罗汉果SgARF9基因克隆及其CRISPR/Cas9基因编辑载体构建

发布时间：2021-11-23 19:59

　　[目的]研究SgARF9基因与罗汉果果实发育的关系。[方法]在转录组Unigene序列基础上,对罗汉果SgARF9基因进行克隆,并结合CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建以SgARF9为靶基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体。[结果]克隆得到SgARF9基因序列,且成功构建包含SgARF9基因靶点的编辑载体。[结论]该研究为揭示SgARF9基因的分子生物学功能,明确其在罗汉果果实起始发育中的遗传调控机制提供了基础。 

【文章来源】：安徽农业科学. 2020,48(02)

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 仪器、试剂
    1.3 引物序列
    1.4 研究方法
        1.4.1 SgARF9基因克隆及序列分析。
        1.4.2 CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建。
            1.4.2.1 靶点接头的选择。
            1.4.2.2 靶点接头制备及酶切-连接反应。
            1.4.2.3 两轮PCR扩增。
            1.4.2.4 扩增产物的酶切连接及转化。
2 结果与分析
    2.1 基因克隆
    2.2 靶点接头二级结构
    2.3 巢式PCR扩增
    2.4 测序验证
3 结论与讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]红麻miR394基因的克隆及CRISPR/Cas9载体构建[J]. 史奇奇,李增强,韦范,汤丹峰,贾瑞星,谢红英,周瑞阳,陈鹏.  中国农业大学学报. 2019(01)
[2]植物CRISPR/Cas9多基因编辑载体构建和突变分析的操作方法[J]. 曾栋昌,马兴亮,谢先荣,祝钦泷,刘耀光.  中国科学:生命科学. 2018(07)
[3]单性结实的分子研究进展[J]. 涂冬萍,马小军,莫长明,潘丽梅,冯世鑫,黄杰.  中草药. 2014(20)
[4]罗汉果甜甙V在各部位的含量分布[J]. 苏小建,刘国雄,聂晓,辛云海,何星存.  食品科技. 2007(05)
[5]泛素启动子的研究进展[J]. 赵慧,郑文岭,崔东,马文丽.  广东医学. 2003(12)
[6]2,4-D与罗汉果单性结实[J]. 李珍贞,邬辉平.  植物杂志. 1988(03)



本文编号：3514551