一株菌的聚酮合成酶基因验证及其鉴定

发布时间：2021-04-14 23:44

　　采用土壤微生物稀释平板法分离技术,从烟草根际土壤分离到一株活体纯培养物,将其编号为ZMD1。ZMD1菌株与2种病原的拮抗试验均显示出一定的抗菌活性;通过聚酮合成酶（PKS）基因的兼并引物对ZMD1进行了克隆验证,测序结果与其他物种的PKS基因序列具有较高的相似性,故将ZMD1初步定性为产聚酮合成酶活性菌株。综合ZMD1菌株的一般形态特征、生理生化特征和菌株的16S rDNA保守序列特征分析,初步将ZMD1确定为链霉菌属（Streptomyces）菌株,暂命名为Streptomyces sp.ZMD1。ZMD1可作为烟草病害生防菌剂、土壤保育菌剂和专用菌肥等开发的良好备用材料。 

【文章来源】：安徽农业科学. 2020,48(07)

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【部分图文】：

ZMD1的N-J系统发育树

采用纸片法考察ZMD1菌株对金黄色葡萄球菌和烟草黑胫病病原的抗菌活性。试验结果表明,ZMD1菌株对金黄色葡萄球菌和烟草黑胫病病原具有明显的抑菌圈(图1a、b),说明其存在拮抗病原菌的活性物质。故初步推断ZMD1可能具有聚酮合成酶活性。2.2 ZMD1的PKS基因克隆验证

以ZMD1菌株的基因组DNA为模板,分别采用PKS-Ⅰ和PKS-Ⅱ的兼并引物进行PKS基因的PCR扩增,结果显示,PKS-Ⅰ(图2a)和PKS-Ⅱ(图2b)均能扩增出清晰的目标产物条带。将PCR产物进行克隆测序,测序结果与GenBank中已知PKS序列进行比对,测序获得的PKS-Ⅰ和PKS-Ⅱ与其他种PKS序列的相似度都超过95%,故确定ZMD1菌株含有PKS基因功能。2.3 ZMD1菌株的鉴定


本文编号：3138237