巨胞饮内吞途径介导蒲公英汤剂体进入细胞
发布时间:2021-02-07 01:04
目的探究细胞摄取蒲公英汤剂体的机制。方法在人肺腺癌细胞系A549细胞模型上,用内吞通路的特异性化学抑制剂,以及敲减内吞通路中关键蛋白的手段,通过流式细胞计量术和激光共聚焦显微镜检测,评估荧光标记的蒲公英汤剂体进入细胞的机制。结果亲溶酶体物质能显著抑制蒲公英汤剂体进入细胞(P<0.05);巨胞饮抑制剂细胞松弛素D和阿米洛利能显著降低蒲公英汤剂体的胞内摄入(P<0.001),且呈现剂量依赖性;敲减Rac1和PAK1也有效地抑制其进入细胞(P<0.05)。结论蒲公英汤剂体通过内吞进入细胞且主要由巨胞饮介导。
【文章来源】:基础医学与临床. 2019,39(07)
【文章页数】:7 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 细胞系:
1.1.2 试剂:
1.2 方法
1.2.1 细胞培养:
1.2.2 蒲公英汤剂体的分离:
1.2.3 蒲公英汤剂体的定量:
1.2.4 PKH67荧光染料标记蒲公英汤剂体:
1.2.5 蒲公英汤剂体剂量和孵育时间研究:
1.2.6 抑制剂研究:
1.2.7 siRNA转染:
1.2.8 内吞实验:
1.2.9 免疫印迹法 (Western blot) 检测相关基因的蛋白表达:
1.3 统计学分析
2 结果
2.1 蒲公英汤剂体能进入A549细胞
2.2 蒲公英汤剂体通过内吞进入A549细胞
2.3 蒲公英汤剂体进入A549细胞不通过网格蛋白依赖性及非依赖性内吞途径
2.4 巨胞饮抑制剂显著抑制蒲公英汤剂体进入A549细胞
2.5 PAK1、Rac1 siRNA可抑制蒲公英汤剂体进入A549细胞
3 讨论
【参考文献】:
期刊论文
[1]Herbal decoctosome is a novel form of medicine[J]. Xiaoyun Li,Zhu Liang,Jianchao Du,Zhiqing Wang,Song Mei,Zhiqing Li,Yan Zhao,DANDan Zhao,Yiming Ma,Jun Ye,Jiantao Xu,Yu Zhao,Jiahui Chang,Yuhao Qin,Lanlan Yu,Chenxuan Wang,Chengyu Jiang. Science China(Life Sciences). 2019(03)
[2]Plant-derived phosphocholine facilitates cellular uptake of anti-pulmonary fibrotic HJT-sRNA-m7[J]. Jianchao Du,Zhu Liang,Jiantao Xu,Yan Zhao,Xiaoyun Li,Yanli Zhang,DANDan Zhao,Ruxuan Chen,Yang Liu,Trupti Joshi,Jiahui Chang,Zhiqing Wang,Yanxu Zhang,Jindong Zhu,Qiang Liu,Dong Xu,Chengyu Jiang. Science China(Life Sciences). 2019(03)
[3]Large-scale analysis of small RNAs derived from traditional Chinese herbs in human tissues[J]. Fengming Huang,Jianchao Du,Zhu Liang,Zhichao Xu,Jiantao Xu,Yan Zhao,Yexuan Lin,Song Mei,Quan He,Jindong Zhu,Qiang Liu,Yanxu Zhang,Yuhao Qin,Wei Sun,Jingyuan Song,Shilin Chen,Chengyu Jiang. Science China(Life Sciences). 2019(03)
本文编号:3021384
【文章来源】:基础医学与临床. 2019,39(07)
【文章页数】:7 页
【文章目录】:
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 细胞系:
1.1.2 试剂:
1.2 方法
1.2.1 细胞培养:
1.2.2 蒲公英汤剂体的分离:
1.2.3 蒲公英汤剂体的定量:
1.2.4 PKH67荧光染料标记蒲公英汤剂体:
1.2.5 蒲公英汤剂体剂量和孵育时间研究:
1.2.6 抑制剂研究:
1.2.7 siRNA转染:
1.2.8 内吞实验:
1.2.9 免疫印迹法 (Western blot) 检测相关基因的蛋白表达:
1.3 统计学分析
2 结果
2.1 蒲公英汤剂体能进入A549细胞
2.2 蒲公英汤剂体通过内吞进入A549细胞
2.3 蒲公英汤剂体进入A549细胞不通过网格蛋白依赖性及非依赖性内吞途径
2.4 巨胞饮抑制剂显著抑制蒲公英汤剂体进入A549细胞
2.5 PAK1、Rac1 siRNA可抑制蒲公英汤剂体进入A549细胞
3 讨论
【参考文献】:
期刊论文
[1]Herbal decoctosome is a novel form of medicine[J]. Xiaoyun Li,Zhu Liang,Jianchao Du,Zhiqing Wang,Song Mei,Zhiqing Li,Yan Zhao,DANDan Zhao,Yiming Ma,Jun Ye,Jiantao Xu,Yu Zhao,Jiahui Chang,Yuhao Qin,Lanlan Yu,Chenxuan Wang,Chengyu Jiang. Science China(Life Sciences). 2019(03)
[2]Plant-derived phosphocholine facilitates cellular uptake of anti-pulmonary fibrotic HJT-sRNA-m7[J]. Jianchao Du,Zhu Liang,Jiantao Xu,Yan Zhao,Xiaoyun Li,Yanli Zhang,DANDan Zhao,Ruxuan Chen,Yang Liu,Trupti Joshi,Jiahui Chang,Zhiqing Wang,Yanxu Zhang,Jindong Zhu,Qiang Liu,Dong Xu,Chengyu Jiang. Science China(Life Sciences). 2019(03)
[3]Large-scale analysis of small RNAs derived from traditional Chinese herbs in human tissues[J]. Fengming Huang,Jianchao Du,Zhu Liang,Zhichao Xu,Jiantao Xu,Yan Zhao,Yexuan Lin,Song Mei,Quan He,Jindong Zhu,Qiang Liu,Yanxu Zhang,Yuhao Qin,Wei Sun,Jingyuan Song,Shilin Chen,Chengyu Jiang. Science China(Life Sciences). 2019(03)
本文编号:3021384
本文链接:https://www.wllwen.com/projectlw/swxlw/3021384.html
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