基于抑菌挥发性物质的非洲哈茨木霉诱变菌株筛选及其机理研究
发布时间：2021-02-27 04:42
木霉可以产生具有抑菌促生活性的挥发性有机化合物（volatile organic compounds,VOCs）,在生物防治和生物医药领域有重要的应用价值。本论文以非洲哈茨木霉（Trichoderma afroharzianum）ACCC 33109为研究对象,通过原生质体紫外诱变技术提高该菌VOCs的抑菌活性,在盆栽实验水平上以qPCR技术监测不同菌株对黄瓜枯萎病病原菌（Fusarium oxysporum sp.cucumebrium）的定殖作用,采用Omnilog表型分析系统分析不同菌株的碳氮源代谢差异,并以SPME/GC-MS技术和泛基因组学分析野生株和突变株VOCs组分和相关基因。主要研究结果如下:1.野生株ACCC 33109经紫外线诱变2分钟后,共获得828个突变株,对扣法筛选获得30株VOCs抑菌率高于野生株的突变株。MU153抑菌率最高（53.9%）,较野生株提高16.7%。菌株形态特征发生改变:与野生株相比,MU153菌丝呈絮状、生长快、密度大、并有色素产生;MU239呈絮状、生长快、密度大;而MU792菌丝生长慢、密度低、菌落后期由绿色变为白色;MU153和MU7...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
微生物VOCs和真菌毒素主要代谢途径Figure1-1MainmetabolicpathwaysfortheproductionofsomeMVOCsandmycotoxins（SELIMKAetal.,2017）
基于ITS基因序列的木霉系统进化分析（邻近法）
中国农业科学院硕士学位论文第二章高产抑菌VOCs突变株筛选及其菌落形态研究15图2-2基于TEF1和RPB2基因序列的哈茨木霉系统进化分析（邻近法）Figure.2-2PhylogeneticanalysisoftheT.harzianumcomplexspeciesbasedonthecombinedTEF1andRPb2sequences(Neighbor-joiningmethod)2.3.2最佳紫外诱变时间的确定当紫外诱变微生物的致死率为75%～80%时，正突变率较高（袁成凌等，2003）。非洲哈茨木霉ACCC33109原生质体经紫外灯照射1～1.5min后致死率上升最快，3.5min后死亡率为100%（图2-3）。紫外诱变2min时的致死率为76.63%，是紫外诱变的最佳时间。经原生质体紫外诱变，优先挑取生长较快、菌落直径较大且菌丝较密的菌落，涂布于原生质体再生培养基，最终获得828个突变株，分别记为MU1828。
【参考文献】：
期刊论文
[1]红曲霉对类Camembert干酪成熟期质构和风味的影响[J]. 王童,逄晓阳,芦晶,马长路,杨宝雨,吴政,梁佳祺,张书文,吕加平. 食品科学. 2020(03)
[2]一株真菌拮抗细菌Z21的筛选与鉴定及其发酵条件优化[J]. 詹艺舒,李婕,褚秀丹,蔡志英,纪鹏伟,陈炳智,江玉姬. 微生物学通报. 2020(05)
[3]黄瓜枯萎病研究进展[J]. 杨侃侃,刘晓虹,陈宸,黄亚莉,周赓,梁志怀,陈惠明. 湖南农业科学. 2019(06)
[4]微波和紫外诱变对木霉T-YS菌株生长的影响[J]. 程开勇,毛维兴,徐秉良,刘永红,郭耀霞,陈晶,张禄,张树武. 草原与草坪. 2019(02)
[5]The effects of Trichoderma on preventing cucumber fusarium wilt and regulating cucumber physiology[J]. LI Mei,MA Guang-shu,LIAN Hua,SU Xiao-lin,TIAN Ying,HUANG Wen-kun,MEI Jie,JIANG Xi-liang. Journal of Integrative Agriculture. 2019(03)
[6]苦瓜枯萎病生防木霉的筛选鉴定及其定殖的qPCR检测[J]. 王永阳,杜佳,高克祥. 山东农业科学. 2018(08)
[7]土壤微生物宏基因组文库构建及聚酮合酶基因的筛选[J]. 杨雨蒙,徐敬国,胡伊旻,史雅凝,辛志宏. 土壤通报. 2018(04)
[8]黄瓜枯萎病研究进展[J]. 徐彦刚,贺振,李瑞,李良俊. 中国瓜菜. 2018(06)
[9]短小芽孢杆菌AR03挥发性有机物的抑菌活性及其组分分析[J]. 王静,曹建敏,陈德鑫,邱军,王晓强,冯超,王文静. 中国农业科学. 2018(10)
[10]内生解淀粉芽孢杆菌BEB17脂肽类和聚酮类化合物的抑菌活性分析[J]. 桑建伟,杨扬,陈奕鹏,蔡吉苗,陆翠梅,黄贵修. 植物病理学报. 2018(03)
博士论文
[1]水稻日本晴和93-11基因组参考序列的质量分析[D]. 邓颖.华中农业大学 2013
硕士论文
[1]两株绿僵菌紫外线诱变株的生物学特性研究[D]. 韦云.华南农业大学 2016
本文编号：3053703
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
微生物VOCs和真菌毒素主要代谢途径Figure1-1MainmetabolicpathwaysfortheproductionofsomeMVOCsandmycotoxins（SELIMKAetal.,2017）
基于ITS基因序列的木霉系统进化分析（邻近法）
中国农业科学院硕士学位论文第二章高产抑菌VOCs突变株筛选及其菌落形态研究15图2-2基于TEF1和RPB2基因序列的哈茨木霉系统进化分析（邻近法）Figure.2-2PhylogeneticanalysisoftheT.harzianumcomplexspeciesbasedonthecombinedTEF1andRPb2sequences(Neighbor-joiningmethod)2.3.2最佳紫外诱变时间的确定当紫外诱变微生物的致死率为75%～80%时，正突变率较高（袁成凌等，2003）。非洲哈茨木霉ACCC33109原生质体经紫外灯照射1～1.5min后致死率上升最快，3.5min后死亡率为100%（图2-3）。紫外诱变2min时的致死率为76.63%，是紫外诱变的最佳时间。经原生质体紫外诱变，优先挑取生长较快、菌落直径较大且菌丝较密的菌落，涂布于原生质体再生培养基，最终获得828个突变株，分别记为MU1828。
【参考文献】：
期刊论文
[1]红曲霉对类Camembert干酪成熟期质构和风味的影响[J]. 王童,逄晓阳,芦晶,马长路,杨宝雨,吴政,梁佳祺,张书文,吕加平. 食品科学. 2020(03)
[2]一株真菌拮抗细菌Z21的筛选与鉴定及其发酵条件优化[J]. 詹艺舒,李婕,褚秀丹,蔡志英,纪鹏伟,陈炳智,江玉姬. 微生物学通报. 2020(05)
[3]黄瓜枯萎病研究进展[J]. 杨侃侃,刘晓虹,陈宸,黄亚莉,周赓,梁志怀,陈惠明. 湖南农业科学. 2019(06)
[4]微波和紫外诱变对木霉T-YS菌株生长的影响[J]. 程开勇,毛维兴,徐秉良,刘永红,郭耀霞,陈晶,张禄,张树武. 草原与草坪. 2019(02)
[5]The effects of Trichoderma on preventing cucumber fusarium wilt and regulating cucumber physiology[J]. LI Mei,MA Guang-shu,LIAN Hua,SU Xiao-lin,TIAN Ying,HUANG Wen-kun,MEI Jie,JIANG Xi-liang. Journal of Integrative Agriculture. 2019(03)
[6]苦瓜枯萎病生防木霉的筛选鉴定及其定殖的qPCR检测[J]. 王永阳,杜佳,高克祥. 山东农业科学. 2018(08)
[7]土壤微生物宏基因组文库构建及聚酮合酶基因的筛选[J]. 杨雨蒙,徐敬国,胡伊旻,史雅凝,辛志宏. 土壤通报. 2018(04)
[8]黄瓜枯萎病研究进展[J]. 徐彦刚,贺振,李瑞,李良俊. 中国瓜菜. 2018(06)
[9]短小芽孢杆菌AR03挥发性有机物的抑菌活性及其组分分析[J]. 王静,曹建敏,陈德鑫,邱军,王晓强,冯超,王文静. 中国农业科学. 2018(10)
[10]内生解淀粉芽孢杆菌BEB17脂肽类和聚酮类化合物的抑菌活性分析[J]. 桑建伟,杨扬,陈奕鹏,蔡吉苗,陆翠梅,黄贵修. 植物病理学报. 2018(03)
博士论文
[1]水稻日本晴和93-11基因组参考序列的质量分析[D]. 邓颖.华中农业大学 2013
硕士论文
[1]两株绿僵菌紫外线诱变株的生物学特性研究[D]. 韦云.华南农业大学 2016
本文编号：3053703
本文链接：https://www.wllwen.com/projectlw/swxlw/3053703.html
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