大豆隐花色素基因转化马铃薯及功能分析研究
发布时间：2021-04-08 04:08
隐花色素是一类蓝光受体,在植物体内主要负责感受外界光环境,具有多种生物学功能,在植物生长和发育中发挥着重要调控作用,如对逆境胁迫的响应、光形态建成、向性生长、气孔开闭、开花时间、根系生长、避荫反应等。隐花色素相关基因作为分子改良作物农艺性状及抗逆性等重要性状的基因资源,开发潜力巨大。目前对隐花色素基因功能研究仅集中在拟南芥等少数植物中,在马铃薯等作物及经济植物中的研究与利用非常有限。因此利用基因工程技术将隐花色素相关基因转化马铃薯,为创制马铃薯优异种质材料提供重要的研究手段。本研究依托宁夏农业生物技术重点实验室已建立的马铃薯高效遗传转化体系,将大豆隐花色素基因转化马铃薯,通过分子鉴定和表型鉴定,筛选出对光周期变化反应更敏感与抗旱性、耐盐性增强的转基因株系,为初步揭示隐花色素基因转化马铃薯后能够表达其功能,同时可以表现出对光反应更敏感和较强的抗旱性、耐盐性提供理论基础。主要研究结果如下:1.利用农杆菌介导法,以马铃薯品种“大西洋”为受体,将大豆隐花色素5个相关基因（pearly gate 1 04-Glyma.10G180600、pearlygate1 04-Glyma.04G10150...
【文章来源】：宁夏大学宁夏回族自治区 211工程院校
【文章页数】：57 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１马铃薯转基因株系的转化过程??
４?５??图２－２大豆隐花色素相关基因ＰＣＲ产物电泳图??注?１：?９９００；?２：?０６００：?３：?３２００：?４：?５７００：?５．１５００??—期?〇ｂｐ??１２?３??图２－３部分转基因株系ＲＴ－ＰＣＲ检测结果及内参基因扩增分子生物学鉴定??注：１：ＲＮＡ提取；２．内参基因；３：部分转化３２００基因阳性株系??２．４讨论??农杆菌介导的植物基因转化方法具有转肓周期短、拷贝数低、重复性好、基因沉默现象少??及能转化较大片段等独特优点，受到了人们的极大关注。目前马铃薯转化中包括两种转化受体体??系，一种是以叶片和茎段为外植体的愈伤组织再生系统，另一种是外植体细胞直接分化出不定芽??获得再生植株的直接分化再生系统。两种转化受体体系表明在马铃薯的遗传转化过程中外植体选??择的重要性，相比较而言试管薯比起叶片和茎段受基因型局限更小优点更多。闫建俊【９０】等研究表??明以叶片为外植体的转化较以茎段为外植体的转化时间延长了?５－７天影响了再生速率，司怀军等［９１］??首次通过利用微型薯为受体材料进行遗传转化，建立了?“鄂薯３号”和“甘薯２号”的快速、简单??和高效的遗传转化系统。??本研究以前期建立的马铃薯试管薯转化体系为基础，以微型试管薯为外植体，进行了马铃薯??遗传转化研究，可以缩短转化周期。司怀军［９１】等认为马铃薯遗传转化最重要的是农杆菌的浓度、??生长状况和浸染的时间
硕士学位论文?第三章转基因株系表型及抗表３－１不同光照处理下转基因株系叶面积长日照处理?短日照处理???长Ｘ宽?纸模重量?实际面积?长Ｘ宽（ｃｍ２）纸模重量（ｇ）?实际面（ｃｍ２）?（ｇ）?（ｃｍ２）?（ｃｍ２?１．９８?０．０１?１．０３?０．０７?０．００１?０．１５??－３?５．３３?０．０２?４．４４?０．４６?０．００３?０．２９??－４?３．７９?０．０１?３．９６?０．８４?０．００６?０．３８??－７?３．３８?０．０２?１．９１?０．５６?０．００３?０．４６??－２２?３．４０?０．０２?４．０２?０．４４?０．００４?０．６１??－２３?４．０２?０．０３?３．４３?０．２０?０．００２?０．３２??－２６?４．７１?００２?４１５?０３６?０．００３?０．４８??
【参考文献】：
期刊论文
[1]转化转录因子HaNAC1基因提高马铃薯的抗逆性[J]. 张丽,程永芳,巩檑,甘晓燕,聂峰杰,陈虞超,石磊,宋玉霞. 分子植物育种. 2018(14)
[2]CRISPR/Cas9介导靶向敲除拟南芥GGB基因突变体的鉴定[J]. 雷建峰,徐新霞,李月,代培红,刘超,刘晓东. 西北植物学报. 2016(05)
[3]马铃薯种质资源遗传多样性分析及杂交子代SRAP鉴定[J]. 程永芳,张明慧,巩檑,杨琴,宋玉霞. 分子植物育种. 2015(08)
[4]组成型表达S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因提高转基因马铃薯抗旱耐盐碱性研究[J]. 陈秀华,王冬冬,李先平,李倩,朱延明,陈勤. 东北农业大学学报. 2013(10)
[5]根癌农杆菌介导的马铃薯遗传转化的一些影响因素[J]. 闫建俊,白云凤,张忠梁,冯瑞云,张耀,张维锋. 山西农业科学. 2013(06)
[6]利用修饰光敏色素信号途径进行作物改良的可行性[J]. 詹克慧,李志勇,侯佩,习雨琳,肖阳,孟凡华,杨建平. 中国农业科学. 2012(16)
[7]马铃薯Desiree遗传转化体系的优化及转基因植株的获得[J]. 辛翠花,郭江波,黄三文,屈冬玉. 中国蔬菜. 2011(06)
[8]马铃薯叶面积速测方法的研讨[J]. 赵春燕,赵春晓,方子森,魏镇泽,王玲芳,郭亮. 湖南农业科学. 2010(13)
[9]马铃薯低温启动子CIP的克隆及其功能鉴定[J]. 成善汉,谢从华,柳俊,吴艳阁. 贵州科学. 2008(01)
[10]反义PPO基因对马铃薯块茎褐化的影响[J]. 王清,黄惠英,马文芳,王蒂. 作物学报. 2007(11)
博士论文
[1]蓝光诱导拟南芥隐花色素CRY2二聚体的形成及调控机制[D]. 杨亮.吉林大学 2016
[2]应用甜菜碱醛脱氢酶基因工程提高马铃薯抗逆性的研究[D]. 张宁.甘肃农业大学 2004
硕士论文
[1]两种基因定点敲除技术TALEN和CRISPR在拟南芥中的应用[D]. 李苗苗.浙江大学 2014
[2]苹果隐花色素基因MdCRY1和MdCRY2的克隆及功能鉴定[D]. 毛柯.山东农业大学 2012
[3]拟南芥PRRs基因家族在红光与蓝光信号转导中的作用初探[D]. 向芬.湖南大学 2011
[4]农杆菌介导BADH基因转化马铃薯的耐盐研究[D]. 张正国.东北农业大学 2011
[5]农杆菌介导的P5CS基因转化东农303马铃薯的研究[D]. 高亚迪.东北林业大学 2010
[6]ODREB2B基因转化马铃薯及转BcBCP1基因马铃薯后代鉴定[D]. 崔少彬.东北农业大学 2009
[7]农杆菌介导的BcBCP1基因转化马铃薯抗旱性研究[D]. 姜丽丽.东北农业大学 2008
[8]马铃薯再生体系的建立及HAL1基因遗传转化研究[D]. 罗源.西北农林科技大学 2007
[9]Bt杀虫基因双价植物表达载体的构建及抗虫马铃薯植株的获得[D]. 蒋红玲.中国农业科学院 2001
[10]农杆菌介导的mtlD基因转化马铃薯的研究[D]. 巩慧玲.甘肃农业大学 2001
本文编号：3124821
【文章来源】：宁夏大学宁夏回族自治区 211工程院校
【文章页数】：57 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１马铃薯转基因株系的转化过程??
４?５??图２－２大豆隐花色素相关基因ＰＣＲ产物电泳图??注?１：?９９００；?２：?０６００：?３：?３２００：?４：?５７００：?５．１５００??—期?〇ｂｐ??１２?３??图２－３部分转基因株系ＲＴ－ＰＣＲ检测结果及内参基因扩增分子生物学鉴定??注：１：ＲＮＡ提取；２．内参基因；３：部分转化３２００基因阳性株系??２．４讨论??农杆菌介导的植物基因转化方法具有转肓周期短、拷贝数低、重复性好、基因沉默现象少??及能转化较大片段等独特优点，受到了人们的极大关注。目前马铃薯转化中包括两种转化受体体??系，一种是以叶片和茎段为外植体的愈伤组织再生系统，另一种是外植体细胞直接分化出不定芽??获得再生植株的直接分化再生系统。两种转化受体体系表明在马铃薯的遗传转化过程中外植体选??择的重要性，相比较而言试管薯比起叶片和茎段受基因型局限更小优点更多。闫建俊【９０】等研究表??明以叶片为外植体的转化较以茎段为外植体的转化时间延长了?５－７天影响了再生速率，司怀军等［９１］??首次通过利用微型薯为受体材料进行遗传转化，建立了?“鄂薯３号”和“甘薯２号”的快速、简单??和高效的遗传转化系统。??本研究以前期建立的马铃薯试管薯转化体系为基础，以微型试管薯为外植体，进行了马铃薯??遗传转化研究，可以缩短转化周期。司怀军［９１】等认为马铃薯遗传转化最重要的是农杆菌的浓度、??生长状况和浸染的时间
硕士学位论文?第三章转基因株系表型及抗表３－１不同光照处理下转基因株系叶面积长日照处理?短日照处理???长Ｘ宽?纸模重量?实际面积?长Ｘ宽（ｃｍ２）纸模重量（ｇ）?实际面（ｃｍ２）?（ｇ）?（ｃｍ２）?（ｃｍ２?１．９８?０．０１?１．０３?０．０７?０．００１?０．１５??－３?５．３３?０．０２?４．４４?０．４６?０．００３?０．２９??－４?３．７９?０．０１?３．９６?０．８４?０．００６?０．３８??－７?３．３８?０．０２?１．９１?０．５６?０．００３?０．４６??－２２?３．４０?０．０２?４．０２?０．４４?０．００４?０．６１??－２３?４．０２?０．０３?３．４３?０．２０?０．００２?０．３２??－２６?４．７１?００２?４１５?０３６?０．００３?０．４８??
【参考文献】：
期刊论文
[1]转化转录因子HaNAC1基因提高马铃薯的抗逆性[J]. 张丽,程永芳,巩檑,甘晓燕,聂峰杰,陈虞超,石磊,宋玉霞. 分子植物育种. 2018(14)
[2]CRISPR/Cas9介导靶向敲除拟南芥GGB基因突变体的鉴定[J]. 雷建峰,徐新霞,李月,代培红,刘超,刘晓东. 西北植物学报. 2016(05)
[3]马铃薯种质资源遗传多样性分析及杂交子代SRAP鉴定[J]. 程永芳,张明慧,巩檑,杨琴,宋玉霞. 分子植物育种. 2015(08)
[4]组成型表达S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因提高转基因马铃薯抗旱耐盐碱性研究[J]. 陈秀华,王冬冬,李先平,李倩,朱延明,陈勤. 东北农业大学学报. 2013(10)
[5]根癌农杆菌介导的马铃薯遗传转化的一些影响因素[J]. 闫建俊,白云凤,张忠梁,冯瑞云,张耀,张维锋. 山西农业科学. 2013(06)
[6]利用修饰光敏色素信号途径进行作物改良的可行性[J]. 詹克慧,李志勇,侯佩,习雨琳,肖阳,孟凡华,杨建平. 中国农业科学. 2012(16)
[7]马铃薯Desiree遗传转化体系的优化及转基因植株的获得[J]. 辛翠花,郭江波,黄三文,屈冬玉. 中国蔬菜. 2011(06)
[8]马铃薯叶面积速测方法的研讨[J]. 赵春燕,赵春晓,方子森,魏镇泽,王玲芳,郭亮. 湖南农业科学. 2010(13)
[9]马铃薯低温启动子CIP的克隆及其功能鉴定[J]. 成善汉,谢从华,柳俊,吴艳阁. 贵州科学. 2008(01)
[10]反义PPO基因对马铃薯块茎褐化的影响[J]. 王清,黄惠英,马文芳,王蒂. 作物学报. 2007(11)
博士论文
[1]蓝光诱导拟南芥隐花色素CRY2二聚体的形成及调控机制[D]. 杨亮.吉林大学 2016
[2]应用甜菜碱醛脱氢酶基因工程提高马铃薯抗逆性的研究[D]. 张宁.甘肃农业大学 2004
硕士论文
[1]两种基因定点敲除技术TALEN和CRISPR在拟南芥中的应用[D]. 李苗苗.浙江大学 2014
[2]苹果隐花色素基因MdCRY1和MdCRY2的克隆及功能鉴定[D]. 毛柯.山东农业大学 2012
[3]拟南芥PRRs基因家族在红光与蓝光信号转导中的作用初探[D]. 向芬.湖南大学 2011
[4]农杆菌介导BADH基因转化马铃薯的耐盐研究[D]. 张正国.东北农业大学 2011
[5]农杆菌介导的P5CS基因转化东农303马铃薯的研究[D]. 高亚迪.东北林业大学 2010
[6]ODREB2B基因转化马铃薯及转BcBCP1基因马铃薯后代鉴定[D]. 崔少彬.东北农业大学 2009
[7]农杆菌介导的BcBCP1基因转化马铃薯抗旱性研究[D]. 姜丽丽.东北农业大学 2008
[8]马铃薯再生体系的建立及HAL1基因遗传转化研究[D]. 罗源.西北农林科技大学 2007
[9]Bt杀虫基因双价植物表达载体的构建及抗虫马铃薯植株的获得[D]. 蒋红玲.中国农业科学院 2001
[10]农杆菌介导的mtlD基因转化马铃薯的研究[D]. 巩慧玲.甘肃农业大学 2001
本文编号：3124821
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