BICC1对骨髓基质细胞定向分化的调控作用研究

发布时间：2021-08-31 17:52

　　目的:探讨BICC1在骨髓基质细胞向成骨细胞及脂肪细胞分化过程中的作用。方法:构建Bicc1过表达质粒Bicc1-pcDNA3.1,以pcDNA3.1为对照,分别转染小鼠骨髓基质细胞ST2。对两组细胞进行成脂和成骨诱导,在成骨诱导14 d时碱性磷酸酶染色检测成骨分化情况,在成脂诱导5 d时利用油红O染色检测脂滴形成情况;采用q RT-PCR及Western blot技术检测细胞Bicc1过表达对成骨及成脂相关因子的影响。结果:酶切及测序结果显示Bicc1过表达质粒构建成功,将其转染到ST2细胞后,Bicc1 mRNA表达水平较对照组升高15.23倍（P<0.05）。成骨诱导条件下,Bicc1过表达组ST2细胞碱性磷酸酶染色增强,成骨相关因子Osterix、碱性磷酸酶、Osteopontin、Runt相关转录因子2（Runx2）和骨钙素的m RNA和/或蛋白表达水平显著上升（均P<0.05）。成脂诱导条件下,Bicc1过表达组ST2细胞中脂滴形成减少,油红OD₅₂₀较对照组明显降低（P<0.01）,成脂相关因子过氧化物酶体增殖物活化受体γ（PPAR... 

【文章来源】：天津医科大学学报. 2020,26(03)

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【部分图文】：

BICC1抑制ST2细胞成脂分化

2.2 Bicc1-pcDNA3.1在ST2细胞过表达转染Bicc1-pcDNA3.1后，ST2细胞中Bicc1 mRNA表达水平较对照组升高15.23倍，差异有统计学意义（n=3,P<0.05），见图2。

转染Bicc1过表达质粒后，ST2细胞向成骨细胞分化增强，表现为实验组成骨细胞碱性磷酸酶染色较对照组增强（图3A）。对染色结果进行半定量分析，结果显示实验组（0.504±0.006）的平均光密度值较对照组（0.368±0.003）明显升高（图3B）；成骨特异性基因oste rix(Osx）、ALP、骨桥蛋白（OPN）和骨钙素（Oc）的mRNA表达上调，分别为对照组的2.93、4.19、2.55和3.02倍，差异有统计学意义（n=3,P<0.05）（图3C）。ALP、OPN和Runx2的蛋白表达上调（图3D）。2.4 BICC1抑制ST2细胞成脂分化


本文编号：3375346