CRISPR/Cas9技术编辑OsRhoGDI2基因导致水稻半矮化
发布时间：2021-03-24 20:47
OsRhoGDI2是通过酵母双杂交从水稻幼穗中分离的一个与Rho蛋白家族成员OsRacD相互作用蛋白的编码基因,但功能尚不明确。本研究利用CRISPR/Cas9技术创制水稻OsRhoGDI2基因敲除突变体。检测结果表明,转基因水稻T0代获得2种纯合突变体,T1代获得8种纯合突变体。序列分析显示,在敲除水稻中,该基因的编辑靶点附近发生了碱基的替换或缺失,预期生成丧失RhoGDI保守结构域的截短蛋白。表型比对分析发现,敲除水稻与对照相比,株高显著降低,统计学分析结果显示,敲除水稻株高降低源于第Ⅱ和第Ⅲ茎节的缩短,提示OsRhoGDI2基因可能与水稻株高控制相关。
【文章来源】：生物工程学报. 2020,36(04)北大核心CSCD
【文章页数】：9 页
【部分图文】：
OsRhoGDI2基因结构及编辑靶点的位置
pW-T-OsRhoGDI2表达载体的构建
图2 pW-T-OsRhoGDI2表达载体的构建将上述PCR产物测序，并进行序列分析。结果显示(表2),T0代获得杂合株系6个(占54.5%)、双等位突变株系2个(占18.2%)、纯合株系2个(占18.2%)、未被编辑株系1个(占9.1%)。T0代11个株系与野生型进行编辑靶点序列比对，发现6个杂合株系中有2个(#1、#5)在靶位点2处发生突变，4个(#2、#3、#8、#11)在靶位点1处发生突变；2个双等位突变株系(#7、#9)均在靶位点1处发生突变；2个纯合株系(#6、#10)均在靶位点1处发生突变(图4)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]利用CRISPR/Cas9技术编辑水稻ROP基因OsRac5[J]. 王美娜,彭静静,王凯婕,安文静,刘亚菲,李珂嘉,梁卫红. 中国生物化学与分子生物学报. 2018(12)
[2]利用CRISPR/CAS9技术编辑水稻香味基因Badh2[J]. 邵高能,谢黎虹,焦桂爱,魏祥进,圣忠华,唐绍清,胡培松. 中国水稻科学. 2017(02)
[3]Genetic Analysis and Fine Mapping of a Novel Semidominant Dwarfing Gene LB4D in Rice[J]. Fei Liang~(1,2+),Xiaoyun Xin~(1,2+),Zejun Hu~(1,2),Jiandi Xu~3,Gang Wei~1,Xiaoyin Qian~1, Jinshui Yang~1,Haohua He~(2*) and Xiaojin Luo~(1*) 1 State Key Laboratory of Genetic Engineering,Institute of Genetics,School of Life Sciences,Fudan University,Shanghai 200433,China 2Key Laboratory of Crop Physiology,Ecology and Genetic Breeding,Ministry of Education,Jiangxi Agricultural University,Nanchang 330045,China 3 Institute of Rice Research,Shandong Academy of Agricultural Sciences,Jining 272100,China. Journal of Integrative Plant Biology. 2011(04)
[4]水稻OsRhoGDI2蛋白生物信息学分析及亚细胞定位研究[J]. 彭威风,梁卫红. 生物技术通报. 2010(05)
[5]两种水稻GDP解离抑制蛋白基因的分离及特征分析[J]. 梁卫红,唐朝荣,吴乃虎. 中国生物化学与分子生物学报. 2004(06)
本文编号：3098369
【文章来源】：生物工程学报. 2020,36(04)北大核心CSCD
【文章页数】：9 页
【部分图文】：
OsRhoGDI2基因结构及编辑靶点的位置
pW-T-OsRhoGDI2表达载体的构建
图2 pW-T-OsRhoGDI2表达载体的构建将上述PCR产物测序，并进行序列分析。结果显示(表2),T0代获得杂合株系6个(占54.5%)、双等位突变株系2个(占18.2%)、纯合株系2个(占18.2%)、未被编辑株系1个(占9.1%)。T0代11个株系与野生型进行编辑靶点序列比对，发现6个杂合株系中有2个(#1、#5)在靶位点2处发生突变，4个(#2、#3、#8、#11)在靶位点1处发生突变；2个双等位突变株系(#7、#9)均在靶位点1处发生突变；2个纯合株系(#6、#10)均在靶位点1处发生突变(图4)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]利用CRISPR/Cas9技术编辑水稻ROP基因OsRac5[J]. 王美娜,彭静静,王凯婕,安文静,刘亚菲,李珂嘉,梁卫红. 中国生物化学与分子生物学报. 2018(12)
[2]利用CRISPR/CAS9技术编辑水稻香味基因Badh2[J]. 邵高能,谢黎虹,焦桂爱,魏祥进,圣忠华,唐绍清,胡培松. 中国水稻科学. 2017(02)
[3]Genetic Analysis and Fine Mapping of a Novel Semidominant Dwarfing Gene LB4D in Rice[J]. Fei Liang~(1,2+),Xiaoyun Xin~(1,2+),Zejun Hu~(1,2),Jiandi Xu~3,Gang Wei~1,Xiaoyin Qian~1, Jinshui Yang~1,Haohua He~(2*) and Xiaojin Luo~(1*) 1 State Key Laboratory of Genetic Engineering,Institute of Genetics,School of Life Sciences,Fudan University,Shanghai 200433,China 2Key Laboratory of Crop Physiology,Ecology and Genetic Breeding,Ministry of Education,Jiangxi Agricultural University,Nanchang 330045,China 3 Institute of Rice Research,Shandong Academy of Agricultural Sciences,Jining 272100,China. Journal of Integrative Plant Biology. 2011(04)
[4]水稻OsRhoGDI2蛋白生物信息学分析及亚细胞定位研究[J]. 彭威风,梁卫红. 生物技术通报. 2010(05)
[5]两种水稻GDP解离抑制蛋白基因的分离及特征分析[J]. 梁卫红,唐朝荣,吴乃虎. 中国生物化学与分子生物学报. 2004(06)
本文编号：3098369
本文链接：https://www.wllwen.com/projectlw/swxlw/3098369.html
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