明AtZntB4能够互补MM281的Mg2+转运缺陷。3、用缺乏不同二价金属阳离子（Ca2+、Fe2+、Zn2+、Mn2+、Mg2+）条件对atzntb4突变体和野生型拟南芥进行处理,结果显示,在缺乏Ca2+和Mg2+条件下,atzntb4突变体长势相较于野生型较弱,但在缺Mg2+条... 

【文章来源】：东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

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图２－ｌ／ｌ／Ｚ／＂似基因克隆及菌液ＰＣＲ鉴定结果（Ｍ：?ＤＬ２０００；箭头所指为目的条带；ａ：??基因克隆结果；ｂ：?ＡＺ价基因菌液ＰＣＲ鉴定结果）??－

菌中的ＣｏｒＡ蛋白结构，都有两个跨膜区，在第一个跨膜区上存在转运Ｍｇ２＋所必须的??ＧＭＮ保守基序。??如图２－２所示：基因序列预测跨膜区分析。通过对／＾２？劇的基因序列分??析，我们发现，Ａ办必／基因开放阅读读码框含有１３０５个碱基对，编码４３４个氨基酸；??通过ＴＭＨＭＭ在线分析，在ＡｔＺｎｔＢ４的Ｃ端有两个跨膜区，已知ＣｏｒＡ家族中的Ｍｇ２＋??转运蛋白的一个重要区域是Ｃ端的两个跨膜区，所以可以预测出该蛋白与Ｍｇ２＋可能具??有相关性。??ＴＭＨＭＭ?ｐｏｓｔｅｒｉｏｒ?ｐｒｏｂａｂｉｌｉｔｉｅｓ?ｆｏｒ?ＷＥＢＳＥＱＵＥＮＣＥ??ｉ?：）?ＩＴ??■?■??０Ｌ＿＿＿＿＿＿，．．．．．．ｍＭ??５０?１００?１５０?２００?２５０?３００?３５０?４００??ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ??ｉｎｓｉｄｅ??ｏｕｔｓｉｄｅ??图２－２?基因序列预测跨膜区分析??Ｆｉｇ．?２－２?Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏ＼ＡｔＺｎｔＲ４?ｇｅｎｅ?ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ?ｉｎ?ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ?ｒｅｇｉｏｎ??２．３本章小结??根据文献报道，对拟南芥Ｍｇ２＋转运家族－ＣｏｒＡ家族成员的蛋白结构分析，Ｃ端均存??在两个疏水的跨膜区。本研究中通过克隆得到Ｊ／Ｚ咐５４基因，对其基因序列进行分析发??现，在Ｃ端也有两个跨膜区，第一个跨膜区由第３３１－３５３之间的氨基酸序列组成，第二??个跨膜区由第３７３－３９５之间的氨基酸序列饥成。所以从序列结构上分析我们推测??可能编码一个和跨膜相关的蛋白。对于推测的合理性

基因表达量的变化直观判断出在缺镁和高镁处理下该基因在根部和冠部诱导不??同时间后转录活性情况。??如图３－１所示，不同时间缺镁和高镁诱导下基因在拟南芥冠部和根中表达??模式。以２．５?ｍＭ处理２４?ｈ作为对照，发现在缺镁和高镁诱导下基因在冠中的??转录活性下降。缺镁诱导８?ｈ后在冠中的表达量降到最低值，仅为对照的０．１１８；??诱导２４ｈ后，在培养基中加２．５ｍＭＭｇ２＋诱导２４ｈ，及／的表达量又回到近乎正常??水平；高镁诱导２?ｈ和８?ｈＡＺｎ／似在冠中的表达量均较低，分别为对照的０．５１７６和０．４９２５。??缺镁和高镁诱导下基因在根中的转录活性提高。缺镁诱导２４?ｈ后在根??－１９－??


本文编号：2919751