紫花苜蓿MsSQE1的克隆及对皂甙合成的功能分析

发布时间：2021-09-17 16:31

　　【目的】鲨烯环氧酶（squalene epoxidases,SQE）是苜蓿皂甙合成途径中的一种限速酶,与苜蓿皂甙的合成密切相关。通过对苜蓿鲨烯环氧酶（MsSQE1）基因的克隆及在苜蓿中过表达,探究鲨烯环氧酶对皂甙合成的作用机制。【方法】以模式植物蒺藜苜蓿鲨烯环氧酶基因序列设计引物,同源克隆苜蓿MsSQE1。对MsSQE1进行生物信息学分析;通过基因枪轰击技术,使MsSQE1在洋葱表皮瞬时表达,进行亚细胞定位。利用qRT-PCR方法分析该基因在根、茎、叶中的表达水平,以及在紫外辐射、ABA和GA3条件下的表达模式。在茉莉酸甲酯（MeJA）的诱导下,分析MsSQE1的转录水平,及对苜蓿皂甙含量的影响。利用根癌农杆菌转化体系,获得过表达MsSQE1的阳性转基因植株,并测定转基因植株的皂甙含量。【结果】克隆了MsSQE1的cDNA序列,开放阅读框1 578 bp,编码525个氨基酸,等电点为8.59。同源性比对分析,其氨基酸序列与蒺藜苜蓿中SQE1氨基酸序列同源性为98.6%,与拟南芥的同源性为80%。亚细胞定位显示,MsSQE1可能定位于细胞膜。组织特异性表达分析显示,MsSQE1在叶中的表... 

【文章来源】：中国农业科学. 2020,53(02)北大核心CSCD

【文章页数】：14 页

【部分图文】：

MsSQE1的克隆与cDNA全序列

代表性物种SQE1氨基酸序列的多重比对

紫花苜蓿与其他物种SQE的系统进化树

【参考文献】：
期刊论文
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[3]雷公藤鲨烯环氧酶基因克隆与表达分析[J]. 祝传书,刘艳,陈蒙蒙,蒲时,冯俊涛,张兴.  西北植物学报. 2018(05)
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本文编号：3399101