细菌纤维素合成菌的筛
发布时间：2021-09-23 04:28
细菌纤维素（Bacterial Cellulose,简称BC）是某些细菌合成的胞外多糖,由葡萄糖单体分子以β-1,4-糖苷键聚合而成的高分子生物聚合物。与植物纤维相比,BC不含木质素、果胶及半纤维素等杂质;除了具有优良的生物相容性和生物可降解性外;还具有纳米网状结构,高纯度、高抗张强度以及高持水性等独特性质。基于这些独特的性质,BC已广泛应用于生物医学、造纸、化妆品、环境污染治理以及食品制造等领域。目前,国内对BC的研究仍处于初级阶段,主要技术障碍是菌种种类和数量较少,发酵产量低和成本花费高,纤维素材料官能团单一而导致改性困难等问题。本研究成功的从腐败葡萄中获得一种具有合成BC能力的菌群HJ2-2。通过16S rRNA基因组高通量测序,结果表明HJ2-2主要包括Komagataeibacter、Lactobacillus及Acetobacter等菌属,所占比例分别为60.93%,25.65%和12.16%。从该菌群中进一步分离鉴定出三株单克隆菌,分别是Komagataeibacter xylinus XJL-06-4、Lactobacill us plantarum XJL-2和Ace...
【文章来源】：长春理工大学吉林省
【文章页数】：80 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
细菌纤维素的分子结构
第2章细菌纤维素合成菌的筛选与鉴定242.4结果与讨论2.4.1产细菌纤维素菌群HJ2-2的种属鉴定从葡萄中我们通过多轮富集筛选到能产生凝胶膜的菌群，将其命名为HJ2-2。为了分析菌群HJ2-2的种属组成，我们通过高通量测序技术对菌群HJ2-2进行了16SrRNA的鉴定。鉴定结果如图2.2所示，菌群HJ2-2中主要包含Komagataeibacter（驹形杆菌属），Lactobacillus（乳杆菌属）和Acetobacter（醋酸杆菌属），所占比例分别为60.93%，25.65%及12.16%；其中占主要地位的Komagataeibacter菌属是目前已知的最广泛的BC合成菌株，也与我们筛选出的单克隆菌株XJL-06-4的菌属鉴定结果相符。图2.2菌群HJ2-2中的种属分布2.4.2产细菌纤维素菌群HJ2-2的分离和鉴定为了分析HJ2-2合成BC的原因，我们将HJ2-2通过若干轮分离纯化获得三株形态不同的菌株，分别命名为XJL-06-4、XJL-2和D3，并对三株菌进行了菌属鉴定1)三株菌株的16SrDNA扩增通过细菌基因组提取试剂盒分别对该三株菌进行基因组DNA提取，经1%琼脂糖凝胶电泳验证，发现它们均在15,000bp大小左右出现明亮、单一的电泳条带且无DNA降解现象产生。所以，提取的目的基因组大小与细菌基因组DNA大小基本一致，因此可以将提取的目的基因用来进行PCR扩增及下一步的研究。利用PCR仪分别以其基因组为模板扩增其16SrDNA序列,凝胶电泳检测结果如
第2章细菌纤维素合成菌的筛选与鉴定25图2.3，得到一条单一且明亮的长度约为1,500bp左右的条带，与预期的16SrDNA大小基本相符。因此，实验结果确定为16SrDNA扩增序列产物，提纯后送至公司测序。a)b)c)图2.3DNA凝胶电泳图a)菌株XJL-06-4的基因组电泳图b)菌株XJL-06-4的PCR电泳图c)菌株XJL-2和D3的基因组和PCR电泳图2)菌株XJL-06-4、XJL-2和D3的测序结果采用通用引物进行16SrRNA测序，方式为双端测通，序列由吉林库美生物科技公司完成测序并拼接，菌株XJL-06-4、XJL-2和D3的序列结果如下所示：>XJL-06-4TGCAGTCGCACGAACCTTTCGGGGTTAGTGGCGGACGGGTGAGTAACGCGTAGGGATCTGTCCATGGGTGGGGGATAACTTTGGGAAACTGAAGCTAATACCGCATGACACCTGAGGGTCAAAGGCGCAAGTCGCCTGTGGAGGAACCTGCGTTCGATTAGCTAGTTGGTGGGGTAAAGGCCTACCAAGGCGATGATCGATAGCTGGTCTGAGAGGATGATCAGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGGACAATGGGCGCAAGCCTGATCCAGCAATGCCGCGTGTGTGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAAGCACTTTCAGCGGGGACGATGATGACGGTACCCGCAGAAGAAGCCCCGGCTAACTTCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGAAGGGGGCAAGCGTTGCTCGGAATGACTGGGCGTAAAGGGCGCGTAGGCGGTTTTAACAGTCAGATGTGAAATTCCTGGGCTTAACCTGGGGGCTGCATTTGATACGTTGAGACTAGAGTGTGAGAGAGGGTTGTGGAATTCCCAGTGTAGAGGTGAAATTCGTAGATATTGGGAAGAACACCGGTGGCGAAGGCGGCAACCTGGCTCATTACTGACG
【参考文献】：
期刊论文
[1]细菌纤维素纤维对纸张性能的影响[J]. 修慧娟,王志杰,李金宝. 中国造纸. 2005(03)
[2]生物有机纳米材料——细菌纤维素[J]. 马承铸. 精细与专用化学品. 2001(18)
[3]细菌纤维素的生物合成及其应用[J]. 贾士儒,欧竑宇. 化工科技市场. 2001(02)
博士论文
[1]细菌纤维素纤维复合材料的制备及其应用研究[D]. 李国辉.江南大学 2017
硕士论文
[1]细菌纤维素产生菌分离筛选及其磷酸化改性研究[D]. 程正丽.西北农林科技大学 2015
本文编号：3405039
【文章来源】：长春理工大学吉林省
【文章页数】：80 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
细菌纤维素的分子结构
第2章细菌纤维素合成菌的筛选与鉴定242.4结果与讨论2.4.1产细菌纤维素菌群HJ2-2的种属鉴定从葡萄中我们通过多轮富集筛选到能产生凝胶膜的菌群，将其命名为HJ2-2。为了分析菌群HJ2-2的种属组成，我们通过高通量测序技术对菌群HJ2-2进行了16SrRNA的鉴定。鉴定结果如图2.2所示，菌群HJ2-2中主要包含Komagataeibacter（驹形杆菌属），Lactobacillus（乳杆菌属）和Acetobacter（醋酸杆菌属），所占比例分别为60.93%，25.65%及12.16%；其中占主要地位的Komagataeibacter菌属是目前已知的最广泛的BC合成菌株，也与我们筛选出的单克隆菌株XJL-06-4的菌属鉴定结果相符。图2.2菌群HJ2-2中的种属分布2.4.2产细菌纤维素菌群HJ2-2的分离和鉴定为了分析HJ2-2合成BC的原因，我们将HJ2-2通过若干轮分离纯化获得三株形态不同的菌株，分别命名为XJL-06-4、XJL-2和D3，并对三株菌进行了菌属鉴定1)三株菌株的16SrDNA扩增通过细菌基因组提取试剂盒分别对该三株菌进行基因组DNA提取，经1%琼脂糖凝胶电泳验证，发现它们均在15,000bp大小左右出现明亮、单一的电泳条带且无DNA降解现象产生。所以，提取的目的基因组大小与细菌基因组DNA大小基本一致，因此可以将提取的目的基因用来进行PCR扩增及下一步的研究。利用PCR仪分别以其基因组为模板扩增其16SrDNA序列,凝胶电泳检测结果如
第2章细菌纤维素合成菌的筛选与鉴定25图2.3，得到一条单一且明亮的长度约为1,500bp左右的条带，与预期的16SrDNA大小基本相符。因此，实验结果确定为16SrDNA扩增序列产物，提纯后送至公司测序。a)b)c)图2.3DNA凝胶电泳图a)菌株XJL-06-4的基因组电泳图b)菌株XJL-06-4的PCR电泳图c)菌株XJL-2和D3的基因组和PCR电泳图2)菌株XJL-06-4、XJL-2和D3的测序结果采用通用引物进行16SrRNA测序，方式为双端测通，序列由吉林库美生物科技公司完成测序并拼接，菌株XJL-06-4、XJL-2和D3的序列结果如下所示：>XJL-06-4TGCAGTCGCACGAACCTTTCGGGGTTAGTGGCGGACGGGTGAGTAACGCGTAGGGATCTGTCCATGGGTGGGGGATAACTTTGGGAAACTGAAGCTAATACCGCATGACACCTGAGGGTCAAAGGCGCAAGTCGCCTGTGGAGGAACCTGCGTTCGATTAGCTAGTTGGTGGGGTAAAGGCCTACCAAGGCGATGATCGATAGCTGGTCTGAGAGGATGATCAGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGGACAATGGGCGCAAGCCTGATCCAGCAATGCCGCGTGTGTGAAGAAGGTTTTCGGATTGTAAAGCACTTTCAGCGGGGACGATGATGACGGTACCCGCAGAAGAAGCCCCGGCTAACTTCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGAAGGGGGCAAGCGTTGCTCGGAATGACTGGGCGTAAAGGGCGCGTAGGCGGTTTTAACAGTCAGATGTGAAATTCCTGGGCTTAACCTGGGGGCTGCATTTGATACGTTGAGACTAGAGTGTGAGAGAGGGTTGTGGAATTCCCAGTGTAGAGGTGAAATTCGTAGATATTGGGAAGAACACCGGTGGCGAAGGCGGCAACCTGGCTCATTACTGACG
【参考文献】：
期刊论文
[1]细菌纤维素纤维对纸张性能的影响[J]. 修慧娟,王志杰,李金宝. 中国造纸. 2005(03)
[2]生物有机纳米材料——细菌纤维素[J]. 马承铸. 精细与专用化学品. 2001(18)
[3]细菌纤维素的生物合成及其应用[J]. 贾士儒,欧竑宇. 化工科技市场. 2001(02)
博士论文
[1]细菌纤维素纤维复合材料的制备及其应用研究[D]. 李国辉.江南大学 2017
硕士论文
[1]细菌纤维素产生菌分离筛选及其磷酸化改性研究[D]. 程正丽.西北农林科技大学 2015
本文编号：3405039
本文链接：https://www.wllwen.com/projectlw/swxlw/3405039.html
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