miR-223-3p调控人骨髓间充质干细胞成骨分化的机制研究
发布时间：2021-07-26 20:33
[目的]骨质疏松症（Osteoporosis,OP）是一类发病率高、危害大,易发生脆性骨折为特征的全身代谢性骨病。骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs）成骨分化能力减弱,成脂分化能力增强是导致OP的原因之一,改变BMMSCs分化方向成为治疗OP的潜在方法。微小RNA（microRNA,miRNA）是一类广泛存在于真核细胞生物的短序列非编码RNA,通过降解靶基因mRNA或抑制翻译来调节细胞的增殖、分化和凋亡等过程。最近的研究表明miRNA在BMMSCs成骨分化中具有重要的调节作用,关于其在成骨发生发展过程中所起的作用,已经日益成为研究热点。前期课题组发现miR-223-3p在骨质疏松小鼠BMMSCs中表达上调,但其是否导致了 OP的发生发展至今未见报导。本课题旨在研究miR-223-3p在人骨髓间充质干细胞（human bone marrow mesenchymal stem cells,hBMMSCs）成骨分化中的作用,预测并验证其靶基因,阐明miR-223-3p调控hBMMSCs成骨分化的分子机制,以期为OP的诊断和治疗...
【文章来源】：昆明医科大学云南省
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１原带ｈＢＭＭＳＣｓ接种３ｄ和１０ｄ后倒置显微镜下细胞形态??
疏松的发生，如影响成骨细胞或破骨细??胞分化、增殖及凋亡等，那么ｍｉＲ－２２３－３ｐ是否通过影响ｈＢＭＭＳＣｓ的成骨分化??而导致骨质疏松呢？我们在ｈＢＭＭＳＣｓ完全培养基中加入经典的成骨诱导因子??地塞米松、抗坏血酸和卩甘油磷酸钠使其向成骨细胞方向分化。在诱导前（Ｏｈ）??和诱导后１２ｈ、２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ、７ｄ分别提取细胞总ＲＮＡ，进行ｑＲＴ－ＰＣＲ技术??检测ｍｉＲ－２２３－３ｐ的表达变化。结果表明ｍｉＲ－２２３－３ｐ在ｈＢＭＭＳＣｓ成骨诱导分化??过程中呈时间依耐性下降（图３），加入成骨诱导培养液４８ｈ后，ｍｉＲ－２２３－３ｐ出??现显著性下降，差异具有统计学意义（Ｐ＜０．０１），之后随着诱导时间的延长，??ｍｉＲ－２２３－３ｐ的下降程度更明显，提示ｍｉＲ－２２３－３ｐ在ｈＢＭＭＳＣｓ成骨分化过程中??具有重要意义。??ｓｏ??１．５－１??卜?ｉｉｒｒ??Ｏ－Ｏ－Ｌ＾Ｗ?１?＾＾?，???自?＾?＾?＾??图３?ｑＲＴ－ＰＣＲ检测ｈＢＭＭＳＣｓ成骨诱导分化过程中ｍｉＲ－２２３－３ｐ表达趋势（＊＊?Ｐ＜０．０１，?＊＊＊??Ｐ＜０．００１?ｖｓ?Ｏｈ）??２５??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]TGF-β and BMP signaling in osteoblast,skeletal development,and bone formation,homeostasis and disease[J]. Mengrui Wu,Guiqian Chen,Yi-Ping Li. Bone Research. 2016(01)
[2]微小RNA与成骨细胞的分化[J]. 王振恒,王瑞,赵建宁. 中国组织工程研究. 2012(46)
[3]骨质疏松症中国白皮书[J]. EditorialBoardofOsteoporosisPreventionandTreatment(ChinaWhitePaper),ChinaHealthPromotionFoundation. 中华健康管理学杂志. 2009(3)
[4]中国原发性骨质疏松症流行病学[J]. 赵燕玲,潘子昂,王石麟,王虔,刘京萍,刘忠厚. 中国骨质疏松杂志. 1998(01)
本文编号：3304322
【文章来源】：昆明医科大学云南省
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１原带ｈＢＭＭＳＣｓ接种３ｄ和１０ｄ后倒置显微镜下细胞形态??
疏松的发生，如影响成骨细胞或破骨细??胞分化、增殖及凋亡等，那么ｍｉＲ－２２３－３ｐ是否通过影响ｈＢＭＭＳＣｓ的成骨分化??而导致骨质疏松呢？我们在ｈＢＭＭＳＣｓ完全培养基中加入经典的成骨诱导因子??地塞米松、抗坏血酸和卩甘油磷酸钠使其向成骨细胞方向分化。在诱导前（Ｏｈ）??和诱导后１２ｈ、２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ、７ｄ分别提取细胞总ＲＮＡ，进行ｑＲＴ－ＰＣＲ技术??检测ｍｉＲ－２２３－３ｐ的表达变化。结果表明ｍｉＲ－２２３－３ｐ在ｈＢＭＭＳＣｓ成骨诱导分化??过程中呈时间依耐性下降（图３），加入成骨诱导培养液４８ｈ后，ｍｉＲ－２２３－３ｐ出??现显著性下降，差异具有统计学意义（Ｐ＜０．０１），之后随着诱导时间的延长，??ｍｉＲ－２２３－３ｐ的下降程度更明显，提示ｍｉＲ－２２３－３ｐ在ｈＢＭＭＳＣｓ成骨分化过程中??具有重要意义。??ｓｏ??１．５－１??卜?ｉｉｒｒ??Ｏ－Ｏ－Ｌ＾Ｗ?１?＾＾?，???自?＾?＾?＾??图３?ｑＲＴ－ＰＣＲ检测ｈＢＭＭＳＣｓ成骨诱导分化过程中ｍｉＲ－２２３－３ｐ表达趋势（＊＊?Ｐ＜０．０１，?＊＊＊??Ｐ＜０．００１?ｖｓ?Ｏｈ）??２５??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]TGF-β and BMP signaling in osteoblast,skeletal development,and bone formation,homeostasis and disease[J]. Mengrui Wu,Guiqian Chen,Yi-Ping Li. Bone Research. 2016(01)
[2]微小RNA与成骨细胞的分化[J]. 王振恒,王瑞,赵建宁. 中国组织工程研究. 2012(46)
[3]骨质疏松症中国白皮书[J]. EditorialBoardofOsteoporosisPreventionandTreatment(ChinaWhitePaper),ChinaHealthPromotionFoundation. 中华健康管理学杂志. 2009(3)
[4]中国原发性骨质疏松症流行病学[J]. 赵燕玲,潘子昂,王石麟,王虔,刘京萍,刘忠厚. 中国骨质疏松杂志. 1998(01)
本文编号：3304322
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