Trio对破骨细胞的调控作用

发布时间：2021-10-08 13:40

　　目的:构建破骨细胞特异性Trio基因敲除小鼠模型,探究Trio在骨改建过程中对破骨细胞的影响。方法:应用creloxp系统培育破骨细胞特异性Trio基因敲除小鼠,Micro-CT扫描小鼠股骨,股骨组织切片采用HE染色、抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察成骨细胞及破骨细胞数量。使用核因子（nuclear factor,NF）-κB受体活化因子配体及巨噬细胞集落刺激因子诱导小鼠骨髓细胞分化为破骨细胞,观测Trio对破骨细胞形成的影响。结果:Trio基因敲除小鼠的体型小,Micro-CT显示骨密度及相关参数升高。组织学染色表明基因敲除小鼠股骨的骨量增加,破骨细胞变少。体外实验中,Trio基因敲除小鼠骨髓细胞诱导分化的破骨细胞数量减少。结论:成功构建破骨细胞特异性Trio基因敲除小鼠模型,Trio敲除后,小鼠骨量增加,破骨细胞的分化受到抑制。 

【文章来源】：南京医科大学学报(自然科学版). 2020,40(09)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 CKO小鼠的繁育
        1.2.2 基因型鉴定
        1.2.3 样本收集
        1.2.4 Micro-CT
        1.2.5 破骨细胞的提取及培养
        1.2.6 免疫荧光染色
        1.2.7 RNA提取及实时荧光定量PCR(quantitativereal-time PCR,RT-qPCR)
        1.2.8 蛋白提取及Western blot
        1.2.9 HE染色
        1.2.1 0 抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate resistant acid phosphatase,TRAP）染色
    1.3 统计学方法
2 结果
    2.1 Trio在破骨细胞中表达且集中于细胞边缘
    2.2 Trio基因特异性敲除小鼠模型的鉴定
    2.3 CKO小鼠体型减小并表现出骨量增加
    2.4 体外培养的CKO小鼠破骨细胞数量减少
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]Distinct functions of Trio GEF domains in axon outgrowth of cerebellar granule neurons[J]. Tao Tao,Jie Sun,Yajing Peng,Pei Wang,Xin Chen,Wei Zhao,Yeqiong Li,Lisha Wei,Wei Wang,Yanyan Zheng,Ye Wang,Xuena Zhang,Min-Sheng Zhu.  Journal of Genetics and Genomics. 2019(02)
[2]正畸驱动的骨皮质切开术对巨噬细胞的作用及机制研究[J]. 王燕,朱琳琳,王思雨,张舒婷,孙雯,李琥,张瀚文,严斌.  南京医科大学学报(自然科学版). 2018(05)
[3]正畸牙齿移动中破骨细胞活动的影响因素[J]. 米雁翎,刘婷,蒋自然,张凡.  口腔医学. 2017(01)



本文编号：3424274