Neddylation介导的Nedd4-2激活对肾脏NBCe1泛素化的调节机制研究

发布时间：2021-07-26 22:24

　　前言:溶质载体（SLC,Solute Carrier）家族是体内最大的转运体家族,SLC4是其中负责体内碳酸氢盐转运最重要的亚家族。NBCe1是SLC4家族的重要成员之一,由SLC4A4基因编码,主要在肾近端小管基底外侧膜表达。NBCe1在肾小管HCO3^-重吸收过程中发挥至关重要的作用。NBCe1的功能异常会导致严重的HCO3^-重吸收障碍,引起肾小管酸中毒,其特征为血液中的HCO3^-浓度偏低,pH值下降。有报道显示,NBCe1的突变不仅使患者血液pH值偏低,表现为严重的酸中毒,还表现为身材矮小、白内障以及偏头痛、智力障碍等异常;还有研究表明,NBCe1基因敲除鼠同样表现出非常严重的肾小管酸中毒症状及其他异常。可见NBCe1具有十分重要的生理功能,其异常严重影响人类健康。因此研究NBCe1表达调控具有重要意义,而目前相关研究报道甚少。泛素化修饰是一种重要的蛋白质翻译后修饰,发生泛素化修饰的蛋白可被26S蛋白酶体识别并降解,可见泛素化修饰对蛋白表达具有重要的调控作用。泛素E3连接酶可特异性识别靶蛋白,在泛素化修饰过程中发挥关... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：80 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

Nedd4-2与NBCe1存在相互作用(A,B)免疫共沉淀验证Nedd4-2和NBCe1的相互作用：应用NBCe1或Nedd4-2抗体进行IP后，免疫印迹实验分别检测Nedd4-2或NBCe1的表达

Nedd4-2可介导NBCe1发生泛素化修饰(A,B)用带Flag标签的NBCe1表达载体转染M1细胞，通过免疫共沉淀实验，验证NBCe1与泛素的相互作用

Nedd4-2介导的NBCe1泛素化修饰可导致其降解并改变其亚细胞定位(A)Nedd4-2过表达对NBCe1蛋白水平的影响:Nedd4-2表达载体转染M1细胞，WesternBlot检测NBCe1的蛋白水平

【参考文献】：
期刊论文
[1]Solute carrier transporters: the metabolic gatekeepers of immune cells[J]. Wenxin Song,Danyuan Li,Lei Tao,Qi Luo,Ligong Chen.  Acta Pharmaceutica Sinica B. 2020(01)
[2]Role of E3 ubiquitin ligases in gastric cancer[J]. Ya-Chao Hou,Jing-Yu Deng.  World Journal of Gastroenterology. 2015(03)



本文编号：3304479