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等温扩增技术及其结合CRISPR在微生物快速检测中的研究进展

发布时间:2021-08-13 10:37
  等温扩增技术因其对仪器依赖性低、核酸扩增高效等优势,非常适合于快速检测,已在微生物快速检测领域得到了广泛应用。本文从核酸提取、等温扩增(以环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)和重组酶聚合酶扩增技术(Recombinase polymerase amplification,RPA)为例)和产物检测角度,就近年来核酸等温扩增技术的发展及其在病原微生物核酸快速检测领域的应用进行综述,并概述了核酸等温扩增技术与CRISPR(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats)基因编辑技术相结合的最新研究成果,为这些新兴技术的研究和未来的发展提供新思路。 

【文章来源】:生物技术通报. 2020,36(05)北大核心CSCD

【文章页数】:10 页

【部分图文】:

等温扩增技术及其结合CRISPR在微生物快速检测中的研究进展


CRISPR与RPA结合[76,78-79]

原理图,原理图,核酸


纸质材料作为最便宜的基质,具有轻、薄、灵活、便于储存、环保的特点,其白色的表面非常适用于比色检测。而且纸能够利用毛细作用推动液体流动,省去了对泵的需求。因此,纸质材料是目前低廉核酸等温扩增检测设备的最理想材料。侧向流层析试纸条(LFD)是纸基检测设备中深受欢迎、应用频繁的一种核酸扩增产物分析工具[83],非常适用于未经专业训练的操作者使用,而且具有至少一年的保存期,这些优点推动了LFD的商业化发展。但是直接使用试纸条检测存在灵敏度不足的问题。解决这个难题的一种途径是将纸基材料与其他工具结合起来,实现相得益彰的效果。事实上,这一方面的研究已取得进展,比如联合量子点技术检测妊娠测试中的人绒毛膜促性腺激素[85],联合生物传感器检测兽药残留[86],以及联合等温扩增技术检测致病菌[77,87-89]等。这些LFD主要采用的是胶体金作为标记物,借助核酸等温扩增技术快速、便携等优势,核酸等温扩增-LFD技术在病原微生物的检测方面得到了快速发展,涉及医疗诊断、药物测试以及食品质量监督等多个领域。由此可见,核酸等温扩增-LFD技术的创新开发与研究将仍是未来快速检测研究的热点。

【参考文献】:
期刊论文
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[9]利用PrepFiler ExpressTM提取粪便DNA1例[J]. 刘宇轩,邱晓明,程萍萍,黄代新.  中国法医学杂志. 2017(01)
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本文编号:3340272

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