人脐带间充质干细胞条件培养基联合白藜芦醇对人滋养层细胞的作用

发布时间：2021-03-02 17:57

　　目的:探讨人脐带间充质干细胞条件培养基联合白藜芦醇对人绒毛膜外滋养层细胞凋亡的影响。方法:通过CCK8细胞活力检测试剂盒测定白藜芦醇及其与人脐带间充质干细胞条件培养基共同处理人绒毛膜外滋养层细胞HTR8后对细胞增殖及活性的影响;细胞迁移试验检测白藜芦醇和人脐带间充质干细胞条件培养基对细胞迁移能力的影响;显微镜观察细胞形态,并用流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化;Western blot检测白藜芦醇和人脐带间充质干细胞条件培养基对细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2以及迁移相关蛋白MMP-9表达的影响。结果:白藜芦醇能够抑制HTR8细胞增殖,抑制细胞迁移及MMP-9蛋白的表达,改变Bax和Bcl-2蛋白表达诱导细胞凋亡的作用。而人脐带间充质干细胞条件培养基能够逆转白藜芦醇对细胞的抑制作用。结论:人脐带间充质干细胞条件培养基能够通过调控Bax、Bcl-2、MMP-9的蛋白表达逆转白藜芦醇对人绒毛膜外滋养层细胞的抑制作用。人脐带间充质干细胞条件培养基可作为潜在的治疗人绒毛膜外滋养层细胞功能障碍的临床手段,孕妇需要小心使用白藜芦醇。 

【文章来源】：现代生物医学进展. 2020,20(07)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

人脐带来源的间充质干细胞的流式鉴定

为了检测白藜芦醇对人绒毛膜外滋养层细胞的影响，我们首先通过CCK8细胞活力实验确定白藜芦醇的使用剂量。结果显示，与空白对照组相比，白藜芦醇处理能够显著抑制人绒毛膜外滋养层细胞的细胞活力，并且其抑制效应呈剂量依赖性，随着白藜芦醇浓度的升高，抑制效果逐渐增强，25μM为白藜芦醇的抑制中浓度（IC50）（见图2）。接着，我们采用CCK8细胞活力实验探究联合使用人脐带间充质干细胞的条件培养基和白藜芦醇对人绒毛膜外滋养层细胞活力的影响，结果显示，随着人脐带间充质干细胞的条件培养基的浓度逐渐升高（40%、60%、80%），白藜芦醇对于人绒毛膜外滋养层细胞活力的抑制作用逐渐减弱（见图3）。2.3 人脐带间充质干细胞的条件培养基能够挽救白藜芦醇对人绒毛膜外滋养层细胞迁移的抑制作用

人绒毛膜外滋养层细胞的迁移能力对于其侵入子宫蜕膜螺旋小动脉并介导动脉的重塑过程至关重要[18,19]，因此，我们研究了白藜芦醇以及人脐带间充质干细胞条件性培养基对于人绒毛膜外滋养层细胞迁移能力的影响。结果显示，相比于对照组细胞，白藜芦醇处理组细胞的迁移能力明显受到抑制，当加入不同浓度（40%、60%、80%）的人脐带间充质干细胞条件性培养基后，相比于白藜芦醇处理组细胞，随着人脐带间充质干细胞条件性培养基浓度的升高，人绒毛膜外滋养层细胞的迁移能力逐渐恢复（见图4）。图4 人脐带间充质干细胞的条件培养基和白藜芦醇对人绒毛膜外滋养层细胞迁移的影响


本文编号：3059689