轮状病毒VP3表达载体pEGFP-VP3的构建、表达及功能研究

发布时间：2021-11-04 17:24

　　通过构建重组表达载体pEGFP-VP3,将pEGFP-VP3转染MA104细胞,观察VP3的表达情况和表达的VP3对轮状病毒复制的作用,进一步评价构建方式是否成功。GFP荧光和Western Blot结果显示,pEGFP-VP3转染MA104细胞48 h,重组蛋白VP3表达量最高。通过RV拷贝数和免疫荧光检测病毒的复制情况,结果均显示重组蛋白VP3可促进病毒复制,为后续更加深入地探究VP3的功能及在轮状病毒复制中的作用提供了实验基础。 

【文章来源】：生物学杂志. 2020,37(06)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

重组质粒的构建及鉴定电泳结果

图1 重组质粒的构建及鉴定电泳结果重组质粒pEGFP-N2-VP3 转染MA104 细胞后,分别于不同时段取出细胞,用倒置荧光显微镜观察GFP荧光在细胞内的分布及表达情况。结果显示, MA104细胞的胞质和胞核中均有pEGFP-N2-VP3分布。pEGFP-N2-VP3表达量初期随转染时间逐步增高,且在48 h达到高峰,随后表达下降(图3)。

重组质粒pEGFP-N2-VP3 转染MA104 细胞后,分别于不同时段取出细胞,用倒置荧光显微镜观察GFP荧光在细胞内的分布及表达情况。结果显示, MA104细胞的胞质和胞核中均有pEGFP-N2-VP3分布。pEGFP-N2-VP3表达量初期随转染时间逐步增高,且在48 h达到高峰,随后表达下降(图3)。2.2 转染pEGPF-N2-VP3对RV复制的影响

【参考文献】：
期刊论文
[1]轮状病毒结构蛋白的研究进展[J]. 汤璘珊,陈兰举.  医学综述. 2013(01)



本文编号：3476167