基于小分子介导DNA信号放大的荧光分析方法研究
发布时间：2021-10-07 15:14
信号放大是实现灵敏分析的有效途径,DNA因为具有独特的碱基互补配对特性以及可化学合成的简便性已成为信号放大的良好材料。DNA信号放大已被广泛应用于生物分子的灵敏分析检测。本论文从小分子介导DNA信号放大角度出发,通过酰胺键的形成、点击化学以及腙化学实现了小分子介导的DNA杂交链反应（HCR）与DNA行走（DNA Walker）,构建了两种新型的荧光分析方法,分别用于葡萄糖苷酶及其抑制剂的分析和脂多糖（LPS）及糠醛的检测。主要研究内容如下:1.酶底物介导的DNA杂交链反应原位检测α-葡萄糖苷酶活性及抑制剂筛选新方法论文本部分提出了一种基于小分子介导DNA杂交链反应（HCR）的α-葡萄糖苷酶（α-Glu）及其抑制剂的原位分析新方法。作为一种重要的消化酶,α-Glu可以催化底物对氨基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷（pAPG）水解为对氨基苯（pAP）和α-D-吡喃葡萄糖苷。我们将pAPG共价连接至磁纳米球（AMNSS）上,其含有顺式二醇基团可以与硼酸标记的起始链形成磷酸二酯键,导致起始链被固定于AMNSS,进而驱动AMNSS周围H...
【文章来源】：上海大学上海市 211工程院校
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
DBCO与叠氮环加成反应示意图
图 1.2 腙化学示意图。Figure 1.2 Scheme of the hydrazine chemistry.腙化学作为一种化学选择性连接，由于其模块性以及特殊性，因而具有广泛性和通用性，腙化学在许多研究领域中，例如金属和共价有机框架、动态组合化学、孔运输材料、分子开关以及传感器中有着广泛的使用[10]。腙化学之所以有这些特性均源于其有亲核的亚胺以及更活泼的氨基型氮，同时具有亲电性和亲核性的亚胺碳以及 CN 双键固有的构型异构，从而赋予了其稳定且通用的物理和化学性质，在其应用范围广方面发挥了重要作用[11]。其反应如图 1.2 所示。
1.1.3 硼酸识别硼酸可以与 1,2-／1,3-邻羟基结构（特别是糖类化合物）可逆地共价结合，形成五元或六元环内酯结构，可以作为生物传感器的识别单元，在生物医药、食品工业、环保等领域有着广泛利用。由于糖类化合物在自然界中存在广泛且生物学意义重要，因此利用硼酸识别的生物传感器来检测分析糖类化合物得到越来越多研究人员的重视[16, 17]。除此以外 4-氨基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷（pAPG）可以做为葡萄糖苷酶切割的底物，被用于葡萄糖苷酶分析以及抑制剂的筛选[18]。而硼酸作为一种优良的分子受体，对于糖类，硼酸也可以以高亲和力可逆地结合二醇形成酯[19, 20]，在这种条件下，Zhang 等[21]提出了 α-葡萄糖苷酶的比色法。活性测定及其抑制剂筛选。这种方法基于苯二硼酸和糖原部分与 AuNP 相连的酶底物的特异性识别，如图 1.4 所示
本文编号：3422289
【文章来源】：上海大学上海市 211工程院校
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
DBCO与叠氮环加成反应示意图
图 1.2 腙化学示意图。Figure 1.2 Scheme of the hydrazine chemistry.腙化学作为一种化学选择性连接，由于其模块性以及特殊性，因而具有广泛性和通用性，腙化学在许多研究领域中，例如金属和共价有机框架、动态组合化学、孔运输材料、分子开关以及传感器中有着广泛的使用[10]。腙化学之所以有这些特性均源于其有亲核的亚胺以及更活泼的氨基型氮，同时具有亲电性和亲核性的亚胺碳以及 CN 双键固有的构型异构，从而赋予了其稳定且通用的物理和化学性质，在其应用范围广方面发挥了重要作用[11]。其反应如图 1.2 所示。
1.1.3 硼酸识别硼酸可以与 1,2-／1,3-邻羟基结构（特别是糖类化合物）可逆地共价结合，形成五元或六元环内酯结构，可以作为生物传感器的识别单元，在生物医药、食品工业、环保等领域有着广泛利用。由于糖类化合物在自然界中存在广泛且生物学意义重要，因此利用硼酸识别的生物传感器来检测分析糖类化合物得到越来越多研究人员的重视[16, 17]。除此以外 4-氨基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷（pAPG）可以做为葡萄糖苷酶切割的底物，被用于葡萄糖苷酶分析以及抑制剂的筛选[18]。而硼酸作为一种优良的分子受体，对于糖类，硼酸也可以以高亲和力可逆地结合二醇形成酯[19, 20]，在这种条件下，Zhang 等[21]提出了 α-葡萄糖苷酶的比色法。活性测定及其抑制剂筛选。这种方法基于苯二硼酸和糖原部分与 AuNP 相连的酶底物的特异性识别，如图 1.4 所示
本文编号：3422289
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