马铃薯StCRK1和StCRK2亚细胞定位及其互作蛋白的初步筛选

发布时间：2021-02-20 18:32

　　马铃薯是世界第三大主粮作物之一,但其在培育过程中极易受到各种病害的影响,导致产量和品质降低。因此研究马铃薯自身的防御机制,对控制马铃薯病害具有重要的理论和实践意义。类受体激酶（receptor-likekinases,RLK）作为保守的上游信号分子,可调节植物发育和胁迫适应等生物过程。富含半胱氨酸的类受体激酶（cysteine-rich receptor-like kinase,CRK）是一类重要的 RLK,在植物的抗病性和细胞死亡中起重要作用。本研究克隆了马铃薯StCR1和StRK2无终止密码子的CDS序列,利用Gateway系统中的LR反应构建了马铃薯StCRK1/2-GFP表达载体,将表达载体转化农杆菌GV3101通过浸染本氏烟草叶片进行瞬时表达,发现马铃薯StCRK1和StCRK2均定位在质膜上;同时克隆了StCRK和和StCK2中包含近膜和激酶结构域的序列,构建了用于酵母双杂交的诱饵载体;并构建了致病疫霉（Phytophthora infestans）诱导下的马铃薯cDNA文库。利用酵母双杂交技术筛选与StCRK1和StCRK2相互作用的蛋白,经过初步筛选,共获得了 32个与... 

【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１典型的ＣＲＦＣｓ结构示意图??

图３?５ＶＣ７？Ａ：／／２ｃＤＮＡ目的片段扩增结果??Ｆｉｇ．?３?Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＳｔＣＲＫｌ／２?ｃＤＮＡ??

图４?ＳｔＣＲＫｌ／２－Ｔｌ菌落ＰＣＲ鉴定??Ｆｉｇ．?４?ｃｏｌｏｎｙ?ＰＣＲ?ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｆｏｒ?ＳｔＣＲＫｌ／２－Ｔｌ??

【参考文献】：
期刊论文
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[3]酵母双杂交系统及其应用研究进展[J]. 崔红军,魏玉清.  安徽农业科学. 2015(13)
[4]酵母双杂交技术及应用的研究进展[J]. 郑立双,李向楠,孙城涛,刘红羽,刘勋,贺明,吕文发.  中国畜牧兽医. 2013(09)
[5]植物蛋白激酶研究进展[J]. 张春宝,赵丽梅,赵洪锟,董英山.  生物技术通报. 2011(10)
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[8]转抗菌肽基因提高马铃薯对青枯病的抗性[J]. 贾士荣,屈贤铭,冯兰香,唐惕,唐益雄,刘坤,赵艳丽,白永延,蔡敏莺.  中国农业科学. 1998(03)

博士论文
[1]拟南芥类受体激酶RIPK与FERONIA共响应RALF信号的遗传与生化分析[D]. 杜长青.湖南大学 2016

硕士论文
[1]利用酵母双杂交技术筛选与马铃薯StNAC262互作的功能基因[D]. 张莉.甘肃农业大学 2018
[2]类受体蛋白激酶在水稻抽穗期的表达及作用机制研究[D]. 李颖秀.山东师范大学 2018
[3]水稻类受体蛋白激酶（Receptor-like protein kinase,RLK）响应重金属镉胁迫的功能解析[D]. 叶瑶瑶.中国计量大学 2017
[4]黄萎病菌诱导下海岛棉全长cDNA文库分析及功能基因克隆[D]. 丁泽国.河北农业大学 2014
[5]水稻类受体蛋白激酶OsRLK399的功能研究[D]. 秦正睿.吉林大学 2012



本文编号：3043171