基质重塑相关基因7调控骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的机制研究

发布时间：2021-04-16 05:22

　　目的:骨髓间充质干细胞（BMSCs）是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的干细胞,在维持正常造血与骨生成中发挥重要的作用,其分化潜能的改变通常会引起疾病的发生。本实验主要探讨基质重塑相关基因7（Mxra7）调控骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的机制。方法:（1）使用MicroCT对野生型（WT）和Mxra7敲除（Mxra7-/-）小鼠（8周和9个月大,雄性）的股骨进行扫描分析和三维重建。（2）取WT和Mxra7-/-小鼠的股骨进行石蜡包埋、切片和HE染色,比较生长板和干骺端松质骨骨小梁的变化。（3）对WT和Mxra7-/-r小鼠股骨石蜡切片进行TRAP染色比较破骨细胞的变化。（4）将WT和Mxra7-/-小鼠股骨包埋进行冰冻切片,免疫荧光对成骨细胞特异性标志（Osteocalcin）进行染色,观察成骨细胞的变化。（5）BMSCs是成骨细胞的祖细胞,在骨形成的调控方面发挥重要作用,我们体外分离并培养WT和Mxra7-/-小鼠的BMSCs来进一步研究MXRA7在骨形成中的作用机制。（6）体外诱导WT小鼠来源的BMSCs向成骨细胞或脂肪细胞分化,同时检测Mxra 7信使RNA（mRNA）和蛋白... 

【文章来源】：苏州大学江苏省

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１：?ＷＴ和Ｍｘｒａ７－Ａ小鼠（雄性，８周）股骨ｍｉｃｒＣＴ分析结果??（Ａ?）?ＷＴ和Ｍｘｒｃ／７－－小鼠（８周，雄性）股骨干骺端Ｍｉｃｒｏ?ＣＴ扫描及三维重建图；??＊＜

３结果?基质重塑相关基因７调控骨髄间充质干细胞向成骨细胞分化的机制研宄??Ａ?ＷＴ，?９?ｍｏｎｔｈｓ?ｇ??＿２〇１?ｔ，?…Ｉ?２０－，?３－｜?Ｈ—，?°＇１０ｌ??＿?ｉ．?｜ｃ?■??ｏ．ｏ－Ｕ?ＵＪＢＢＬ?０Ｕ—〇Ｕ?ｏｏｏ－Ｕ???／Ｗｘｒａ７－／－，?９?ｍｏｎｔｈｓ?２５?＾??２．０－?〇５｜?＇?１?口?ＷＴ．９?ｍｏｎｔｈｓ??Ｉ－??Ｉ１＇０＇?■?■??：：Ｌ１Ｍ?：：１ＵＭ??图２：?ＷＴ和Ｍｔｙ／７－ｚ－小鼠（雄性，９月）股骨ｍｉｃｒＣＴ分析结果??（Ａ?）?ＷＴ和ＭｘｒａＶ－小鼠（９月，雄性）股骨干骺端Ｍｉｃｒｏ?ＣＴ扫描及三维重建图；??（Ｂ?）?ＷＴ和Ｍｘｒａ７－－小鼠股骨长度及干骺端松质骨的形态学参数分析。＊?Ｐ＜〇．〇５；??＊＊＊?Ｐ０．００１代表Ｍｘｒａ７－Ａ小鼠ｖｓ?ＷＴ小鼠；每组各六只，实验重复三次。??Ａ?Ｂ??ｉ—ＨＬｊ?１００＊１?ｎｓ?０〇?■“?．?ｉ?＊?，??Ｉｒｉ?Ａ?ａＷＴ＇８ｗｅｅｋｓ?＇?＂ｌ＾ｒ?口?ＷＴ．９?＿ｈｓ??＂广．■?？?Ｍ．?Ｍ?幽■敝ａ７Ｖ＇８ｗｅｅｋｓ?＂广．麵－处?函■?Ｍｘｒａ７—９ｍｏｎｔｈｓ??｜?｜?４０．?｜?■?｜Ｍ．?ｌ??■ｆｆｉ，?■?ＵＫ．?■??ａ。！］?〇Ｕ——〇〇ＪＪ——ｏｉｌ——Ｌｒ＾Ｂ－??图３：?ＷＴ和Ｍｃｒａ７－Ａ小鼠（雄性，８周或９月）股骨皮质骨的分析结果??（Ａ）?ＷＴ和Ｍｘｒａ７－７－小鼠（８周，雄性）皮质骨的形态学参数分析；（Ｂ?）?ＷＴ和??Ｍｍ７７－Ａ小鼠（９月，雄性）皮质骨的形态学参数分析。＊?Ｐ＜０．０５代表Ｍｍ７７－Ａ小鼠??

＊＊＊?Ｐ０．００１代表Ｍｘｒａ７－Ａ小鼠ｖｓ?ＷＴ小鼠；每组各六只，实验重复三次。??Ａ?Ｂ??ｉ—ＨＬｊ?１００＊１?ｎｓ?０〇?■“?．?ｉ?＊?，??Ｉｒｉ?Ａ?ａＷＴ＇８ｗｅｅｋｓ?＇?＂ｌ＾ｒ?口?ＷＴ．９?＿ｈｓ??＂广．■?？?Ｍ．?Ｍ?幽■敝ａ７Ｖ＇８ｗｅｅｋｓ?＂广．麵－处?函■?Ｍｘｒａ７—９ｍｏｎｔｈｓ??｜?｜?４０．?｜?■?｜Ｍ．?ｌ??■ｆｆｉ，?■?ＵＫ．?■??ａ。！］?〇Ｕ——〇〇ＪＪ——ｏｉｌ——Ｌｒ＾Ｂ－??图３：?ＷＴ和Ｍｃｒａ７－Ａ小鼠（雄性，８周或９月）股骨皮质骨的分析结果??（Ａ）?ＷＴ和Ｍｘｒａ７－７－小鼠（８周，雄性）皮质骨的形态学参数分析；（Ｂ?）?ＷＴ和??Ｍｍ７７－Ａ小鼠（９月，雄性）皮质骨的形态学参数分析。＊?Ｐ＜０．０５代表Ｍｍ７７－Ａ小鼠??ｖｓＷＴ小鼠；每组各六只，实验重复三次。??小鼠股骨石蜡切片ＨＥ染色显示Ｍｘｍ７－小鼠股骨干骺端骨小梁数量减少（图??４Ａ）。生长板软骨内骨化是长骨纵向生长的主要机制［４３］，我们分析股骨生长板的??厚度发现，Ｍｘｒａ７ｖ？小鼠与ＷＴ小鼠相比生长板厚度减少２３°／。（图４?Ｂ、Ｃ），这一??结果也印证了?ＭｘｒａＴ＂７？小鼠股骨长度相比ＷＴ小鼠缩短。??１６??


本文编号：3140823