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中国白纹伊蚊击倒抗性基因突变及检测技术研究

发布时间:2021-11-19 17:48
  白纹伊蚊是我国常见的蚊种之一,极具侵袭力,能够传播如登革热、黄热病、寨卡病毒病和基孔肯亚热等多种病毒性传染病。将人类感染这些传染病的风险降到最低,有效防控其传播媒介白纹伊蚊是关键。近年来,我国登革热连年多省市暴发,且发生范围不断扩大,使得防控需求日益加大。目前,登革热疫情暴发后蚊虫的控制很大程度上依赖于化学杀虫剂的使用。由于拟除虫菊酯类杀虫剂具有高效杀虫活性,且对哺乳动物的毒性较低等优势,这类杀虫剂使用最为普遍。然而,持续、大量地使用杀虫剂杀灭白纹伊蚊,就相当于给予种群一种选择压力。为了抵抗这种选择压力,白纹伊蚊体内杀虫剂的靶标基因某些特定位点会发生突变,导致其对杀虫剂的抗药性得到发生和发展。抗药性,是蚊虫防控的巨大障碍。因此,监测野外白纹伊蚊种群抗药性靶标基因的突变情况,阐明蚊虫抗药性的产生机制对于抗药性治理、指导杀虫剂的科学合理使用至关重要。本研究,在全国范围内采集39个地理种群的白纹伊蚊。针对现场采集的蚊虫样本,首先用分子生物学方法研究了与拟除虫菊酯类杀虫剂抗药性密切相关的VGSC基因V1016、11532与F1534位点的突变与种群遗传学参数;第二,针对F1534位点建立了更加... 

【文章来源】:中国疾病预防控制中心北京市

【文章页数】:67 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

中国白纹伊蚊击倒抗性基因突变及检测技术研究


图2-1白纹伊蚊COI基因片段、VGSC基因片段电泳图??注:M为lOObpDNALadder;?COI为白纹伊蚊线粒体基因;Domainll为白纹伊蚊??

示意图,琼脂糖,凝胶电泳,突变型


?中国疾病预防控制中心硕士学位论文???Control?band?(S30bp)??I?I??zhuAF?zhuAR??—???—??TTC?(Phe1534)??Exon28????I?ExonM????Exon30??1534??TCCrrCG?(Ser1534)??TGC?(Cys1534)??CTCHTG?(Leu1534)??zhu1534F/S/C/L,/Lj?ZhuAR??I?I??Specific?band?(389?bp)??图3-1?AS-PCR引物位置和PCR产物大小设计示意图??3.2结果与分析??12.1琼脂糖凝胶电泳??利用建立的AS-PCR检测方法对其中165个核酸样本(涵盖了?8种基因型)??进行检测,所有样本均扩增成功。从以上8种基因型的样木中各随机选取一个样??本进行琼脂糖凝胶电泳,共得到9种电泳条带图谱,如图3-2所示。大小介于500??bp至600bp的条带代表阳性对照,出现在400bp指示带附近的为野生型或突变??型条带。每4个泳道的电泳图谱代表1个核酸样本的基因型。其中,泳道1?4为??野生型纯合子F/F,泳道5 ̄8为野生/突变型杂合子F/S,泳道9?12为野生/突变??型杂合子F/C,泳道13?]6为野生/突变型杂合子F/L?(CTC/L),泳道17?20为野??生/突变型杂合子F/L?(TTG/L),泳道21?24为突变型纯合子S/S。泳道25?28为??突变型纯合子L/L?(TTG/L),在本研究中它被非特异性地测定为野生/突变型杂??合子F/L?(TTG/L)。泳道29?32为突变型杂合子S/C,泳道33?36为突变型纯合??子

【参考文献】:
期刊论文
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博士论文
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硕士论文
[1]我国白纹伊蚊抗药性及kdr基因分布研究[D]. 赵春春.中国疾病预防控制中心 2019
[2]景洪市登革热媒介伊蚊对常用杀虫剂的抗药性及机制初步研究[D]. 师灿南.中国疾病预防控制中心 2017
[3]中国白纹伊蚊的分布和影响因素及登革热的风险评估研究[D]. 吴凡.中国疾病预防控制中心 2009



本文编号:3505546

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