冠突曲霉钙信号调控基因Fig的功能研究

发布时间：2020-12-21 12:55

　　冠突曲霉(Aspergillus cristatus)是茯砖茶品质的标志性真菌,在人工培养基上,通过控制渗透压高低即NaCl的浓度,可获得纯子囊孢子或分生孢子,一般真菌是通过高渗透压甘油途径(HOG)作出对渗透压环境反应,本实验室对冠突曲霉(A.cristatus)低渗和高渗条件下的转录组测序数据分析发现:在高渗透压培养条件下HOG途径没有被激活,说明该真菌不是通过该途径调节产孢。有研究报道钙信号途径参与渗透压的响应,我们推测钙信号途径参与该菌对渗透压的响应,其中质膜上的钙离子转运蛋白的基因Fig,能够转运钙离子,可能与有性发育、无性产孢及菌丝生长有密切关系,因此,本研究选择冠突曲霉Fig基因作为研究对象,开展了敲除载体的构建,根癌农杆菌介导转化,胞外钙和钙螯合剂对突变菌株影响等研究,获得以下结果:(1)Fig基因全长994 bp,有3个内含子,预测编码271个氨基酸,含有四个跨膜区,属于疏水蛋白,在第一和第二个跨膜区之间有保守基序GΦΦGxC(n)C,与其他曲霉Fig基因的进行同源对比发现,Fig基因结构保守,保守结构域及跨膜结构基本相似;(2)通过同源重组的方法构建基因敲除载体,利... 

【文章来源】：贵州大学贵州省 211工程院校

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

蛋白Fig1保守基序示意图

技术路线图

贵州大学 2019 届 硕士研究生学位论文臂连接到载体 PDHt/sk-hyg 上构建重组载体 FigL-PDHt/sk-hyg，接着用相同的方法将带有酶切位点的Fig 基因下游同源臂连接到重组载体 FigL-PDHt/sk-hyg 上，获得敲除载体 FigL-PDHt/sk-hyg-FigR。

【参考文献】：
期刊论文
[1]茯砖茶“金花菌”vcx基因克隆及表达分析[J]. 任秀秀,谭玉梅,任春光,王玉臣,刘永翔,刘作易.  基因组学与应用生物学. 2017(12)
[2]冠突散囊菌菌落计数方法的优化[J]. 马跃,郝彬秀,田海霞,李颂,王春玲.  食品与发酵科技. 2017(06)
[3]冠突曲霉veA基因缺失型与野生型的差异代谢物研究[J]. 任春光,谭玉梅,任秀秀,王亚萍,刘永翔,刘作易.  菌物学报. 2018(02)
[4]冠突曲霉产孢相关基因的克隆及功能分析[J]. 王亚萍,谭玉梅,刘永翔,刘作易.  基因组学与应用生物学. 2017(09)
[5]不同产区加工的茯砖茶中“金花”菌的分离及分子鉴定[J]. 赵仁亮,吴丹,姜依何,朱旗.  湖南农业大学学报(自然科学版). 2016(06)
[6]冠突散囊菌nsdD基因超表达菌株的构建及表型分析[J]. 余春芳,熊庆,李文仿,谭玉梅,刘永翔,刘作易,欧琴.  基因组学与应用生物学. 2017(03)
[7]贵州地区茯砖茶“金花菌”的分离和分子鉴定[J]. 谭玉梅,王亚萍,葛永怡,任秀秀,王玉臣,刘作易.  菌物学报. 2017(02)
[8]人工接种冠突散囊菌对白茶主要呈味物质的影响[J]. 刘菲,孙威江,黄艳,王恒,黄雅彬.  菌物学报. 2016(08)
[9]谢瓦氏曲霉间型变种esdC基因的功能分析[J]. 刘荣,谭玉梅,刘永翔,刘作易.  菌物学报. 2015(02)
[10]冠突散囊菌转录因子stf1基因的克隆及其表达分析[J]. 谭玉梅,王玉臣,刘永翔,桑石磊,刘作易.  菌物学报. 2015(01)

博士论文
[1]构巢曲霉高亲和性钙离子吸收系统参与生长发育调控的机制研究[D]. 王莎.南京师范大学 2013
[2]茯砖茶中冠突散囊菌分离培养及其发酵液胞外多糖与应用酶学研究[D]. 邓放明.湖南农业大学 2007
[3]氟与茶叶品质化学和微生物学的研究[D]. 吕毅.浙江大学 2004

硕士论文
[1]冠突散囊菌液体发酵工艺及其发酵液对消化酶活性影响的研究[D]. 杨抚林.湖南农业大学 2005



本文编号：2929862