沙狐细胞体外培养体系建立及其生物学特性分析
发布时间：2021-10-07 21:20
沙狐（Vulpes corsac）,又名东沙狐,在维持食物链的稳定等生态学方面有重要作用。目前沙狐种群数量在自然界中大幅缩减,为了保护和发展这一物种资源以及维护生态平衡我们开展了本次实验。有关沙狐的细胞培养建系及其生物学特性分析的研究尚未报道。本实验利用组织块贴壁法对沙狐部分组织进行原代建系并成功建立沙狐气管成纤维细胞系和软骨成纤维细胞系,两种细胞系均符合成纤维细胞的基本特征,主要表现为细胞贴壁生长且呈典型的梭形和多边形。对以上两种组织来源的成纤维细胞进行了相关生物学特性研究。测定了两种组织细胞的贴壁率,冻存前后存活率,绘制了生长曲线且生长曲线为S型。脂质体(LipofectamineTM2000)转染绿色荧光蛋白质粒（PEGFP-C1）的转染效率大于20%,采用常规技术低渗滴片法制备染色体标本,并对沙狐染色体进行了核型及其G带分析,结果显示中期染色体二倍体（2n=36）约占细胞总数的84%,其中17对为常染色体其形态类型为1st+10m+6sm,另1对为性染色体X其形态类型为m。本研究成功建立了沙狐两种成纤维细胞系及其相应的培养体系。通过检测确定所建立细胞系的染...
【文章来源】：内蒙古大学内蒙古自治区 211工程院校
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
沙狐原代成纤维细胞A图为气管成纤维细胞B图为软骨成纤维细胞标尺=200μmFig2.1PrimarycultureofcorsacfoxcellsAistrachealfibroblastsandBiscartilage200μm200μm
2.4.2 沙狐组织成纤维细胞传代培养结果（1）沙狐气管成纤维细胞P3、P5、P7培养4 ~ 5天形态图图2.2 沙狐气管成纤维细胞 P3、P5、P7 标尺=200 μmFig2.2 Tracheal fibroblasts of corsac fox P3、P5、P7 Bar=200 μm（2）沙狐软骨成纤维细胞P3、P5、P7培养4 ~ 5天形态图图2.3 沙狐软骨成纤维细胞 P3、P5、P7 标尺=200 μmFig2.3 Cartilage fibroblasts of corsac fox P3、P5、P7 Bar=200 μm图2.2至图2.3分别为沙狐气管成纤维细胞和软骨成纤维细胞在P3、P5、P7培养2 ~ 3天时的形态图。从原代细胞建系到传代培养的过程中，发现有未贴壁的悬浮细胞，后经过几次换液操作纯化后，得到单一的细胞种类，此时表明细胞系已经纯化。两种成纤维细胞在较低代次时细胞形状立体感较强，随后发现培养时间越长代次越高，细胞形态则趋于扁平状。P3P5 P7200μm200μm200μm200μm200μm200μmP3 P5 P7
Fig2.2 Tracheal fibroblasts of corsac fox P3、P5、P7 Bar=200 μm（2）沙狐软骨成纤维细胞P3、P5、P7培养4 ~ 5天形态图图2.3 沙狐软骨成纤维细胞 P3、P5、P7 标尺=200 μmFig2.3 Cartilage fibroblasts of corsac fox P3、P5、P7 Bar=200 μm图2.2至图2.3分别为沙狐气管成纤维细胞和软骨成纤维细胞在P3、P5、P7培养2 ~ 3天时的形态图。从原代细胞建系到传代培养的过程中，发现有未贴壁的悬浮细胞，后经过几次换液操作纯化后，得到单一的细胞种类，此时表明细胞系已经纯化。两种成纤维细胞在较低代次时细胞形状立体感较强，随后发现培养时间越长代次越高，细胞形态则趋于扁平状。P3P5 P7200μm200μm200μm200μm200μm200μmP3 P5 P7
【参考文献】：
期刊论文
[1]我国生物种质资源保护和共享利用的现状与发展思考[J]. 程苹,卢凡,张鹏,马俊才,王瑞丹. 中国科技资源导刊. 2018(05)
[2]黄条染色体多种显带的形态特征分析[J]. 刘永山,柳学周,史宝,徐永江,李荣,吕永军,宋雪松,王滨,姜燕. 水产学报. 2018(09)
[3]浅谈我国濒危野生动物保护现状与前景展望[J]. 曲红焱. 农家参谋. 2018(08)
[4]马身猪耳缘组织成纤维细胞的体外培养与鉴定[J]. 张旗,郭晓红,高鹏飞,靳玉舒,李萌,成志敏,张宁芳,乐宝玉,刘宏,曹果清,李步高. 中国畜牧兽医. 2017(08)
[5]几种食肉目动物的足迹与粪便形态描述[J]. 张帅,鲍清泉,汤鹏展,张书理,杨永昕,李桂林,鲍伟东. 四川动物. 2013(06)
[6]毛脚鵟气管源细胞分离及体外培养[J]. 李瑶,云芳,宋丹,马鸿梦,侯本磊,李煜. 南昌大学学报(理科版). 2013(03)
[7]猞猁3类组织体外培养细胞的生物学特性分析[J]. 道日娜,刘刚,王蓉蓉,李云霞,戴雁峰,李喜和,李煜,李瑶. 中国畜牧兽医. 2013(06)
[8]不同冷冻保护剂和冷冻方法对小鼠耳皮肤成纤维细胞冻存效果的影响[J]. 肖雄,邓玉金,赵海龙,吴有博,李跃民. 动物医学进展. 2012(05)
[9]草原野生沙狐对鼠害影响的研究[J]. 徐光青. 新疆畜牧业. 2012(03)
[10]药根碱诱导白血病K562细胞凋亡的研究[J]. 王天晓,李克,王世广,丛悦,王颖莹. 中国药学杂志. 2010(23)
博士论文
[1]鱼腥草素钠抗LPS诱导的奶牛子宫内膜上皮细胞炎症的分子机制[D]. 朱琪.中国农业大学 2015
硕士论文
[1]皖东牛皮肤成纤维细胞体外培养建系及生长特性鉴定[D]. 尚慧.安徽农业大学 2018
[2]中华鼢鼠成纤维细胞体外培养建系及其生物学特性分析[D]. 穆瑶.内蒙古大学 2018
[3]中国犬科动物线粒体基因组研究及系统发育分析[D]. 张进.曲阜师范大学 2014
[4]梅花鹿生茸区骨膜细胞培养及其染色体核型分析[D]. 于淼.中国农业科学院 2012
[5]Ⅱ型神经纤维瘤病许旺细胞瘤原代细胞培养及NF2基因突变的个体化研究[D]. 王维.天津医科大学 2011
[6]我国动物遗传资源保护法律制度研究[D]. 刘勇.兰州大学 2011
[7]藏獒三种组织成纤维细胞系的构建及生物学研究[D]. 敏云馨.西北民族大学 2010
[8]天祝白牦牛、岷县黑裘皮羊成纤维细胞库的构建[D]. 冯若飞.西北民族大学 2007
[9]七个羊品种成纤维细胞库构建及其生物学特性研究[D]. 周雪雁.山西农业大学 2005
[10]我国五个地方畜禽品种种质资源成纤维细胞系的构建及生物学特性研究[D]. 梁海青.山西农业大学 2004
本文编号：3422789
【文章来源】：内蒙古大学内蒙古自治区 211工程院校
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
沙狐原代成纤维细胞A图为气管成纤维细胞B图为软骨成纤维细胞标尺=200μmFig2.1PrimarycultureofcorsacfoxcellsAistrachealfibroblastsandBiscartilage200μm200μm
2.4.2 沙狐组织成纤维细胞传代培养结果（1）沙狐气管成纤维细胞P3、P5、P7培养4 ~ 5天形态图图2.2 沙狐气管成纤维细胞 P3、P5、P7 标尺=200 μmFig2.2 Tracheal fibroblasts of corsac fox P3、P5、P7 Bar=200 μm（2）沙狐软骨成纤维细胞P3、P5、P7培养4 ~ 5天形态图图2.3 沙狐软骨成纤维细胞 P3、P5、P7 标尺=200 μmFig2.3 Cartilage fibroblasts of corsac fox P3、P5、P7 Bar=200 μm图2.2至图2.3分别为沙狐气管成纤维细胞和软骨成纤维细胞在P3、P5、P7培养2 ~ 3天时的形态图。从原代细胞建系到传代培养的过程中，发现有未贴壁的悬浮细胞，后经过几次换液操作纯化后，得到单一的细胞种类，此时表明细胞系已经纯化。两种成纤维细胞在较低代次时细胞形状立体感较强，随后发现培养时间越长代次越高，细胞形态则趋于扁平状。P3P5 P7200μm200μm200μm200μm200μm200μmP3 P5 P7
Fig2.2 Tracheal fibroblasts of corsac fox P3、P5、P7 Bar=200 μm（2）沙狐软骨成纤维细胞P3、P5、P7培养4 ~ 5天形态图图2.3 沙狐软骨成纤维细胞 P3、P5、P7 标尺=200 μmFig2.3 Cartilage fibroblasts of corsac fox P3、P5、P7 Bar=200 μm图2.2至图2.3分别为沙狐气管成纤维细胞和软骨成纤维细胞在P3、P5、P7培养2 ~ 3天时的形态图。从原代细胞建系到传代培养的过程中，发现有未贴壁的悬浮细胞，后经过几次换液操作纯化后，得到单一的细胞种类，此时表明细胞系已经纯化。两种成纤维细胞在较低代次时细胞形状立体感较强，随后发现培养时间越长代次越高，细胞形态则趋于扁平状。P3P5 P7200μm200μm200μm200μm200μm200μmP3 P5 P7
【参考文献】：
期刊论文
[1]我国生物种质资源保护和共享利用的现状与发展思考[J]. 程苹,卢凡,张鹏,马俊才,王瑞丹. 中国科技资源导刊. 2018(05)
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[3]浅谈我国濒危野生动物保护现状与前景展望[J]. 曲红焱. 农家参谋. 2018(08)
[4]马身猪耳缘组织成纤维细胞的体外培养与鉴定[J]. 张旗,郭晓红,高鹏飞,靳玉舒,李萌,成志敏,张宁芳,乐宝玉,刘宏,曹果清,李步高. 中国畜牧兽医. 2017(08)
[5]几种食肉目动物的足迹与粪便形态描述[J]. 张帅,鲍清泉,汤鹏展,张书理,杨永昕,李桂林,鲍伟东. 四川动物. 2013(06)
[6]毛脚鵟气管源细胞分离及体外培养[J]. 李瑶,云芳,宋丹,马鸿梦,侯本磊,李煜. 南昌大学学报(理科版). 2013(03)
[7]猞猁3类组织体外培养细胞的生物学特性分析[J]. 道日娜,刘刚,王蓉蓉,李云霞,戴雁峰,李喜和,李煜,李瑶. 中国畜牧兽医. 2013(06)
[8]不同冷冻保护剂和冷冻方法对小鼠耳皮肤成纤维细胞冻存效果的影响[J]. 肖雄,邓玉金,赵海龙,吴有博,李跃民. 动物医学进展. 2012(05)
[9]草原野生沙狐对鼠害影响的研究[J]. 徐光青. 新疆畜牧业. 2012(03)
[10]药根碱诱导白血病K562细胞凋亡的研究[J]. 王天晓,李克,王世广,丛悦,王颖莹. 中国药学杂志. 2010(23)
博士论文
[1]鱼腥草素钠抗LPS诱导的奶牛子宫内膜上皮细胞炎症的分子机制[D]. 朱琪.中国农业大学 2015
硕士论文
[1]皖东牛皮肤成纤维细胞体外培养建系及生长特性鉴定[D]. 尚慧.安徽农业大学 2018
[2]中华鼢鼠成纤维细胞体外培养建系及其生物学特性分析[D]. 穆瑶.内蒙古大学 2018
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[5]Ⅱ型神经纤维瘤病许旺细胞瘤原代细胞培养及NF2基因突变的个体化研究[D]. 王维.天津医科大学 2011
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[9]七个羊品种成纤维细胞库构建及其生物学特性研究[D]. 周雪雁.山西农业大学 2005
[10]我国五个地方畜禽品种种质资源成纤维细胞系的构建及生物学特性研究[D]. 梁海青.山西农业大学 2004
本文编号：3422789
本文链接：https://www.wllwen.com/projectlw/swxlw/3422789.html
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