细菌纤维素合成菌纳塔葡糖酸醋杆菌遗传操作方法的建立

发布时间：2021-03-14 06:23

　　[目的]建立纳塔葡糖酸醋杆菌遗传操作系统,为采用基因工程方法改造该类菌株,提高纤维素产量,提升纤维素品质提供参考依据。[方法]通过优化培养基确定菌株电转化感受态制备条件,采用质粒或者线性化片段在不同电压下进行转化,优化最佳转化条件。[结果]采用添加了1%纤维素酶的C2培养基进行1次摇瓶转接,可有效制备纳塔葡糖酸醋杆菌电转化感受态;采用携带同源臂及Kan抗性基因的环状质粒或者线性化片段均实现了对纳塔葡糖酸醋杆菌葡萄糖脱氢酶基因（GDH）的同源双交换基因敲除;GDH基因的敲除降低了工程菌株发酵产纤维素膜过程的葡萄糖酸产生,提高了细菌纤维素的最终产量及品质。[结论]成功建立了纳塔葡糖酸醋杆菌遗传转化方法和基因敲除方法。 

【文章来源】：安徽农业科学. 2020,48(11)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

转化子可能存在的基因型

HEC-004菌株在7#和C2培养基中的生长曲线

pBAC03-GDHKⅡ质粒图谱

【参考文献】：
期刊论文
[1]不同供氧方式对木醋杆菌培养中生物量的影响[J]. 向东,王锡彬,钟春燕.  现代食品科技. 2011(08)
[2]木醋杆菌菌株的特性研究[J]. 牛成,吴周新,王锡彬,赵振东,冯玉红.  海南师范大学学报(自然科学版). 2009(01)
[3]有机酸在合成培养基中对木醋杆菌合成纤维素的影响[J]. 王志国,韦燕来,韦茂山,王锡彬,向东.  食品科学. 2008(05)

硕士论文
[1]水溶性多糖对生物合成细菌纤维素的影响[D]. 吴敏.海南大学 2011



本文编号：3081649