低氧经mTOR/4E-BP1和FoxO1/Atrogin-1通路影响骨骼肌蛋白质积累

发布时间：2021-08-25 04:32

　　低氧暴露对骨骼肌蛋白质合成/分解的影响受到广泛关注,但该过程中相关调控通路的研究仍十分有限。本研究拟通过蛋白质相对积累量来研究合成和分解通路的变化。将骨骼肌细胞置于低氧环境中培养,分别在0 h、6 h、12 h和24 h收集细胞,并进行检测。免疫荧光观察肌球蛋白（myosin）,翻译表面感应检测蛋白质合成,Western印迹法测试蛋白质合成相关基因（ERK1/2、p-ERK1/2、mTOR、p-mTOR、4E-BP1、p-4E-BP1）、蛋白质分解相关基因（泛素、FoxO1、p-FoxO1、MuRF1和Atrogin-1）表达量。结果发现,随着低氧干预时间延长,肌纤维直径和骨骼肌细胞中蛋白质相对积累量随时间逐渐减小（P<0.01）。与0 h相比,6 h p-4E-BP1/4E-BP1和Atrogin-1的表达显著上调（P<0.05）,p-mTOR表达显著高于0 h （P<0.01）;6 h和24 h p-mTOR/mTOR的比值显著大于0 h（P<0.05）,而p-FoxO1/FoxO1的比值随时间逐渐减小（P<0.01）。上述结果表明,低氧干预能够使骨骼... 

【文章来源】：中国生物化学与分子生物学报. 2020,36(03)北大核心CSCD

【文章页数】：10 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 细胞培养与分化
    1.2 低氧干预
    1.3 免疫荧光染色肌球蛋白计算肌管直径
    1.4 Western免疫印迹法
        1.4.1 蛋白质提取、浓度测定及制样
        1.4.2 Western印迹测定蛋白质相对表达量
    1.5 翻译表面感应检测蛋白质合成
    1.6 检测蛋白质泛素标记检测蛋白质的分解
    1.7 统计学方法
2 结果
    2.1 L6成肌细胞分化为肌管细胞
    2.2 低氧干预使骨骼肌细胞直径减小
    2.3 低氧干预使骨骼肌细胞蛋白质合成下降
    2.4 骨骼肌细胞合成相关蛋白质表达
    2.5 低氧干预使骨骼肌细胞蛋白质分解下降
    2.6 低氧干预使骨骼肌细胞蛋白质积累量下降
    2.7 与蛋白质分解相关的蛋白质表达下降
3 讨论
    3.1 低氧干预对骨骼肌形态的影响
    3.2 低氧干预对骨骼肌细胞蛋白质合成的影响
    3.3 低氧干预对骨骼肌细胞蛋白质分解的影响


【参考文献】：
期刊论文
[1]低氧暴露所致大鼠骨骼肌萎缩的蛋白转化调节机制[J]. 付鹏宇,胡扬,李燕春,于加倍,朱镕鑫,贾杰,龚丽景.  中国实验动物学报. 2019(04)
[2]低氧暴露诱导肌萎缩发生的机制探讨[J]. 付鹏宇,胡扬,龚丽景.  生理科学进展. 2019(03)
[3]抗阻训练通过Akt-FoxO1通路抑制低氧诱导的骨骼肌萎缩[J]. 于加倍,胡扬,李燕春,梅涛,韩天雨,白学成,付鹏宇,朱镕鑫,车欣媛.  中国生物化学与分子生物学报. 2018(10)
[4]AKT/FOXO在一次低氧致骨骼肌蛋白质代谢变化中的作用[J]. 李俊平,叶鸣,张全成,王瑞元.  山东体育学院学报. 2017(02)
[5]运动骨骼肌ERK1/2与mTOR通路关系的研究[J]. 王孝强,李荀,曾凡星.  沈阳体育学院学报. 2016(05)
[6]肌肉萎缩与氧化应激[J]. 李梅,侯敢,黄迪南,司秀文.  中国生物化学与分子生物学报. 2009(05)
[7]运动对骨骼肌肌动蛋白的影响研究评述[J]. 李兴平,唐国勇.  吉首大学学报(自然科学版). 2007(06)
[8]mTOR的研究进展[J]. 潘智,张令强,蒋继志,贺福初.  细胞生物学杂志. 2006(03)



本文编号：3361404