中国水仙NtTFL1-1和NtTFL1-2基因的克隆和表达

发布时间：2021-07-04 04:16

　　中国水仙（Narcissus tazetta var. chinensis）是十大传统名花之一,一般在冬季开花,为典型的年宵花卉,开花时间的局限使其应用价值受到一定限制.水仙花球在夏季的休眠期进行花芽分化,是花期调控研究的重点阶段,但目前对其开花机制和调控的研究尚处于起步阶段. TFL1（TERMINAL FLOWER 1）是植物重要的开花相关基因,为了解该基因在中国水仙花芽分化和开花过程中的作用,以中国水仙‘金盏银台’为材料,利用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR,Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction）技术克隆中国水仙的TFL1基因NtTFL1-1和NtTFL1-2,对获得的基因序列进行相关生物信息学分析,对该基因编码蛋白进行亚细胞定位;利用荧光定量PCR技术对其在中国水仙花芽分化不同时期、不同器官类型中的差异表达情况进行测定.结果显示NtTFL1-1开放阅读框（open reading frame,ORF）共501个碱基对（bp,base pair）,编码166个氨基酸,NtTFL1-2的ORF共525 bp,编码174个氨... 

【文章来源】：应用与环境生物学报. 2020,26(02)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

Nt TFL1-1和Nt TFL1-2基因扩增结果.

将构建好的p CAMBIA1302-Nt TFL1-1和p CAMBIA1302-N t T F L1-2重组质粒转化大肠杆菌，经菌液P C R验证后挑选阳性克隆测序，结果显示p CAMBIA1302-Nt TFL1-1和p CAMBIA1302-Nt TFL1-2载体成功构建.将构建好的p CAMBIA1302-Nt TFL1-1和p CAMBIA1302-Nt TFL1-2融合表达载体瞬时转化到洋葱内表皮细胞中，通过激光共聚焦显微镜观察它们的定位情况，结果发现，Nt TFL1-1和Nt TFL1-2都定位在细胞质中（图4），与POSTR在线分析软件预测的结果一致.图3 中国水仙Nt TFL1-1和Nt TFL1-2的系统进化树.

图3 中国水仙Nt TFL1-1和Nt TFL1-2的系统进化树.2.5 中国水仙Nt TFL1-1和Nt TFL1-2在不同分化时期的主芽和不同器官中的表达

【参考文献】：
期刊论文
[1]甜橙成花关键基因CsFT的克隆分析与表达载体构建[J]. 郭鑫跃,陈伟,杨小慧,刘勇,杨莉.  分子植物育种. 2019(02)
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[3]高等植物成花诱导的分子机理研究进展[J]. 周琴,张思思,包满珠,刘国锋.  分子植物育种. 2018(11)
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[5]蜻蜓凤梨TERMINAL FLOWER 1基因的克隆及组织表达分析[J]. 雷明,李志英,王之,徐立.  分子植物育种. 2016(01)
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[7]蛋白质结构与功能中的位点氨基酸[J]. 秦涛.  生命科学仪器. 2011(02)

博士论文
[1]甘蓝型油菜花序生长调节因子基因BnTFL1的功能分析及遗传转化的优化[D]. 廖志强.湖南农业大学 2015

硕士论文
[1]龙眼ELF4和TFL1同源基因的表达与功能研究[D]. 付志远.福建农林大学 2018
[2]融安金柑开花关键基因FT/TFL1同源基因克隆及其功能初步研究[D]. 张奕.广西大学 2016
[3]月季TFL1和SOC1基因的克隆及载体构建[D]. 周权.山西农业大学 2015
[4]花生MFT基因的克隆与功能验证[D]. 朱岩.山东师范大学 2013
[5]中国水仙花芽分化及胚胎学研究[D]. 陈静.吉林农业大学 2012



本文编号：3264014