杨树ERF转录因子RAP2L15基因RNAi植物表达载体的构建及遗传转化

发布时间：2021-04-06 15:34

　　ERF （ethylene response factor）转录因子是植物最大的特异性转录因子基因家族之一,在植物抗逆及生长发育方面起着重要作用。本研究从‘84K杨’（Populus abla×P.glandulosa）中克隆出ERF转录因子基因RAP2L15的全长cDNA序列,对其编码的氨基酸序列进行了同源性比对分析,并利用生物信息学对RAP2L15蛋白进行理化性质分析及结构预测。结果表明, RAP2L15编码的蛋白质序列含有155个氨基酸,属于不稳定的亲水蛋白,与杨树耐盐胁迫基因ERF38具有相似结构。同源性序列比对分析表明RAP2L15与拟南芥ERF转录因子基因AtERF016具有较高同源性,推测该基因可能与植物耐盐胁迫功能有关。构建RAP2L15-RNAi抑制表达载体并利用农杆菌介导叶盘转化法进行杨树遗传转化,获得转基因杨树株系5个。本研究为进一步探索RAP2L15转录因子基因在杨树生长发育及抗盐胁迫方面发挥的功能提供理论及材料基础。 

【文章来源】：植物生理学报. 2020,56(12)北大核心CSCD

【文章页数】：11 页

【部分图文】：

PCR鉴定结果

卡那霉素抗性株系继代3代后,选择40 d苗期的转基因‘84K杨’和野生对照组‘84K杨’的第3～6片叶进行DNA提取并进行PCR扩增。通过凝胶琼脂糖电泳分析,对照组野生型‘84K杨’无目的条带扩增,RAP-2L15转基因组在500 bp处条带清晰,表明成功获得ERF/RAP2L15-RNAi转基因杨树株系5个(图12)。图1 0 重组表达载体p ART27+p KANNIBAL-RAP2L15酶切电泳图

0 重组表达载体p ART27+p KANNIBAL-RAP2L15酶切电泳图

【参考文献】：
期刊论文
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[2]拟南芥AtPAP1基因植物表达载体构建及在烟草中遗传转化分析[J]. 刘轶,郑唐春,代丽娟,刘彩霞,王庆娜,曲冠证.  植物生理学报. 2017(07)
[3]非生物胁迫相关NAC转录因子的结构及功能[J]. 李小兰,胡玉鑫,杨星,于晓东,李秋莉.  植物生理学报. 2013(10)



本文编号：3121682