KIF3A和KIF18A在优雅蝈螽精子形成中的作用分析

发布时间：2021-01-31 13:17

　　优雅蝈螽Gampsocleis gratiosa Brunner von Wattenwyl隶属于直翅目Orthoptera螽斯科Tettigoniidae,俗称蝈蝈。优雅蝈螽雄性个体较大,体型粗壮,容易饲养。其精子形状似箭头,顶体复合体结构复杂,顶体复合体之下的细胞核在光学显微镜下清晰可见,是研究螽斯科昆虫精子形成的理想材料。本文首先通过基因克隆和生物信息学手段对KIF3A（kif3a）和KIF18A（kif18a）进行鉴定。其次,应用RNA干扰、实时荧光定量PCR、冰冻切片与免疫荧光、石蜡切片片与PAS染色技术分析kif3a和kif18a基因沉默后对优雅蝈螽精子形成的影响。为研究驱动蛋白在直翅目昆虫精子形成中的作用奠定基础。分析比较本实验室建立的优雅蝈螽四个转录组中驱动蛋白基因的表达量,选择KIF3A和KIF18A作为研究对象,克隆得到kif3a和kif18a基因,并进行生物信息学分析。Kif3a基因cDNA序列长3590bp,包括一个长2130bp的开放阅读框,编码709个氨基酸残基组成的多肽链。预测其多肽链的分子量为80.33KD,等电点为5.35。Kif18a基因cDNA序列... 

【文章来源】：河北大学河北省

【文章页数】：86 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

驱动蛋白重链二聚体结构（马达结构域和颈链的晶体结构）

NameTestisMale bodyOvaire KIFC1 无 无 无 KIFC2 无 无 无 KIFC3 无 无 无 KIF25 无 无 无 示 FPKM（每千个碱基的转录每百万映射读取的碎片，表征表达量kif18a 基因在不同组织中 qPCR 结果的 kif3a 和 kif18a 基因在头、触角、精巢、附腺、马氏管、、肌肉等组织中均有表达（图 3-1 和图 3-2）。KIF3A 在精腺、前胃、中肠、胃盲囊、气管、头、马氏管表达量降低，1）。KIF18A 也是在精巢中表达量最高，依次在附腺、中、马氏管表达量降低，也是在肌肉中表达量最低（图 3-2）

图 3-2 kif18a 在各个组织中的表达量分析. 3-2 RT-qPCR analysis of relative expression of the kif18a in different tve of head; Ne）；精巢（Testis; Te）；附腺（Accessory gland;Ag）；马氏管（Trachea; Tr）；中肠（Midgut; Mg）；前胃（Forestomach; Fs）；肌肉（Muscle; Mu）A 及 KIF18A 基因及蛋白序列分析结果、kif18a 基因 cDNA 序列分析室优雅蝈螽精巢转录组分别搜索并获取优雅蝈螽 kif3a 和 kBI 上输入其序列得到，kif3a 的开放阅读框（ORF）为 213f18a 的 ORF 为 4674bp ，编码 1557 个氨基酸。接着用 EXPe 上的 Portparam 程序分析得到 KIF3A 的分子质量为 80.33A 的分子质量为 171.25KD ，等电点为 8.62 ；其中氨基酸的后用 Bioedit 软件得到这四种蛋白的氨基酸序列如图 3-3 和

【参考文献】：
期刊论文
[1]优雅蝈螽精子形成期间微丝和微管蛋白的动态变化[J]. 陈杰,王乐,常岩林.  昆虫学报. 2018(03)
[2]优雅蝈螽精子形成过程中核的形态结构变化观察（英文）[J]. 王昕,常岩林,赵卓,郭明申.  昆虫学报. 2014(10)
[3]暗褐蝈螽与优雅蝈螽精子超微结构的比较研究（直翅目,螽斯科）[J]. 常岩林,王莉,郭明申,张小霞.  动物分类学报. 2011(03)
[4]优雅蝈螽与暗褐蝈螽精子束的显微观察[J]. 王莉,常岩林,冯晓丽,石福明.  昆虫学报. 2010(05)
[5]小鼠精子细胞变态成形过程中manchette的免疫荧光染色分析[J]. 郭睿,闫萍,李喜霞,张栋.  解剖学报. 2008(06)



本文编号：3010944