一种适用于绿僵菌克隆筛选的DNA批量快速提取方法

发布时间：2021-05-14 13:07

　　基因组DNA的提取是最基本的分子生物学实验技术,介绍了一种适用于绿僵菌克隆筛选的DNA批量快速提取方法.研究结果表明:使用改良的察氏琼脂培养基（CDA）代替常用的土豆葡萄糖琼脂（PDA）培养绿僵菌,以钢珠振打破碎菌丝,配以简化的酚氯仿抽提操作,可以高效地提取高质量的真菌基因组DNA.本方法中,CDA菌落生长需2～3 d,双样品提取耗时约15 min,每个菌落可获得DNA数百纳克,片段长度在10 kb左右,电泳条带清晰可见. 

【文章来源】：信阳师范学院学报(自然科学版). 2020,33(01)北大核心

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
0 引言
1 材料与方法
    1.1 实验材料
    1.2 试剂
    1.3 实验仪器
    1.4 真菌菌丝破壁方法
        1.4.1 手动研磨法
        1.4.2 机械珠磨法
    1.5 DNA纯化方法
        1.5.1 未纯化对照
        1.5.2 简易纯化法
        1.5.3 完整纯化法
    1.6 DNA提取质量检验
        1.6.1 分光光度检测
        1.6.2 凝胶电泳检测
    1.7 PCR扩增验证
2 结果与分析
    2.1 机械珠磨法破壁效果的考察
    2.2 机械珠磨法适用真菌及培养基的考察
    2.3 简化基因组DNA纯化步骤的效果验证
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]植物根底害虫治理控制模型研究[J]. 王铁英,左萍,蔡瑾.  信阳师范学院学报(自然科学版). 2018(04)
[2]一种快速高效提取病原真菌DNA作为PCR模板的方法[J]. 陈吉良,黄小龙,吴安迪,周双清,黄东益,刘进平.  菌物学报. 2011(01)
[3]一种经济快速提取丝状真菌基因组DNA的方法[J]. 陈锋菊,李百元,杨冰,张叶纯.  生命科学研究. 2010(02)
[4]一种快速简便的植物病原真菌基因组DNA提取方法[J]. 刘少华,陆金萍,朱瑞良,戴富明.  植物病理学报. 2005(04)



本文编号：3185692